随着现代
食品工业的发展，人们为了增加食品的风味、改善色泽和延长货架期等，采用了多种现代食品加工
技术，但是不幸的是，由于种种原因，在某些食品加工过程中使用了危害人们健康的物质，比如最近出现的食品中添加“塑化剂”
邻苯二甲酸酯类物质。
ve
K oiFtPki 以往，由于人们对邻
苯二甲酸酯类的
安全性认识不足，多种食品都涉嫌“被添加”。博纳艾杰尔科技根据不同食品基质的具体情况，开发了一系列的
检测方案，以供大家参考。
` -w;=_Bm P!]DV$o 1.水性样品 0K#dWc}"a ):.]4n{L 此类样品包括瓶装纯净水、矿泉水，茶、果汁和功能饮料等；某些可水溶解的固体样品。可以先制成水溶液，然后全部作为待处理液，如无脂糖果。推荐前处理柱为Cleanert DEHP （500mg/6mL）。
! ). D W cqYpPv 样品处理：取10mL样品，进行固相萃取富集处理
hPEK@ ^l iyWl 固相萃取
方法：
nE/T) [1| !5{t1 oJ 活化：5mL甲醇、5mL水
YE0s5bB6 C t.Q)p-wn 上样：10mL水性样品
#_Tceq5 /
@% 淋洗：5mL5%甲醇水，真空抽干20min。
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vvdp?Z $ XaZqzeVI 洗脱：5mL甲醇
W\X51DrEx f?
ko%c_p 检测：将洗脱液用氮气吹干后，以1mL甲醇定容，然后用液相色谱法检测。
e;[/ytz"d' 4Tq%V|5"& 说明：此法多适用于配套液相色谱检测，当样品中邻苯二甲酸酯类的含量较低时，需要采用固相萃取富集才能检测的情况。
*4WOmsj P\w.:.2 一般来说，对于此类样品，可以采用正己烷液液萃取的办法，用GC/MS（灵敏度较高）直接检测。
8l)^#"ySA t;ggc{ 2.低脂液体样品 54tpR6%3p v{&c
god 此类样品包含液态奶制品、果酱、糖浆等。推荐前处理
产品为Cleanert MAS-PAE管。
iB[%5i- v#= - 样品处理：向玻璃离心管中加入2mL样品，然后加入4mL乙腈：甲基叔丁基谜（9:1，V/V），将离心管涡旋2min，最后加入Cleanert MAS-PAE填料，再将离心管涡旋振荡2min后，以4000rpm的转速离心5min，取上清液，以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后，待检。
;M\H#%G. qnru atA 检测：GC/MS检测。
|o=eS&) d-39G*;1 3.低脂固体食品 +'Tr>2V Nn4< :2 此类样品包括奶粉、饼干、糕点、果冻、奶糖等，推荐产品为Cleanert MAS-PAE管。
MQw{^6Z >1 9`QWq u[ 样品处理：取1g已制成粉末状的样品，2mL水，加入到Cleanert MAS-PAE离心管中，然后加入4mL乙腈：甲基叔丁基谜（9:1，V/V），将离心管涡旋2min，最后加入Cleanert MAS-PAE填料，再将离心管涡旋振荡2min后，以4000rpm的转速离心5min，取上清液，以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后，待检。
gx@ b|rj; cYmMO[4YG' 检测：GC/MS检测。
(/tb e@< Y)g<> }F 4.高脂样品 #V*<G#B gO1`zP!9Z 此类样品包括植物油脂、动物油脂、奶酪、动物组织性食品等，推荐前处理柱为Cleanert PAE。
# ]&=]K1V ^SVdaQ {7 4.1 动植物油脂样品的处理 MjQKcL4%7 Ng0V&oDI 取0.2g样品，用1mL正己烷溶解，作为待净化液。
`.>2h}op i/NY86A 固相萃取方法：
]SFB_ 5Gb #x" 4tI 活化：5mL正己烷
#K yb9Qg O|O #T.Tg 上样：全部待净化液
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E-Fu O S6*3."Sk 淋洗：7mL正己烷
L!| c: 8 l
Ztq_* Fl 洗脱：3mL乙酸乙酯：正己烷（50:50，v/v），洗脱2次，合并洗脱液。
=1!wep" XsQ?&xK=u 40℃氮吹至近干（目视只剩少许粘稠油状物体），加入1mL乙腈反萃取，涡旋振荡
O%AQ'[' /0>Cy\eN0 3min，以4000rpm转速，离心5min，轻轻地将上清液倒入2mL玻璃样品瓶中，作为待
2_6x2I a4 U-6b> < 检液。
2~AG Ox qiV#T +\ 检测：GC/MS检测。
^| 5bK_Z& M]oO1GM 4.2其他样品的处理 ^CX=< NdZv* 取样品0.5g，以5mL正己烷于密封玻璃瓶中超声提取，然后以4000rpm转速，离心5min，取上清液作为待净化液。若样品中含有水，视情况加入适量无水硫酸钠后，再进行上述操作。
3#}5dO O+A/thI%*S 固相萃取方法：
# kl?
ww U E#X(0(A) 活化：5mL正己烷
2uu"0 Rm% U@yn%k9 上样：全部待净化液
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9E~=/Q= 淋洗：3mL正己烷
//S/pCqED W;en7v;#I} 洗脱：3mL乙酸乙酯：正己烷（50:50，v/v），洗脱2次，合并洗脱液。
bII pJQ1.[ Q{ 1Q w'+@ 40℃氮吹至近干（目视只剩少许粘稠油状物体），加入1mL乙腈反萃取，涡旋振荡
'r3yFoP} LPO:K a 3min，以4000rpm转速，离心5min，轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中，作为待检液。
L,6v!9@ Bn
JpC<xm 检测：GC/MS检测。
foO /Yc &p|+K
XIf 5.复杂样品 l12Pj02 w >G ` Uc&= 此类样品多为油水混合态，同时添加有多种风味物质，成分比较复杂，包括方便面调味包，酱油、醋、用来调味的其它酱汁等。根据样品中的脂肪含量，对于高脂样品推荐前处理柱为Cleanert PAE-C柱，对于低脂样品推荐使用Cleanert MAS-PAEc管。
R]L$Ld< ij |qe[`x;
% 5.1 以Cleanert PAE-C柱进行样品处理，以方便面调味包为例： r2dU>U*:4 ^!a4!DGVT 取0.5g样品，加入5mL正己烷，涡旋振荡3min后，再加入500mg无水硫酸钠，涡旋振荡3min后，以4000rpm转速，离心5min，取全部上清液作为待净化液。
C1/qiSHsh ,v^A;,q 固相萃取方法：
| R\PQ/) w8(8n&5 活化：5mL正己烷
b({K6#?'[ >oD,wSYV~ 上样：全部待净化液
w;
rQ\gj MP
LgE.n 淋洗：3mL正己烷
6VU k ZKc e9\eh? bPU 洗脱：3mL乙酸乙酯：正己烷：甲苯（50:40:10，v/v），洗脱2次，合并洗脱液。
D(X:dB50@ - f&m4J} E 40℃氮吹至近干（目视只剩少许粘稠油状物体），加入1mL乙腈反萃取，涡旋振荡
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?v l 3min，以4000rpm转速，离心5min，轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中，作为待检液。
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GX&^= 检测：GC/MS检测。
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} 5.2 以Cleanert MAS-PAEc管进行样品前处理，以酱油为例 (>,}C/-UG )e?6 Ncy 样品处理：向Cleanert MAS-PAE离心管中加入2mL样品，然后加入4mL乙腈：甲苯（9:1，V/V），将离心管涡旋2min，最后加入Cleanert MAS-PAEc填料，再将离心管涡旋振荡2min后，以4000rpm的转速离心5min，取上清液，以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后，待检。
gyT3[*eh [+3~wpU(p 检测：GC/MS检测。
5uAUi=XA>S V }wh 附件一： eFz!`a^dX s g6e%
5 高效液相色谱法检测15种邻苯二甲酸酯的含量
zz[[9Am! G&\!!i|IQ 色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L）
ibxtrt= K/D,s H! 流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50
F9 4Qb} } <
m@82\ 流 速：1.0 mL/min
%q5iy0~P Fwfe5`9' 波 长：242 nm
gA~faje u9^
R
?y 进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm）
lL6qK&; n:5*Tg9 样 品：15种邻苯二甲酸酯
*3W e5 DozC> 浓 度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A）
Y2 Y!^A89 c&T14!lfn 溶 剂：正己烷 /40%流动相A
tXIre-. 2} 4ng*SE _ 柱 温：30℃
Ev\kq>2 O 
,`JXBI~ 图1 邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度：10ppm)
"rA: ;ntz {@u}-6:wAT （邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯
DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯
DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯
DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯
DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯
DINP）
q[3b i!Q {&c%VVZb:Z 结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做
实验，供大家参考。
/m;w ~ -N V6d*O`
附件二 ?mt$c6- 气质联用法检测15种邻苯二甲酸酯
HC8{); 7OOB6[.fu 仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS
8}Y(
@
%4 &K^h'>t' 色谱条件：
{F
k]X#j d<6L&8
)< 色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm
cx2s|@u0 `bT{E.(T 进样口：250℃，不分流进样
q{7s.m
> +n Mg QOs 程序升温：50℃（1min）20℃/min 220℃（1min）5℃/min 280℃（4min）
5Cy)#Z
{ m;
A BHq# 进样量：1μL
Zc9
n0t[ ?>o39|M_w 流速：1 mL/min
N M8 F n1ED _9 质谱条件：
AN~1 E@" ;JmD(T7{ 接口温度：280℃
\:=Phbn bm+ Mr 电离方式：EI
by06!-P0[ z H \*v' 电离能量：70eV
k{b ba=< Rp<Xu6r 溶剂延迟：7min
w}1)am &pD OS9v. pz 监测方式：SIM模式，监测离子见下表
*@ o3{0[Z @fK`l@ K 结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。
EP (Eq 4@mso+tk 附件三 R~c IT:i
@ 'Q%Jc(
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 pW7kj&a_.
LC76 Qi;|k
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表
GeVc\$K- )6g&v'dq rCkYfTYI 69rwX"^ bYK]G+
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uV!MW= )
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 Xa>}4j.
FRc |D
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表
T4l-sJ'|
{rs6"X ^ Q.*'H_Y
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