随着现代
食品工业的发展,人们为了增加食品的风味、改善色泽和延长货架期等,采用了多种现代食品加工
技术,但是不幸的是,由于种种原因,在某些食品加工过程中使用了危害人们健康的物质,比如最近出现的食品中添加“塑化剂”
邻苯二甲酸酯类物质。
u0o}rA ' F,.y6QU 以往,由于人们对邻
苯二甲酸酯类的
安全性认识不足,多种食品都涉嫌“被添加”。博纳艾杰尔科技根据不同食品基质的具体情况,开发了一系列的
检测方案,以供大家参考。
?KB+2]7m6 oJ:\8>)9 1.水性样品 SV?^i ` 9"g!J|+ 此类样品包括瓶装纯净水、矿泉水,茶、果汁和功能饮料等;某些可水溶解的固体样品。可以先制成水溶液,然后全部作为待处理液,如无脂糖果。推荐前处理柱为Cleanert DEHP (500mg/6mL)。
p%ve1 >c t.s;dlx[@ 样品处理:取10mL样品,进行固相萃取富集处理
],W/IDv ?q*,,+'0 固相萃取
方法:
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活化:5mL甲醇、5mL水
\nzaF4+$ f"Z2,!Z; 上样:10mL水性样品
a,/wqX cns~)j~ 淋洗:5mL5%甲醇水,真空抽干20min。
;_nV*G.y#^ n N_Ylw 洗脱:5mL甲醇
g[%iVZ 1y{@fg~.. 检测:将洗脱液用氮气吹干后,以1mL甲醇定容,然后用液相色谱法检测。
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JWZ:3 说明:此法多适用于配套液相色谱检测,当样品中邻苯二甲酸酯类的含量较低时,需要采用固相萃取富集才能检测的情况。
&Sr7?u`k Vz\?a8qQ< 一般来说,对于此类样品,可以采用正己烷液液萃取的办法,用GC/MS(灵敏度较高)直接检测。
z0F'zN3J 0]u=GD% 2.低脂液体样品 ^}{`bw {
qrLE1b 1$ 此类样品包含液态奶制品、果酱、糖浆等。推荐前处理
产品为Cleanert MAS-PAE管。
3;F+.{Icc nuucYm%IF- 样品处理:向玻璃离心管中加入2mL样品,然后加入4mL乙腈:甲基叔丁基谜(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAE填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。
SmMJ%lgA6 92";?Xk 检测:GC/MS检测。
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=eb 3.低脂固体食品 :&-j{8p- Y )](jU%o 此类样品包括奶粉、饼干、糕点、果冻、奶糖等,推荐产品为Cleanert MAS-PAE管。
)2Dm{T ;p] f5R^ 样品处理:取1g已制成粉末状的样品,2mL水,加入到Cleanert MAS-PAE离心管中,然后加入4mL乙腈:甲基叔丁基谜(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAE填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。
`U6bI
`l |\#6?y[o 检测:GC/MS检测。
:h!&.FB y7LT;`A 4.高脂样品 H]a@"gO =e!o 此类样品包括植物油脂、动物油脂、奶酪、动物组织性食品等,推荐前处理柱为Cleanert PAE。
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svGy 4.1 动植物油脂样品的处理 Z^l!#"\4m OO /Pc 取0.2g样品,用1mL正己烷溶解,作为待净化液。
s<`54o , m@#@7[6]o 固相萃取方法:
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活化:5mL正己烷
]$xN`O4W{ qR>"r"Fq 上样:全部待净化液
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k\wcj^"cb 淋洗:7mL正己烷
+:D90p$e ET:B" 洗脱:3mL乙酸乙酯:正己烷(50:50,v/v),洗脱2次,合并洗脱液。
6d%'>^`(o- e/nc[ 40℃氮吹至近干(目视只剩少许粘稠油状物体),加入1mL乙腈反萃取,涡旋振荡
0{'%j~" l
;'#!hC) 3min,以4000rpm转速,离心5min,轻轻地将上清液倒入2mL玻璃样品瓶中,作为待
fD:>cje cJQ& #u 检液。
:4'Fq;%C tMQz'3,X 检测:GC/MS检测。
LjOHlT' WymBjDos: 4.2其他样品的处理 LnY`f -H mE+ 取样品0.5g,以5mL正己烷于密封玻璃瓶中超声提取,然后以4000rpm转速,离心5min,取上清液作为待净化液。若样品中含有水,视情况加入适量无水硫酸钠后,再进行上述操作。
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L 固相萃取方法:
`x'vF# ;{e=Iz}/ 活化:5mL正己烷
@Y8/#6KE 3Q-[)Z ) 上样:全部待净化液
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k]<b= ,O[Maj/ch 淋洗:3mL正己烷
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%x 洗脱:3mL乙酸乙酯:正己烷(50:50,v/v),洗脱2次,合并洗脱液。
`4N{x.N HvSYE[Zt| 40℃氮吹至近干(目视只剩少许粘稠油状物体),加入1mL乙腈反萃取,涡旋振荡
>*"6zR2 o 1FO T 3min,以4000rpm转速,离心5min,轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中,作为待检液。
ZKT~\l ".=LzjE<gv 检测:GC/MS检测。
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S_Tc 01P ~K|s 5.复杂样品 B,Gt6cUq w_ sA8B 此类样品多为油水混合态,同时添加有多种风味物质,成分比较复杂,包括方便面调味包,酱油、醋、用来调味的其它酱汁等。根据样品中的脂肪含量,对于高脂样品推荐前处理柱为Cleanert PAE-C柱,对于低脂样品推荐使用Cleanert MAS-PAEc管。
49("$! .;'3Roi 5.1 以Cleanert PAE-C柱进行样品处理,以方便面调味包为例: s?2
DLXv}! mm5y'=# 取0.5g样品,加入5mL正己烷,涡旋振荡3min后,再加入500mg无水硫酸钠,涡旋振荡3min后,以4000rpm转速,离心5min,取全部上清液作为待净化液。
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b Lk-%I? 固相萃取方法:
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F 8sV_@<l<X 活化:5mL正己烷
j$K[QSn Q.8)_w 上样:全部待净化液
EpO5_T_ $m:4'r 淋洗:3mL正己烷
_Wjd`* rU{E} 洗脱:3mL乙酸乙酯:正己烷:甲苯(50:40:10,v/v),洗脱2次,合并洗脱液。
H$/r{gfg^ +foyPj!% 40℃氮吹至近干(目视只剩少许粘稠油状物体),加入1mL乙腈反萃取,涡旋振荡
( _{\tgSm e[lRY>Pe5 3min,以4000rpm转速,离心5min,轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中,作为待检液。
l]s,CX UBUZ}ZIbN 检测:GC/MS检测。
![v@+9 'e3[m 5.2 以Cleanert MAS-PAEc管进行样品前处理,以酱油为例 CS:mO| !*?Ss 样品处理:向Cleanert MAS-PAE离心管中加入2mL样品,然后加入4mL乙腈:甲苯(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAEc填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。
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t\ SX{6L( 检测:GC/MS检测。
jZm57{C#*? ' Vp6=,P 附件一: \gh`PS-B 6[h3pb/m 高效液相色谱法检测15种邻苯二甲酸酯的含量
]Y3|*t(\ ?w}E/(r 色谱柱:Agela Venusil XBP C18-L ,4.6×250mm,5µm,150Å(订货号:VX952505-L)
Lmy ^/P% BVx: JiA 流动相:A:水,B:甲醇:乙腈=50:50
#!?5^O !cs+tm3 流 速:1.0 mL/min
MSmvQ DcN s`2 波 长:242 nm
C^@~ UQwLAXs
进样量:5 µL(100ppm),50µL(10ppm)
GdqT4a\S (ia(
y(=C 样 品:15种邻苯二甲酸酯
5Pis0fa D?u*^?
a2 浓 度:100 ppm(正己烷),10 ppm(40%流动相A)
"+
js7U- =OIxG}* 溶 剂:正己烷 /40%流动相A
Z2Bl$ \ llbj-9OZL 柱 温:30℃
Efsfuv
5$Yt@8; 图1 邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度:10ppm)
]3_oT^$: JVA JLq (邻苯二甲酸二甲酯DMP,邻苯二甲酸二乙酯DEP,邻苯二甲酸二正丁酯DBP,邻苯二甲酸二辛酯
DEHP,邻苯二甲酸丁苄酯BBP,邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯DEHP,邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯
DMEP,邻苯二甲酸二丁氧基乙酯
DBEP,邻苯二甲酸二戊酯DPP,邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯BMPP,邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯
DEEP,邻苯二甲酸二环己酯DCHP,邻苯二甲酸二异丁酯DIBP,邻苯二甲酸二己酯DNP,邻苯二甲酸二壬酯
DINP)
bz[+g,e2oA )o'&f"/ 结论:Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质,分离度较好,完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限,笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质,所做
实验,供大家参考。
;T! mNKl A]2zK?|s 附件二 Oslbt8)U6 气质联用法检测15种邻苯二甲酸酯
Nhv~f0 }O<u 仪器:Agilent 7890/5975 GC/MS
1}mIzrY #$xiqL 色谱条件:
~Rx[~a _eAZ_@ 色谱柱:DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm
5V\\w~&/ 'G3B02* 进样口:250℃,不分流进样
xtyzy@)QL +Sk ; 程序升温:50℃(1min)20℃/min 220℃(1min)5℃/min 280℃(4min)
-"iGcVV Wa%Zt*7 进样量:1μL
_"%ef"oPh lL~T@+J~ 流速:1 mL/min
yzt6
4A:@+n%3m 质谱条件:
Sc;WraEn2 b(dIl)Y4
: 接口温度:280℃
]%m0PU# jQOY \1SR 电离方式:EI
|D%i3@P&ZR IB:Wh;_x 电离能量:70eV
IC>OxYg* P]-d(N}/H 溶剂延迟:7min
Yw<K!'C "BZ6G` 监测方式:SIM模式,监测离子见下表
DoAK]zyJA
Lz2 AWqR 结论:Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质,完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限,笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。
6ey{+8 3+ %a 附件三 s!:'3[7+
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牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 InBnU`(r
4W5[1GE.
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验,得到的数据如下:表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表
3q:U0&F [3lAKI @{P<!x <Q i/E"E7 ,P
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某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 `yJ3"{uO
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按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验,得到的数据如下:表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表
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