随着现代
食品工业的发展,人们为了增加食品的风味、改善色泽和延长货架期等,采用了多种现代食品加工
技术,但是不幸的是,由于种种原因,在某些食品加工过程中使用了危害人们健康的物质,比如最近出现的食品中添加“塑化剂”
邻苯二甲酸酯类物质。
5P hX"7 \^K&vW; 以往,由于人们对邻
苯二甲酸酯类的
安全性认识不足,多种食品都涉嫌“被添加”。博纳艾杰尔科技根据不同食品基质的具体情况,开发了一系列的
检测方案,以供大家参考。
\cJ-Dd Btd Xv4V 1.水性样品 #W2[ Koln9'tB 此类样品包括瓶装纯净水、矿泉水,茶、果汁和功能饮料等;某些可水溶解的固体样品。可以先制成水溶液,然后全部作为待处理液,如无脂糖果。推荐前处理柱为Cleanert DEHP (500mg/6mL)。
zT* .jv cj|*_} 样品处理:取10mL样品,进行固相萃取富集处理
^D_/=4rz8 uH^PQ 固相萃取
方法:
/
<3<.
~ 1fL<&G 活化:5mL甲醇、5mL水
5NXt$k5 Pe~`16f 上样:10mL水性样品
-
?!:{UXl =`C4qC_ 淋洗:5mL5%甲醇水,真空抽干20min。
+f
;CyMEp Y/8K;U| 洗脱:5mL甲醇
ftavbNR`W AdoZs8Q 检测:将洗脱液用氮气吹干后,以1mL甲醇定容,然后用液相色谱法检测。
>1irSUj"~ :H[\;Z1_ 说明:此法多适用于配套液相色谱检测,当样品中邻苯二甲酸酯类的含量较低时,需要采用固相萃取富集才能检测的情况。
qq0
?e0H E)t 一般来说,对于此类样品,可以采用正己烷液液萃取的办法,用GC/MS(灵敏度较高)直接检测。
4`2$_T$F vV`|!5x 2.低脂液体样品 zy N (4 ?&h3P8 此类样品包含液态奶制品、果酱、糖浆等。推荐前处理
产品为Cleanert MAS-PAE管。
gw3NS8
A+ I8op>^N" 样品处理:向玻璃离心管中加入2mL样品,然后加入4mL乙腈:甲基叔丁基谜(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAE填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。
NyI;v= mKg@W;0ML 检测:GC/MS检测。
GG'Sp53GE VKLU0*2R 3.低脂固体食品 ]?9[l76O7 8gmn6dCf 此类样品包括奶粉、饼干、糕点、果冻、奶糖等,推荐产品为Cleanert MAS-PAE管。
cvAtw Q' T2Z[AvNXFk 样品处理:取1g已制成粉末状的样品,2mL水,加入到Cleanert MAS-PAE离心管中,然后加入4mL乙腈:甲基叔丁基谜(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAE填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。
iM64,wnA gf$HuCh| 检测:GC/MS检测。
2A$0CUMb
'=TTa 4.高脂样品 NR/-m7#- hBCR]='
] 此类样品包括植物油脂、动物油脂、奶酪、动物组织性食品等,推荐前处理柱为Cleanert PAE。
iAz UaF iiwpSGFl] 4.1 动植物油脂样品的处理 mMxHR$2 ^L~ [+| 取0.2g样品,用1mL正己烷溶解,作为待净化液。
wd`R4CKhP] #DaP=k"XV 固相萃取方法:
"<dN9l>
+IsWI;lp 活化:5mL正己烷
)b9I@)C
s4IKSX 上样:全部待净化液
vXPuyR<J byj[u!{ 淋洗:7mL正己烷
:Ba-u vadM1c*z 洗脱:3mL乙酸乙酯:正己烷(50:50,v/v),洗脱2次,合并洗脱液。
|7S:l9; F r/QW7B5 40℃氮吹至近干(目视只剩少许粘稠油状物体),加入1mL乙腈反萃取,涡旋振荡
# 8qyg<F
)O-sWh4 3min,以4000rpm转速,离心5min,轻轻地将上清液倒入2mL玻璃样品瓶中,作为待
4O Zy&, o(SuU
GW 检液。
$p
Br
&, 'qlxAYw<f 检测:GC/MS检测。
]J~g'"> IHfSkFz`j 4.2其他样品的处理 {G]`1Q1DR c( 8W8R 取样品0.5g,以5mL正己烷于密封玻璃瓶中超声提取,然后以4000rpm转速,离心5min,取上清液作为待净化液。若样品中含有水,视情况加入适量无水硫酸钠后,再进行上述操作。
$AC
e\R/% JbVi1?c 固相萃取方法:
v @_?iC"` iq
lVlm>E 活化:5mL正己烷
OUKj@~T =z']s4 上样:全部待净化液
t-a`.y vzQyE0T/ 淋洗:3mL正己烷
o|BFvhg KXDz'9_ 洗脱:3mL乙酸乙酯:正己烷(50:50,v/v),洗脱2次,合并洗脱液。
]b!R-G!gV )<tzm'Rc 40℃氮吹至近干(目视只剩少许粘稠油状物体),加入1mL乙腈反萃取,涡旋振荡
nEuct4BcL} G0^V!0I&O 3min,以4000rpm转速,离心5min,轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中,作为待检液。
\_)02ZT: =54Vs8. 检测:GC/MS检测。
FK?mS>G6 |^\Hv5 5.复杂样品 2M5*bNU_: 0fZ:")&4, 此类样品多为油水混合态,同时添加有多种风味物质,成分比较复杂,包括方便面调味包,酱油、醋、用来调味的其它酱汁等。根据样品中的脂肪含量,对于高脂样品推荐前处理柱为Cleanert PAE-C柱,对于低脂样品推荐使用Cleanert MAS-PAEc管。
FDZeIj9uF / N*HE 5.1 以Cleanert PAE-C柱进行样品处理,以方便面调味包为例: lsN/$M|} |
3hT { 取0.5g样品,加入5mL正己烷,涡旋振荡3min后,再加入500mg无水硫酸钠,涡旋振荡3min后,以4000rpm转速,离心5min,取全部上清液作为待净化液。
Qj{$dqmDN k,yc>3P;U 固相萃取方法:
,7WK<0
`S uS)RhA) 活化:5mL正己烷
7/[TE \fkS_r, i 上样:全部待净化液
I 0x`H)DA
L5i#Kh_ 淋洗:3mL正己烷
)F=JkG
3J'Bm" 洗脱:3mL乙酸乙酯:正己烷:甲苯(50:40:10,v/v),洗脱2次,合并洗脱液。
a
5~G .rD#1)O 40℃氮吹至近干(目视只剩少许粘稠油状物体),加入1mL乙腈反萃取,涡旋振荡
U4
go8 tU-#pB>H 3min,以4000rpm转速,离心5min,轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中,作为待检液。
@1
`W<WP jpPdjQ 检测:GC/MS检测。
gdkLPZ<<
y^0HCp{ 5.2 以Cleanert MAS-PAEc管进行样品前处理,以酱油为例 o|Yn(xu- $;KQY7 样品处理:向Cleanert MAS-PAE离心管中加入2mL样品,然后加入4mL乙腈:甲苯(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAEc填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。
QI
:/,w ~(*co[_ 检测:GC/MS检测。
5 O{Ip- S>vVjq?~l( 附件一: w<8
O= a{%52B" 高效液相色谱法检测15种邻苯二甲酸酯的含量
Rd;~'gbG D!OG307P 色谱柱:Agela Venusil XBP C18-L ,4.6×250mm,5µm,150Å(订货号:VX952505-L)
z_[3IAZ ;_Of`C+ 流动相:A:水,B:甲醇:乙腈=50:50
,]>`guDV jmA{rD W 流 速:1.0 mL/min
qKI4p3&E WMdz+^\( 波 长:242 nm
O.
.@<. 6LF^[b/u 进样量:5 µL(100ppm),50µL(10ppm)
%+j]vP c+G :@% 样 品:15种邻苯二甲酸酯
19YJ`(L`x uq#h\p| 浓 度:100 ppm(正己烷),10 ppm(40%流动相A)
*t]&b ;=gE /9vMGef@ 溶 剂:正己烷 /40%流动相A
KWuj_.; LF3GVu, 柱 温:30℃
b6E8ase:F
S
tp*JU 图1 邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度:10ppm)
M0" g/W V
n!az} (邻苯二甲酸二甲酯DMP,邻苯二甲酸二乙酯DEP,邻苯二甲酸二正丁酯DBP,邻苯二甲酸二辛酯
DEHP,邻苯二甲酸丁苄酯BBP,邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯DEHP,邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯
DMEP,邻苯二甲酸二丁氧基乙酯
DBEP,邻苯二甲酸二戊酯DPP,邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯BMPP,邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯
DEEP,邻苯二甲酸二环己酯DCHP,邻苯二甲酸二异丁酯DIBP,邻苯二甲酸二己酯DNP,邻苯二甲酸二壬酯
DINP)
%imBGh =~2 Uv>YG 结论:Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质,分离度较好,完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限,笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质,所做
实验,供大家参考。
A1 s=;qr />j+7ts 附件二 3
M:B?2 气质联用法检测15种邻苯二甲酸酯
(A<sFw? &.bR1wX 仪器:Agilent 7890/5975 GC/MS
`] dx% YPJx/@Z` 色谱条件:
A ** M"T uB%^2{uU 色谱柱:DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm
%Fm;LQa ] 1AEVZ@(j7 进样口:250℃,不分流进样
v]Q_ JX,#W!d 程序升温:50℃(1min)20℃/min 220℃(1min)5℃/min 280℃(4min)
`m0Uj9)# KJ{F,fr+v 进样量:1μL
X\)KVn` e8uIh[+ 0 流速:1 mL/min
3V!&y/c< <|.! Px86 质谱条件:
Bst>9V&R fy-Z{ 接口温度:280℃
}eRG$)' SIVLYi 电离方式:EI
-oT+;2\2 Dj&bHC5% 电离能量:70eV
tnbs]6 ){|Lh( 溶剂延迟:7min
$P9$ ,w4 ~g6[ [ 监测方式:SIM模式,监测离子见下表
V>j`
/;m!>{({) 结论:Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质,完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限,笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。
-85]x)JE AYB
=iLa 附件三 \M@9#bd
,(%?j]_P2
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 7.-g=Rcz
32DSZ0
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验,得到的数据如下:表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表
QH_0U`3 CA0SH{PdW& mY}_9rTn| gnAM} Y Mes314"
QQQ3U
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 SAuZWA4g[
:'\4%D=w
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验,得到的数据如下:表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表
M5mCG r*-e~ _`Ojh0@00