奶粉中双氰胺的检测方法 [复制链接]

北京时间1月25日凌晨消息，新西兰牛奶中发现了有害物质——双氰胺。双氰胺又名二氰二胺，缩写DICY或DCD。虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的。本文采用Venusil® HILIC液相色谱柱，建立了奶粉中双氰胺的快速检测方法。 el GP2x#:  
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HPLC法： rw>X JE  
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色谱条件： i"|="O0v5  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 4.6*250mm （P/N：VH952505-0）； R1.No_`PHq  
流动相：A：10mmol/L乙酸铵（pH=4.0）； FCO5SX #-g  
B：乙腈； dV+%x"[:  
A：B=10:90； 00s&<EM  
检测波长：220nm； :5kgJu  
进样量：10μL； 4yLC  
柱温：30℃； Z.9?u;  
流速：1mL/min。 ZM)YRdh  
n<Vq@=9AE  
实验结果： zk)9tm;i{  
线性关系和检出限 5p9zl=mT  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为标准贮备液； /SLAg&  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为0.1μg/mL，0.5μg/mL，1.0μg/mL，2.0μg/mL，5.0μg/mL和10.0μg/mL的标准溶液，按照上述色谱条件，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： 6U{&`8C  
<28L\pdG`  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	4.92min	Y=116.44X+3.2699	0.9997	0.1μg/mL

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] i;xeo,  
LC-MS/MS法： k!/"J ;  
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;ND  
色谱条件： }P[xZ_S1  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 2.1*150mm（P/N：VH951502-0）； 3?Ckk{)&  
流动相：A：0.5mmol/L乙酸铵（pH=4.0） #&+0hS  
B：乙腈 !f~ =p
 
A：B=10:90 _C`cO  
进样量：10μL；  ?`+46U%  
柱温：30℃； 4@6!E^  
流速：0.2 mL/min。 qTK\'trgx]  
}]w/`TF  
质谱条件 !,}W |(P)  
质谱仪：API 4000+； %JBFG.+  
离子源：电喷雾离子源； !a&@y#x  
扫描方式：正离子扫描； bSmF"H0cP  
检测方式：多反应监测； y(&JE^GfX  
CAD：8.00； sY__ak!>  
CUR：10.00； reml|!F-)  
GS1：60.00； $ JI`&  
GS2：50.00； %V-\|cw   
IS：5500.00； }5
gAxR,  
TEM：500.00。 $3BCA)5:  
;\7TQ9z  

药物名称	监测离子对	DP	EP	CE	CXP
双氰胺	85/68	71	10	41	6
	85/43	71	10	41	6

Ws?BAfP  
注：带“____”的监测离子对为定量离子对。 .J' 8d"+  
7|3Qcn7P)@  
实验结果 [ P\3XSR  
线性关系和检出限 LLv~yS O  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶液并稀释至刻度，作为标准贮备液； <tK6+isc  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为5ng/mL，10ng/mL，20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL和500ng/mL的标准溶液，按照上述液质方法，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： !cnunLc`  
u`Djle   

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	3.15min	Y=8777.2X+7435.9	0.9993	5ng/mL

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图 2 10ng/mL双氰胺标准溶液质谱图