奶粉中双氰胺的检测方法 [复制链接]

北京时间1月25日凌晨消息，新西兰牛奶中发现了有害物质——双氰胺。双氰胺又名二氰二胺，缩写DICY或DCD。虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的。本文采用Venusil® HILIC液相色谱柱，建立了奶粉中双氰胺的快速检测方法。 J{G?-+`  
JucY[`|JV  
aN3;`~{9  
HPLC法： w0unS`\4  
_yR^*}xJb  
色谱条件： Vxt+]5X  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 4.6*250mm （P/N：VH952505-0）； .=; ;  
流动相：A：10mmol/L乙酸铵（pH=4.0）； tZo} ;|~'  
B：乙腈； 9lE_nc  
A：B=10:90； qqU 64E  
检测波长：220nm； ^LLzZnkcZ  
进样量：10μL； ]]yO1x$Kk  
柱温：30℃； O#r%>;3*  
流速：1mL/min。 L}NSR  
g9F?z2^  
实验结果： Z3!`J&  
线性关系和检出限 e96k{C`j0  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为标准贮备液； kG*~|ma  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为0.1μg/mL，0.5μg/mL，1.0μg/mL，2.0μg/mL，5.0μg/mL和10.0μg/mL的标准溶液，按照上述色谱条件，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： (7*}-Uy[C  
=tY T8Q;al  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	4.92min	Y=116.44X+3.2699	0.9997	0.1μg/mL

3;Fhg!ZO  
9_s`{(0?  
vfo~27T{(  
LC-MS/MS法：  jZ; =so  
fikkY=  
色谱条件： Lj;2\]
 
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 2.1*150mm（P/N：VH951502-0）； PFK  '$  
流动相：A：0.5mmol/L乙酸铵（pH=4.0） u W3!Yg@  
B：乙腈 Q NVa?'0"Y  
A：B=10:90 @\I#^X5lv  
进样量：10μL； POR\e|hRT]  
柱温：30℃； `y* }lg T  
流速：0.2 mL/min。 WMg~Y" W  
1ZRT:N<-  
质谱条件 4xJQ!>6  
质谱仪：API 4000+； ,6W>can  
离子源：电喷雾离子源； 7J&4akT{9  
扫描方式：正离子扫描； \5cpFj5%  
检测方式：多反应监测； 76` .Y  
CAD：8.00； H 7 ^/q7  
CUR：10.00； da~],MN  
GS1：60.00； sUm'  
GS2：50.00； *4_Bd=5(U  
IS：5500.00； t);/'3|  
TEM：500.00。 :P=(k2  
mlS$>O_aX  

药物名称	监测离子对	DP	EP	CE	CXP
双氰胺	85/68	71	10	41	6
	85/43	71	10	41	6

uA#;G/$  
注：带“____”的监测离子对为定量离子对。 5i{j' {_(8  
]]j;
/TiG  
实验结果 e64^ChCoV  
线性关系和检出限 HiJE}V;Vq  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶液并稀释至刻度，作为标准贮备液； -RK- Fu<e  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为5ng/mL，10ng/mL，20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL和500ng/mL的标准溶液，按照上述液质方法，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： b*Q&CL  
^L&iR0  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	3.15min	Y=8777.2X+7435.9	0.9993	5ng/mL

*siFj CN<  
yJe>JK~)  
>~+ELVB&  
图 2 10ng/mL双氰胺标准溶液质谱图