奶粉中双氰胺的检测方法 [复制链接]

北京时间1月25日凌晨消息，新西兰牛奶中发现了有害物质——双氰胺。双氰胺又名二氰二胺，缩写DICY或DCD。虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的。本文采用Venusil® HILIC液相色谱柱，建立了奶粉中双氰胺的快速检测方法。 %?J\P@  
F IDNhu  
2GLq#")P  
HPLC法： HuBG?4Qd  
Qf0$Z.-  
色谱条件： x~!B.4gT2  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 4.6*250mm （P/N：VH952505-0）； Q4{%)}2$  
流动相：A：10mmol/L乙酸铵（pH=4.0）； 9E) *X  
B：乙腈； %h=)>5- T  
A：B=10:90； H"WkZX  
检测波长：220nm； ~0w7E0DE[  
进样量：10μL； EXH{3E54)`  
柱温：30℃； X5U_|XK6Y  
流速：1mL/min。 5#g<L ~  
BF<7.<,  
实验结果： \=Af AO@  
线性关系和检出限 p^Ca-+R3  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为标准贮备液； g-E!*K  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为0.1μg/mL，0.5μg/mL，1.0μg/mL，2.0μg/mL，5.0μg/mL和10.0μg/mL的标准溶液，按照上述色谱条件，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： m?'5*\(ST  
2_
vE  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	4.92min	Y=116.44X+3.2699	0.9997	0.1μg/mL

o m`r^3,  
5IW^^<kiu  
to[EA6J8l  
LC-MS/MS法： CEc& G  
b;]'Bo0K  
色谱条件： -4,qAnuMx  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 2.1*150mm（P/N：VH951502-0）； -yg9ug  
流动相：A：0.5mmol/L乙酸铵（pH=4.0）
R"5/  
B：乙腈 ]O<Yr'  
A：B=10:90 on*?O O'  
进样量：10μL； u~LisZ&tP  
柱温：30℃； <^R\N#  
流速：0.2 mL/min。 GK95=?f~8;  
)#ic"UtR  
质谱条件 bT[Q:#GL  
质谱仪：API 4000+； wIxLr{  
离子源：电喷雾离子源； Yr-,0${m  
扫描方式：正离子扫描； 70HEu@-  
检测方式：多反应监测； ^%go\ C ;  
CAD：8.00； !! 2~lG<]  
CUR：10.00； Pl1:d{"d  
GS1：60.00； WgE~H)_%  
GS2：50.00； uAVV4)  
IS：5500.00； v#-%_V>ph  
TEM：500.00。 QR4v6*VpD  
Fi7pq2  

药物名称	监测离子对	DP	EP	CE	CXP
双氰胺	85/68	71	10	41	6
	85/43	71	10	41	6

HkEp}R  
注：带“____”的监测离子对为定量离子对。 %}j/G l5  
j1 /J9F'  
实验结果 :FxZdE  
线性关系和检出限 >Pv%E  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶液并稀释至刻度，作为标准贮备液； VaX>tUW  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为5ng/mL，10ng/mL，20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL和500ng/mL的标准溶液，按照上述液质方法，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： M.|hnGXN  
J3q}DDnEo  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	3.15min	Y=8777.2X+7435.9	0.9993	5ng/mL

(5Cm+Sy  
4AP<mo  
]^j)4us  
图 2 10ng/mL双氰胺标准溶液质谱图