奶粉中双氰胺的检测方法 [复制链接]

北京时间1月25日凌晨消息，新西兰牛奶中发现了有害物质——双氰胺。双氰胺又名二氰二胺，缩写DICY或DCD。虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的。本文采用Venusil® HILIC液相色谱柱，建立了奶粉中双氰胺的快速检测方法。 L?&+*|VxI  
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HPLC法： Gd EkA  
:s+AIo6  
色谱条件： AuUT 'E@E  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 4.6*250mm （P/N：VH952505-0）； HxAq& J;xu  
流动相：A：10mmol/L乙酸铵（pH=4.0）； ,0NVb7F;k  
B：乙腈； lxj_(Uo  
A：B=10:90； TYWajcch  
检测波长：220nm； &+6XdhX  
进样量：10μL； :G
qyj_|<  
柱温：30℃； 5 g99t$p9  
流速：1mL/min。 >4}+\ Q`S  
Jx1 oK  
实验结果： [%;LZZgl  
线性关系和检出限 a1M-F3  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为标准贮备液； NS
HWs%Zc  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为0.1μg/mL，0.5μg/mL，1.0μg/mL，2.0μg/mL，5.0μg/mL和10.0μg/mL的标准溶液，按照上述色谱条件，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： dm,7OQ  
d?WA}VFU  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	4.92min	Y=116.44X+3.2699	0.9997	0.1μg/mL

5!}xl9D  
sI/Hcm  
gsI"G
  
LC-MS/MS法： {2
R b^K  
~Lhq7;=H?O  
色谱条件： hdW",Bf'  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 2.1*150mm（P/N：VH951502-0）； @JT9utct  
流动相：A：0.5mmol/L乙酸铵（pH=4.0） &fdH HN  
B：乙腈 W )1)zOD  
A：B=10:90 _Z.l r\  
进样量：10μL； .6xP>!E}Q  
柱温：30℃； Q
mOG2  
流速：0.2 mL/min。 Z6!MX_ep  
L^KGY<hp4  
质谱条件 @SDsd^N{2P  
质谱仪：API 4000+； Zd1+ZH  
离子源：电喷雾离子源； &}nU#)IX  
扫描方式：正离子扫描； k[6@\D-  
检测方式：多反应监测； sD1L 
P  
CAD：8.00； H?sl_3-#  
CUR：10.00； R,C)|*ef  
GS1：60.00； }IC$Du#  
GS2：50.00； +hpXMO%?  
IS：5500.00； Ox8dnPcx  
TEM：500.00。 &0K;Vr~D  
|A8Ar7)  

药物名称	监测离子对	DP	EP	CE	CXP
双氰胺	85/68	71	10	41	6
	85/43	71	10	41	6

mn{8"@Z  
注：带“____”的监测离子对为定量离子对。 d@b0z$<s  
n!|K#  
实验结果 U`,&Q]  
线性关系和检出限 yUq,9.6Ig  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶液并稀释至刻度，作为标准贮备液； WHBQA\4  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为5ng/mL，10ng/mL，20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL和500ng/mL的标准溶液，按照上述液质方法，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： UIvTC S  

_c['_HC  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	3.15min	Y=8777.2X+7435.9	0.9993	5ng/mL

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图 2 10ng/mL双氰胺标准溶液质谱图