奶粉中双氰胺的检测方法 [复制链接]

北京时间1月25日凌晨消息，新西兰牛奶中发现了有害物质——双氰胺。双氰胺又名二氰二胺，缩写DICY或DCD。虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的。本文采用Venusil® HILIC液相色谱柱，建立了奶粉中双氰胺的快速检测方法。 XGYbnZ
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HPLC法： (}Z@R#njH  
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色谱条件： 4!Fo$ 9  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 4.6*250mm （P/N：VH952505-0）； aI  P  
流动相：A：10mmol/L乙酸铵（pH=4.0）； (SpX w,:  
B：乙腈； fObg3S92  
A：B=10:90； J1( 9QN[w  
检测波长：220nm； @$ne{2J3  
进样量：10μL； k.uH~S_  
柱温：30℃； 6a[}'/  
流速：1mL/min。 .YhA@8nc~l  
/sx@$cvW  
实验结果： m8A#~i .  
线性关系和检出限 \:b3~%Fz  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为标准贮备液； 3eb%OEMYk  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为0.1μg/mL，0.5μg/mL，1.0μg/mL，2.0μg/mL，5.0μg/mL和10.0μg/mL的标准溶液，按照上述色谱条件，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： J[l7di5  
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名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	4.92min	Y=116.44X+3.2699	0.9997	0.1μg/mL

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_GV:HOBi  
LC-MS/MS法： {x|[p_?  
PY{ G [  
色谱条件： bp* ^z,w  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 2.1*150mm（P/N：VH951502-0）； IbT=8l,Li  
流动相：A：0.5mmol/L乙酸铵（pH=4.0） CuFSeRe  
B：乙腈 dzARI`  
A：B=10:90 y^;#&k!
 
进样量：10μL； )B T   
柱温：30℃； ap.K=-H  
流速：0.2 mL/min。 v_BcTzQ0S  
0pK=o"^?@  
质谱条件 Hkk/xNP  
质谱仪：API 4000+； Xe
W<B0~  
离子源：电喷雾离子源； 02f~En}>6  
扫描方式：正离子扫描； c?tBi9'Y]  
检测方式：多反应监测； 4;w;'3zq  
CAD：8.00； l}a)ZeR1  
CUR：10.00； xR-%L  
GS1：60.00； _Us#\+]_:  
GS2：50.00； ,-$LmECg  
IS：5500.00； ]q;Emy  
TEM：500.00。 n
3T>QgK  
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药物名称	监测离子对	DP	EP	CE	CXP
双氰胺	85/68	71	10	41	6
	85/43	71	10	41	6

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注：带“____”的监测离子对为定量离子对。 'v VQg  
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实验结果 Y#]+Tm(+  
线性关系和检出限 mf
 A{3  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶液并稀释至刻度，作为标准贮备液； /1Qr#OJ(]  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为5ng/mL，10ng/mL，20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL和500ng/mL的标准溶液，按照上述液质方法，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： [/PR\'|  
&D>G8  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	3.15min	Y=8777.2X+7435.9	0.9993	5ng/mL

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图 2 10ng/mL双氰胺标准溶液质谱图