奶粉中双氰胺的检测方法 [复制链接]

北京时间1月25日凌晨消息，新西兰牛奶中发现了有害物质——双氰胺。双氰胺又名二氰二胺，缩写DICY或DCD。虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的。本文采用Venusil® HILIC液相色谱柱，建立了奶粉中双氰胺的快速检测方法。 Ml)~%ZbF  
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!>T.*8  
HPLC法： n.]K"$230  
)NJD+yQ%  
色谱条件： 6>ZUx}vYj  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 4.6*250mm （P/N：VH952505-0）； M 7BCBA  
流动相：A：10mmol/L乙酸铵（pH=4.0）； az@{O4
  
B：乙腈； @K/}Ob4   
A：B=10:90； 'L)
@tkklp  
检测波长：220nm； @ROMH Md}  
进样量：10μL； iErY2~?  
柱温：30℃； mDz{8N9<FG  
流速：1mL/min。 r=6-kC!T9  
K.c6n,'  
实验结果： @G< J+pm  
线性关系和检出限 6j{9\
R  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为标准贮备液； 4d3]L` f  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为0.1μg/mL，0.5μg/mL，1.0μg/mL，2.0μg/mL，5.0μg/mL和10.0μg/mL的标准溶液，按照上述色谱条件，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： ?}"$[6.  
q15t7-Z6  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	4.92min	Y=116.44X+3.2699	0.9997	0.1μg/mL

D+?/MrP  
UN#XP$u tY  
c}GmS@  
LC-MS/MS法： %LeG.~?  
ZaJg$  
色谱条件： 7/QQ&7+NkS  
色谱柱：Venusil® HILIC 5μm 100Å 2.1*150mm（P/N：VH951502-0）； _7r<RZ  
流动相：A：0.5mmol/L乙酸铵（pH=4.0） |}s)Wo  
B：乙腈 o?(({HH
 
A：B=10:90 Z5iP1/&D  
进样量：10μL； )
90Q  
柱温：30℃； .vsrZ_y?  
流速：0.2 mL/min。 5{nERKaPf  

*R1m=  
质谱条件 uYVlF@]  
质谱仪：API 4000+； 278:5yC  
离子源：电喷雾离子源； U hKC:<%  
扫描方式：正离子扫描； Fy:CG6@X  
检测方式：多反应监测； "Bl]_YPv  
CAD：8.00； ,z<J`n  
CUR：10.00； cV]c/*zA  
GS1：60.00； )CgKZ"  
GS2：50.00； 2ZTz{|y  
IS：5500.00； 4lrF{S8  
TEM：500.00。 +/xmxh$ $  
sBUK v(U)  

药物名称	监测离子对	DP	EP	CE	CXP
双氰胺	85/68	71	10	41	6
	85/43	71	10	41	6

K1y]  
注：带“____”的监测离子对为定量离子对。 iCd$gwA>F  
|,YyuCQcL[  
实验结果 vh+ ' W  
线性关系和检出限 <'(O0  
准确称取双氰胺标准品50mg于50mL容量瓶中，加水溶液并稀释至刻度，作为标准贮备液； O*qSc^9q  
分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为5ng/mL，10ng/mL，20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL和500ng/mL的标准溶液，按照上述液质方法，依次进样检测。以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合线性方程，结果见下表： W`^euBr7R>  
wY$'KmNW  

名称	保留时间	线性方程	相关系数	最低定量限（S/N=10）
双氰胺	3.15min	Y=8777.2X+7435.9	0.9993	5ng/mL

3K)12x$.K  
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图 2 10ng/mL双氰胺标准溶液质谱图