酱油中氯丙醇含量的测定 气相色谱质谱法 [复制链接]

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前言 H@bf'guA|B  
   氯丙醇（Chloropropanols）是是一种在化学制作豉油的过程中所产生的毒性致癌物，同时具有抑制雄性激素生成的作用，使生殖能力减弱。对人体危害极大。日常比较常见的为以下三种：1-氯-2-丙醇 （ClCH2CHOHCH3）；3-氯-1,2-丙二醇 （3-MCPD）及1,3-二氯-2-丙醇 （1,3-DCP）。 $+p?Y)h .  
   本文参考《GB/T 5009.191-2006 食品中氯丙醇含量的测定》，进行了酱油中3-氯-1,2-丙二醇（3-MPCD）的测定，优化改进了用于样品预处理的硅藻土材料，调整活度，成功开发了Cleanert^® MCPD氯丙醇专用柱，结果表明满足实验要求，并大大简化了材料预处理过程，提高工作效率。 Ae]sGU|?'  
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1        仪器及材料 oND@:>QBF
 
仪器：Agilent GC-MS 7890-5975c；涡旋混合器；超声仪；氮吹仪；恒温箱。 h/?l4iR*  
材料： 3-氯-1,2-丙二醇（3-MPCD）标准品；乙酸乙酯、丙酮、正己烷为色谱纯；七氟丁酰基咪唑；无水硫酸钠；超纯水；氯化钠。 (e(:P~Ry  
固相萃取柱：Cleanert^® MCPD （氯丙醇专用柱），2.5g/12mL,P/N:LBC250012 }PTV] q%  
2        实验方法 %_!bRo  
2.1 标准溶液配制 ,) J~,^f6  
准确称取0.1g氯丙醇标准品于100mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容到刻度，得到浓度为1mg/mL的储备液。用丙酮将储备液逐渐稀释，得到1μg/mL标准工作液。 :VTTh |E%#  
2.2 饱和氯化钠溶液 D$t k<{)oB  
称取氯化钠290g，加水溶解并稀释至1000mL，超声20min。 u\C lP#  
2.3 GC-MS操作条件 dCRyOid$  
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I:mr}mv=i   色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm		{{QELfH2   进样口：230℃，不分流进样
G K 7![p   程序升温：50℃（1min）2℃/min 82℃		xL\0B,]   进样量：1μL
ZjF 4v   流速：1 mL/min	XT4{Pe7{[P   接口温度：250℃	LU={")TdQ   电离方式：EI
R=QZgpR   电离能量：70eV	tP$<UKtU   溶剂延迟：7min	ui/a|Q   离子源：230℃
:gWu9Y|{   四级杆：150℃	pC@{DW;V6R   检测模式：选择离子检测，SIM离子：253/275/289/291/453

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2.4 样品处理 @emK1iwm  
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称取2.5g酱油直接上样Cleanert^® MCPD固相萃取柱，静置平衡10min，用15 mL乙酸乙酯洗柱，收集洗脱液。将洗脱液在35℃下氮气吹至近干（不可全干）。加入2 mL正己烷，摇匀，快速加入50μL七氟丁酰基咪唑，将样品瓶拧紧，涡旋20秒，将样品瓶置于70℃恒温箱中反应30min，取出冷却至室温，向样品瓶中加入2 mL饱和氯化钠溶液，涡旋1min，静置2min，取上层有机相至另一干净的样品瓶中，重复1次洗涤操作以除去杂质。将有机相经少量无水Na2SO4除水后转移至进样样品瓶中，待GC-MS检测 $Avjnm  
3        实验结果 j i7[nY  
3.1 标准溶液色谱图 __G?0*3G  
在GC-MS操作条件下（4），得到标准溶液色谱图如图1. &8Cu#^3   
3.2 样品色谱图 N4F.Y"R$(  
准确称取6份酱油，其中5份分别加入浓度为1μg/mL的标准溶液0.1mL，按照样品处理方法（5），将6份样品进行净化衍生，得到酱油样品加标色谱图及酱油样品色谱图如图2、图3. S&Zm0Ku  
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图3 酱油样品色谱图 x<tb  
3.3 加标回收率及精密度 <J
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4        结论 ]b2pG'  
实验结果表明，Cleanert^® MCPD氯丙醇专用柱适用于酱油中氯丙醇的预处理，能净化酱油样品，实验加标回收率及RSD能满足定量实验的要求。本实验方案与国标方法相比更简便，使用的化学试剂量仅为国标方法的1/20，有利于操作人员的身体健康及环境；实验时间较国标方法短，更加适合于大批量酱油样品的前处理。