酱油中氯丙醇含量的测定 气相色谱质谱法 [复制链接]

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前言 1@JAY!yoo_  
   氯丙醇（Chloropropanols）是是一种在化学制作豉油的过程中所产生的毒性致癌物，同时具有抑制雄性激素生成的作用，使生殖能力减弱。对人体危害极大。日常比较常见的为以下三种：1-氯-2-丙醇 （ClCH2CHOHCH3）；3-氯-1,2-丙二醇 （3-MCPD）及1,3-二氯-2-丙醇 （1,3-DCP）。 f7c%Z:C#Y  
   本文参考《GB/T 5009.191-2006 食品中氯丙醇含量的测定》，进行了酱油中3-氯-1,2-丙二醇（3-MPCD）的测定，优化改进了用于样品预处理的硅藻土材料，调整活度，成功开发了Cleanert^® MCPD氯丙醇专用柱，结果表明满足实验要求，并大大简化了材料预处理过程，提高工作效率。 y#!8S{  
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1        仪器及材料 bnt>j0E  
仪器：Agilent GC-MS 7890-5975c；涡旋混合器；超声仪；氮吹仪；恒温箱。 U6;,<-bL  
材料： 3-氯-1,2-丙二醇（3-MPCD）标准品；乙酸乙酯、丙酮、正己烷为色谱纯；七氟丁酰基咪唑；无水硫酸钠；超纯水；氯化钠。 5TqB&GP0  
固相萃取柱：Cleanert^® MCPD （氯丙醇专用柱），2.5g/12mL,P/N:LBC250012 Pb4%"9`  
2        实验方法 7t &KKKV  
2.1 标准溶液配制 M}2a/}4
 
准确称取0.1g氯丙醇标准品于100mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容到刻度，得到浓度为1mg/mL的储备液。用丙酮将储备液逐渐稀释，得到1μg/mL标准工作液。 $a|C/s+}7>  
2.2 饱和氯化钠溶液 FMMQO,BU  
称取氯化钠290g，加水溶解并稀释至1000mL，超声20min。 @(Q'J`  
2.3 GC-MS操作条件 OIPJN8V  
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y qDE|DIez   色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm		?[{_*qh   进样口：230℃，不分流进样
CJ0 {>?   程序升温：50℃（1min）2℃/min 82℃		9,8}4Y=GVI   进样量：1μL
}&|S8:    流速：1 mL/min	Xi vzhI4   接口温度：250℃	ON"F h'?   电离方式：EI
?}<4LK]   电离能量：70eV	yKSvg5lLy   溶剂延迟：7min	 ;oL`fQyr   离子源：230℃
:f1Q0klwP   四级杆：150℃	u17e   检测模式：选择离子检测，SIM离子：253/275/289/291/453

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2.4 样品处理 9k5$rK`  
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称取2.5g酱油直接上样Cleanert<sup>®</sup> MCPD固相萃取柱，静置平衡10min，用15 mL乙酸乙酯洗柱，收集洗脱液。将洗脱液在35℃下氮气吹至近干（不可全干）。加入2 mL正己烷，摇匀，快速加入50μL七氟丁酰基咪唑，将样品瓶拧紧，涡旋20秒，将样品瓶置于70℃恒温箱中反应30min，取出冷却至室温，向样品瓶中加入2 mL饱和氯化钠溶液，涡旋1min，静置2min，取上层有机相至另一干净的样品瓶中，重复1次洗涤操作以除去杂质。将有机相经少量无水Na2SO4除水后转移至进样样品瓶中，待GC-MS检测 dw6U}  
3        实验结果 jV:Krk6T<  
3.1 标准溶液色谱图 7;]n+QRfm  
在GC-MS操作条件下（4），得到标准溶液色谱图如图1. vR;?~^{*s  
3.2 样品色谱图 u;-_%
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准确称取6份酱油，其中5份分别加入浓度为1μg/mL的标准溶液0.1mL，按照样品处理方法（5），将6份样品进行净化衍生，得到酱油样品加标色谱图及酱油样品色谱图如图2、图3. k `#OXLR  
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图3 酱油样品色谱图 :K- 05$K  
3.3 加标回收率及精密度 2h_XfY'3pX  
4        结论 UG@9X/l}  
实验结果表明，Cleanert^® MCPD氯丙醇专用柱适用于酱油中氯丙醇的预处理，能净化酱油样品，实验加标回收率及RSD能满足定量实验的要求。本实验方案与国标方法相比更简便，使用的化学试剂量仅为国标方法的1/20，有利于操作人员的身体健康及环境；实验时间较国标方法短，更加适合于大批量酱油样品的前处理。