高效液相色谱法测定血清中异环磷酰胺方法的改进 [复制链接]

@sW!g;\T  
1．2环磷酰胺内标液：取环磷酰胺对照品0.2g于100mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，得浓度为2mg·mL^-1的内标溶液，于冰箱4℃ 保存。 A- J#$B  
}Oqt=Wm  
1）柱活化：依次用2mL乙腈，再用2mL生理盐水活化小柱 Z~}9^(qc  
2）上样：把处理好的样品过柱 t*dq*(3"c  
3）淋洗：待血样完全流出后，先用1mL生理盐水冲洗，再用1mL 5%乙腈进一步冲洗杂质，待淋洗液完全流出后，加压将柱抽干 ;),,Hk  
4）洗脱：用0.5mL乙腈洗脱，收集洗脱液，取20μL进样测定。 _/u(:  
Rg+#
(y  
4．结果 b`%!\I  

F,Ve,7kh   加入浓度（μg·mL-1）	|n^rI\p%   提取回收率（%）	a*:GCGe   方法回收率（%）	TP~1-(M)}   RSD（%）
			jw 5 U-zi   日内	iq^;csyKb     日间
.:GOKyr(~   100	ZU;j z[}   92.0±1.8	>3&V"^r(|   101.2±3.5	&%8I BT   1.1
]mUt[Yy:z   50	t5u#[*   93.6±5.6	9zrTf%mF   107.2±1.5	:i@ $s/   2.9
|"9vq<`   5	a"T+CA   89.3±1.3	|W@Ko%om   95.3±4.3	}d iE'   2.2

yOvV"x]  
色谱图见图1。保留时间：异环磷酰胺11.6min；环磷酰胺12.8min，峰形良好，无杂质峰干扰。 4^4T#f2=e  
色谱条件 rd$T6!I  
色谱柱：Zorbox-ODS C₁₈ (4.6mm×250mm,5μm) jUR* |  
流动相：乙腈-水（25：75） hNgT/y8  
流速1mL·min^-1；检测波长200nm，进样量为20μL；柱温：室温