高效液相色谱法测定血清中异环磷酰胺方法的改进 [复制链接]

W\?_o@d  
1．2环磷酰胺内标液：取环磷酰胺对照品0.2g于100mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，得浓度为2mg·mL^-1的内标溶液，于冰箱4℃ 保存。  D|[~Py  
MR@*09zP(?  
1）柱活化：依次用2mL乙腈，再用2mL生理盐水活化小柱 MDCK@?\  
2）上样：把处理好的样品过柱 ?
6gC;B  
3）淋洗：待血样完全流出后，先用1mL生理盐水冲洗，再用1mL 5%乙腈进一步冲洗杂质，待淋洗液完全流出后，加压将柱抽干 H"H&uA9"  
4）洗脱：用0.5mL乙腈洗脱，收集洗脱液，取20μL进样测定。 rQ^$)%uP  
"+2Hde1  
4．结果 # 4AyA$t  

TM8WaH     加入浓度（μg·mL-1）	ei>8{v&g   提取回收率（%）	R!i9N'gGG(   方法回收率（%）	lZ5 lm sCU   RSD（%）
			<6=kwV6   日内	85P7I=`*d     日间
iEG`+h '   100	0s"g%gq|   92.0±1.8	}VlX!/42   101.2±3.5	E"D+CD0   1.1
|kL^k{=zV   50	KXEDpr   93.6±5.6	^lCys   107.2±1.5	+5Yf9   2.9
JTw\5j   5	kYwk'\s   89.3±1.3	*Z*4L|zT   95.3±4.3	Fj<#*2{]B   2.2

PYDf|S7  
色谱图见图1。保留时间：异环磷酰胺11.6min；环磷酰胺12.8min，峰形良好，无杂质峰干扰。 E5.3
wOE  
色谱条件 z}v6!u|iZu  
色谱柱：Zorbox-ODS C₁₈ (4.6mm×250mm,5μm) f6x}M9xS%  
流动相：乙腈-水（25：75） YNCQPN\v`1  
流速1mL·min^-1；检测波长200nm，进样量为20μL；柱温：室温