水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） Q+:y  
2．样品处理 v=U<exM6%  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 O'<V[Y}6  
O0 'iq^g  
含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 d:=' Xs
 
3．净化步骤： HW@wia  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 jK|n^5\  
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4．浓缩及定容： 'Y38VOI%  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ <b 5DX  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 6=iHw24  
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5．HPLC条件 Oa|c ?|+  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm @N*|w Kc+  
流动相：A:B=77:23 D,#UJPyg  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. sSM"~_y\  
B：乙腈 fzsy<Vl",  
5.rA xdP  
6．结果：（两个平行） !KHgHKEW^  

AA\a#\#Z3   名称	3j7FG%\   回收率-1	SNj-h>&Mha   回收率-2
sd%j&Su#4   土霉素	yw1&I^7   128%	(_FU3ZW!   137%
=?5)M_6)   四环素	80lei   91.8%	z8\YMr6o   97.4%
pz%s_g'   金霉素	IO)B3,g   88.5%	Y'U1=w~E   87.1%
z,,"yVk`,   强力霉素	] Q5:JV   97.3%	]az(w&vqg2   95.3%