水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） ,BFE=:ZIK  
2．样品处理 U.AjYez  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 ^8 ' sib  
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含有EDTA<sub>2</sub>Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA<sub>2</sub>Na，溶解后作为样品提取液。
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3．净化步骤：
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*|LI  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA<sub>2</sub>Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 2+Px'U\  
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4．浓缩及定容： !v]b(z`Y  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ .1 %T W)  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析  FgL,k  
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5．HPLC条件 jlFk@:y4  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm %!ebO*8q  
流动相：A:B=77:23 >zkRcm  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. ^$%Z!uz  
B：乙腈 2cu#lMq  
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6．结果：（两个平行） @?C#r.vgp  

dk8wIa"K`   名称	5=(c%   回收率-1	p}Fs'l?7Rq   回收率-2
>#+IaKL7   土霉素	\EbbkN:D   128%	_eLWQ|6Fx   137%
`Lyq[zg8   四环素	Gt9wR   91.8%	vUQFQ   97.4%
,KW;2t*IQ@   金霉素	xu%'GZ,o9   88.5%	{I%y;Aab8   87.1%
"5DJu~   强力霉素	"#^MUQ!a   97.3%	K6\` __mLf   95.3%