水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） ;'h7 j*6  
2．样品处理 _uBf.Qfs  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 4QDW}5xB  
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含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 UpgOU.  
3．净化步骤： ZFRKh:|  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 nK:39D$(  
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4．浓缩及定容： 5B51^"  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ ^wX_@?aKtt  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 {!-w|&bF  
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5．HPLC条件 '8}\! i&  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm ;B7>/q;g  
流动相：A:B=77:23 ?"L>jr(  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. VB[R!S
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B：乙腈 Sm-nb*ZyC  
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6．结果：（两个平行） 6H3_qx  

%.Mtn%:I*   名称	T vk=NJ   回收率-1	A]R"C:o   回收率-2
J H$   土霉素	$-o39A#   128%	Ju:=-5r"'   137%
-"(e*&TJ#   四环素	ph69u #Og   91.8%	Z3[,Xw   97.4%
+K+ == mO&   金霉素	^B5Hjf9   88.5%	j^LnHVHk1   87.1%
\*_qP*vq@   强力霉素	aIkxN&   97.3%	r}XD{F}"   95.3%