水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） p|M 8ww  
2．样品处理 (SLAq$gvd  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 \S@;>A<J  
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含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 +t
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3．净化步骤： u4=j!Zb8}  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 Yo c N
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4．浓缩及定容： u|7d_3 ::  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃  KD^>Vv#  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 7{:| )  
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5．HPLC条件 lC+p2OG^[  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm  c/I.`@  
流动相：A:B=77:23 n\5` JNCb  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. s@f4f__(]  
B：乙腈 _n2PoE:5@P  
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6．结果：（两个平行） 5B .+>u"e  

` &| Rs   名称	"tUXY Y   回收率-1	 o)cd!,h   回收率-2
hyL3fkMJ,   土霉素	_$0<]O$   128%	^M  PU?k   137%
oGly|L>   四环素	Us M|OH5k   91.8%	7s,IT8ii   97.4%
A(W%G|+   金霉素	3otia;&B   88.5%	`z-4OJ8~   87.1%
4s^5t6   强力霉素	G 7pj.rQ   97.3%	B+iVK(j'[v   95.3%