水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

6"#Tvj~-8  
5cv, >{~5  
1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） !YuO N6{)  
2．样品处理 TU^tW  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 IWSEssP  
vwSX$OZ  
含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 '8iv?D5M  
3．净化步骤： o>!~*b';g,  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 8DmX4*  
-b
G#h)yj  
4．浓缩及定容： J0{WqA.P  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ <{P^W;N7  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 p5D3J[?N  
c9F[pfi(  
5．HPLC条件 UBpM8/U  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm . ,(uoK{  
流动相：A:B=77:23
aF_ZV bS  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. Yqj.z|}Nb  
B：乙腈 i(TDJ@}  
7Ohu$5\  
6．结果：（两个平行） X _Of k  

^Xz`hR    名称	^5iY/t~Q   回收率-1	f1,$<Y|qU   回收率-2
vo^9qSX f   土霉素	"=0lcbC   128%	&B>uPZ]   137%
MsVI <+JZ   四环素	*p<5(-J3   91.8%	=M km:'1r   97.4%
kJ5?BdvM&   金霉素	Bo\dt@0;   88.5%	GzE3B';g   87.1%
1* Fvx-U'   强力霉素	ff+9(P>*   97.3%	"rlSK >`   95.3%