水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） g/FT6+&T.  
2．样品处理 ,*9gy$  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 t@ri`?0w  
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含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 [ns==gDD  
3．净化步骤： NBB R>3nt  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 jUZ$vyT  
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4．浓缩及定容： eNH9`Aa  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ SY:ISzB}  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 hpbi!g  
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5．HPLC条件 K:VZ#U(_  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm eHIcfp@&  
流动相：A:B=77:23 S{)K_x  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. p)z#%BY56  
B：乙腈 sV0NDM0  
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6．结果：（两个平行） .!+7|us8l\  

j0Cj&x%qF}   名称	PRBlf   回收率-1	@A`j Wao   回收率-2
.kkhW8:   土霉素	P1^|r}   128%	W1LR ,:$   137%
M0?%r`   四环素	_7qa~7?f   91.8%	`|v/qk7 ^?   97.4%
<c<! |<x   金霉素	x& +&)d   88.5%	-0]%#(E%`h   87.1%
L(k`1E   强力霉素	2 J3/Eu   97.3%	|QR9#Iv   95.3%