水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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V$ DB4YM1k  
1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） uHquJQ4  
2．样品处理 .=}\yYGe  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 DHn\ =M  
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含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 EK>x\]O%T  
3．净化步骤： aO |@w"p8  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 F',1R"/}  
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4．浓缩及定容： of7'?]w  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ ]Y?ZUSCJ  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 ,e
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5．HPLC条件 [Ti' X#  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm
d/TFx  
流动相：A:B=77:23 Vx[Q=raS  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. l8Yr]oNkz  
B：乙腈 ]EN&EA"<  
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6．结果：（两个平行） !eb{#9S*  

):+^893)   名称	=RWY0|f   回收率-1	RM%Z"pc Y6   回收率-2
us8ce+   土霉素	dj,lbUL   128%	l~f9F`~'   137%
BlqfST#6   四环素	Pqvj0zUo$   91.8%	S]&i<V1qX   97.4%
:w4H$+j   金霉素	z;0]T=g   88.5%	5(\[Gke   87.1%
1Ji"z>H*   强力霉素	G0r(xP?   97.3%	noT}NX%   95.3%