水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） E}%hz*Q)(  
2．样品处理 NrP0Ep%V  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 AoA!q>  
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含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 '!f5?O+E  
3．净化步骤： D&HV6#  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 A(]H{>PMy  
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4．浓缩及定容： E^U0f/5 m  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ =2w4C_  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 \M'-O YH_[  
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5．HPLC条件 :$MG*/Q  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm DWdW,xG  
流动相：A:B=77:23 4Jx"A\5*G  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. lsN~*q?~]  
B：乙腈 wf1
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6．结果：（两个平行） Nan
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 C*nB   名称	H(Eh c   回收率-1	NWxUn.Gy9   回收率-2
[ Bl c^C{f   土霉素	imiR/V>N   128%	tDAhyy73   137%
#pcP!   四环素	}`+B=h-dW   91.8%	s=42uKz   97.4%
LY-2sa#B$-   金霉素	LY+|[qka   88.5%	d|4}obCt   87.1%
P (S>=,Y&   强力霉素	W0}B'VS.I   97.3%	%Z*sU/^   95.3%