水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） WR.>?IG2E  
2．样品处理 0X<U.Sxn  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 E]P7u"1  
n~Yr`5+Z  
含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 *-';ycOvr  
3．净化步骤： <~Oy3#{  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 X
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4．浓缩及定容： d6f T  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ 6n:oEXM>  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 emMk*l,  
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5．HPLC条件 wCEcMVT  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm qV)hCc/ ~  
流动相：A:B=77:23 { ^R r:+  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. cp&1yB   
B：乙腈 XZ"oOE0=  
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6．结果：（两个平行） {8556>\~  

qOAhBZ~   名称	d*$x|B|V   回收率-1	Of#"nu   回收率-2
:BF WX   土霉素	7 6HB@'xY   128%	oJZ0{^   137%
qc3?Aplj   四环素	n65fT+;   91.8%	]0pI6"   97.4%
oTA'=<W?D   金霉素	Pd(n|t3[8   88.5%	7VJf~\%1j   87.1%
E eCgV{9B   强力霉素	A3zNUad;   97.3%	5xG/>fn   95.3%