水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） (@"5:M  
2．样品处理 @Wb_Sz4`  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA<sub>2</sub>Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 q|_t=YM@  
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含有EDTA<sub>2</sub>Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA<sub>2</sub>Na，溶解后作为样品提取液。 "0edk"hk  
3．净化步骤： n13#}i{tm  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA<sub>2</sub>Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 1{pU:/_W  
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4．浓缩及定容： dqu+-43I|  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ ~vMdIZ.h  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 okv`+VeA  
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5．HPLC条件 CW)JS3}W"  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm mIy|]e`SJ  
流动相：A:B=77:23 $wBF'|eU  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. yy*8Aw}  
B：乙腈 &?)? w-$p  
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6．结果：（两个平行） m:  

_9<nM48+t   名称	4 [K"e{W3   回收率-1	xB<^ar   回收率-2
ah9P C7[   土霉素	b:6NVHb%   128%	suF<VJ)&s   137%
Wq}Y|0c   四环素	HZJ)q`1E   91.8%	i] I{7k   97.4%
t|jp]Vp   金霉素	A6Vb'Gq v{   88.5%	!+(c/ gwBh   87.1%
3[Xc:;+/   强力霉素	D<wz%*   97.3%	~cL)0/j}   95.3%