水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） \l@,B +)  
2．样品处理 Vb'7>  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA<sub>2</sub>Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 7ek&[SJ>,/  
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含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 eEn;!RS)  
3．净化步骤： D2,z)O%VK  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 Q(\4]i< S  
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4．浓缩及定容： c~v~2DM  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ 3dDX8M?  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 t2r?N}"P  
1Zi,b
 
5．HPLC条件 EMc;^ d  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm @
G4X  
流动相：A:B=77:23 :Pv*,qHE  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. T]?n)L,2  
B：乙腈 ]]"jw {W}A  
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6．结果：（两个平行） N72Yq)(  

k}#;Uy=5   名称	MBXBog7U   回收率-1	G\a8B#hg   回收率-2
wm+})SOX9   土霉素	0j_bh,zG#   128%	-$,%f?   137%
.WQ+AE8Q   四环素	X@|&c]]   91.8%	Ia'ZV7'   97.4%
qSejLh6   金霉素	_0 m\[t.   88.5%	W@2vjz   87.1%
_aPh(qprc   强力霉素	YQ0)5}   97.3%	<s@-:;9~   95.3%