水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） '`goy%Wd  
2．样品处理 &LxzAL,3!  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA<sub>2</sub>Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 JpHsQ8<  
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含有EDTA<sub>2</sub>Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA<sub>2</sub>Na，溶解后作为样品提取液。 @XG `D>%k  
3．净化步骤： AFhG{G'W  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 NwuBe:"@  
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4．浓缩及定容： P;91C'T-x  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ >5},qs:lZ  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 4Jy,IKPp  
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5．HPLC条件 Uo)<_nG  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm f2e$BA  
流动相：A:B=77:23 DmA!+  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. MP&4}De  
B：乙腈 ?Lb7~XK t\  
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6．结果：（两个平行） _^$b$4)  

,(?4T ~   名称	K4L#%KUPW   回收率-1	MNE)<vw>   回收率-2
a m%{M7":7   土霉素	P?ol]MwaB   128%	<VsZ$   137%
0kEq|k9   四环素	:Dm@3S$4<   91.8%	: P2;9+v   97.4%
0+h?Bk   金霉素	AIo;\35   88.5%	Lj\<qF~n   87.1%
?os0JQVB   强力霉素	?+ _"2XY   97.3%	.!! yj,bQz   95.3%