随着现代
食品工业的发展,人们为了增加食品的风味、改善色泽和延长货架期等,采用了多种现代食品加工
技术,但是不幸的是,由于种种原因,在某些食品加工过程中使用了危害人们健康的物质,比如最近出现的食品中添加“塑化剂”
邻苯二甲酸酯类物质。
Vo%DoZg 7 b8pWM 以往,由于人们对邻
苯二甲酸酯类的
安全性认识不足,多种食品都涉嫌“被添加”。博纳艾杰尔科技根据不同食品基质的具体情况,开发了一系列的
检测方案,以供大家参考。
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HmeK 1.水性样品 7)*QX,4C wRJ`RKJ-T 此类样品包括瓶装纯净水、矿泉水,茶、果汁和功能饮料等;某些可水溶解的固体样品。可以先制成水溶液,然后全部作为待处理液,如无脂糖果。推荐前处理柱为Cleanert DEHP (500mg/6mL)。
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0wP CK8!7=>}^ 样品处理:取10mL样品,进行固相萃取富集处理
2Zr,@LC Bh7dAV( 固相萃取
方法:
{YEGy #NWS)^&1b 活化:5mL甲醇、5mL水
"B0I$`~wu >~})O&t 上样:10mL水性样品
EU.!/'< 7,FhKTV1/ 淋洗:5mL5%甲醇水,真空抽干20min。
/.Jq]" af|x(:!H 洗脱:5mL甲醇
#dkSAS X;CRy, 检测:将洗脱液用氮气吹干后,以1mL甲醇定容,然后用液相色谱法检测。
"]U_o<V d t^Hd]+^\ 说明:此法多适用于配套液相色谱检测,当样品中邻苯二甲酸酯类的含量较低时,需要采用固相萃取富集才能检测的情况。
QUWx\hqE 8JU{]Z!G<; 一般来说,对于此类样品,可以采用正己烷液液萃取的办法,用GC/MS(灵敏度较高)直接检测。
R6\|:mI,$ HEm XB= 2.低脂液体样品 U+:Mu]97 yHn8t]{
此类样品包含液态奶制品、果酱、糖浆等。推荐前处理
产品为Cleanert MAS-PAE管。
lfqsoIn; LrdX^_,nt 样品处理:向玻璃离心管中加入2mL样品,然后加入4mL乙腈:甲基叔丁基谜(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAE填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。
69N8COLB T2 /u7<D- 检测:GC/MS检测。
QsyM[; \j: 60r0O5=|Fl 3.低脂固体食品 _g6H&no[ Za7!n{?0 此类样品包括奶粉、饼干、糕点、果冻、奶糖等,推荐产品为Cleanert MAS-PAE管。
bDnT><eH ;9hS_%ldX4 样品处理:取1g已制成粉末状的样品,2mL水,加入到Cleanert MAS-PAE离心管中,然后加入4mL乙腈:甲基叔丁基谜(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAE填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。
:xC1Ka%~ vue=K 检测:GC/MS检测。
6{H@VF<QY! ab>>W!r@! 4.高脂样品 T5>'q;jM `\Te, 此类样品包括植物油脂、动物油脂、奶酪、动物组织性食品等,推荐前处理柱为Cleanert PAE。
j0A9;AP;;C Z!I#Z2X 4.1 动植物油脂样品的处理 T:S[[#f{5 (`&E^t 取0.2g样品,用1mL正己烷溶解,作为待净化液。
2I0Zr;\f %D E_kwL 固相萃取方法:
73kI%nNB !Er)|YP 活化:5mL正己烷
tWITr ;I]$N]8YI 上样:全部待净化液
]I(<hDuRp [ Ru( H 淋洗:7mL正己烷
GUUd(xS{ X?n(
$z/{ 洗脱:3mL乙酸乙酯:正己烷(50:50,v/v),洗脱2次,合并洗脱液。
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].3@ Dk 40℃氮吹至近干(目视只剩少许粘稠油状物体),加入1mL乙腈反萃取,涡旋振荡
&?3P5dy_ :?H1h8wbCt 3min,以4000rpm转速,离心5min,轻轻地将上清液倒入2mL玻璃样品瓶中,作为待
lfyij[6q+ SI:Iv:> 检液。
z i3gE$7 2 D!$x+| 检测:GC/MS检测。
Pt?d+aBtV -ei+r# 4.2其他样品的处理 d2tJ=.DI G|)fZQ1nS 取样品0.5g,以5mL正己烷于密封玻璃瓶中超声提取,然后以4000rpm转速,离心5min,取上清液作为待净化液。若样品中含有水,视情况加入适量无水硫酸钠后,再进行上述操作。
ki9vJ< m9Hdg^L 固相萃取方法:
`(pe#Xxn ]M/*Beh 活化:5mL正己烷
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-mqTlXM 上样:全部待净化液
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/A< #GA6vJ4^s 淋洗:3mL正己烷
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Lx}2 洗脱:3mL乙酸乙酯:正己烷(50:50,v/v),洗脱2次,合并洗脱液。
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BA2 &g\?znF]H 40℃氮吹至近干(目视只剩少许粘稠油状物体),加入1mL乙腈反萃取,涡旋振荡
Kgu#Mi~ ] !:0^| 3min,以4000rpm转速,离心5min,轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中,作为待检液。
a0[Mx 4 ZsepTtY 检测:GC/MS检测。
5W~-|8m 3rQ;}<*M 5.复杂样品 QR]61v:` XZ!^kftyW 此类样品多为油水混合态,同时添加有多种风味物质,成分比较复杂,包括方便面调味包,酱油、醋、用来调味的其它酱汁等。根据样品中的脂肪含量,对于高脂样品推荐前处理柱为Cleanert PAE-C柱,对于低脂样品推荐使用Cleanert MAS-PAEc管。
[_,Gk]F= ,.T k"\@ 5.1 以Cleanert PAE-C柱进行样品处理,以方便面调味包为例: q%x
q\L. xh raf1v3\ 取0.5g样品,加入5mL正己烷,涡旋振荡3min后,再加入500mg无水硫酸钠,涡旋振荡3min后,以4000rpm转速,离心5min,取全部上清液作为待净化液。
Fi!XaO +`H{ 固相萃取方法:
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'=^ .8K ~ h 活化:5mL正己烷
yC<[LH !c 3li . 上样:全部待净化液
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$ oykqCN 淋洗:3mL正己烷
NDv_@V(D 4M4oI . 洗脱:3mL乙酸乙酯:正己烷:甲苯(50:40:10,v/v),洗脱2次,合并洗脱液。
N=X(G( O]nZr 40℃氮吹至近干(目视只剩少许粘稠油状物体),加入1mL乙腈反萃取,涡旋振荡
(GNY::3 d^Jf(NE0Yo 3min,以4000rpm转速,离心5min,轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中,作为待检液。
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检测:GC/MS检测。
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TP9 cG`R\$ 5.2 以Cleanert MAS-PAEc管进行样品前处理,以酱油为例 '#fwNbD 4X5Tyv(Dp 样品处理:向Cleanert MAS-PAE离心管中加入2mL样品,然后加入4mL乙腈:甲苯(9:1,V/V),将离心管涡旋2min,最后加入Cleanert MAS-PAEc填料,再将离心管涡旋振荡2min后,以4000rpm的转速离心5min,取上清液,以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后,待检。
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) 检测:GC/MS检测。
PJCRvs|X iA^GA8dn 附件一: XSu9C zx&I ^_cR 高效液相色谱法检测15种邻苯二甲酸酯的含量
Dm"@59x zdwr5k 色谱柱:Agela Venusil XBP C18-L ,4.6×250mm,5µm,150Å(订货号:VX952505-L)
Iaq7<$XU aK%i=6j! 流动相:A:水,B:甲醇:乙腈=50:50
~olta\| K#B)@W?9 流 速:1.0 mL/min
l>i<J1 ;+dB-g[ 波 长:242 nm
;OlC^\e K%) K$/A 进样量:5 µL(100ppm),50µL(10ppm)
YGBVGpE9 AeqxH1 % 样 品:15种邻苯二甲酸酯
[dje!5Dc( !$&3h-l[ 浓 度:100 ppm(正己烷),10 ppm(40%流动相A)
5I!EsW$sY C F2*W).+ 溶 剂:正己烷 /40%流动相A
|2 2
~.9S r-#23iT.~ 柱 温:30℃
tBNkVh(c
y*,3P0*z 图1 邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度:10ppm)
|fXwH> 'sw :IFTiq5a; (邻苯二甲酸二甲酯DMP,邻苯二甲酸二乙酯DEP,邻苯二甲酸二正丁酯DBP,邻苯二甲酸二辛酯
DEHP,邻苯二甲酸丁苄酯BBP,邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯DEHP,邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯
DMEP,邻苯二甲酸二丁氧基乙酯
DBEP,邻苯二甲酸二戊酯DPP,邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯BMPP,邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯
DEEP,邻苯二甲酸二环己酯DCHP,邻苯二甲酸二异丁酯DIBP,邻苯二甲酸二己酯DNP,邻苯二甲酸二壬酯
DINP)
(>*<<a2
2 c?i=6CdD' 结论:Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质,分离度较好,完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限,笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质,所做
实验,供大家参考。
z= pb<Y@X OM!CP'u#{ 附件二 ,5" vzGLJ 气质联用法检测15种邻苯二甲酸酯
zR2'xE* ;\=W=wL( 仪器:Agilent 7890/5975 GC/MS
~ g$Pb[V }PGl8F ! 色谱条件:
CW>f; SesJg~8 色谱柱:DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm
_A%} >:q /!,>P[Vx 进样口:250℃,不分流进样
M
H }4F n\aG@X%oq 程序升温:50℃(1min)20℃/min 220℃(1min)5℃/min 280℃(4min)
y8jk9Tv bJ~]nj 3 进样量:1μL
E`.dU<8HE DOiL3i"H 流速:1 mL/min
O7b Tu<h= 62Yi1<kV@ 质谱条件:
S!cc% Hj"`z6@7 接口温度:280℃
sEq_K#n{ %{g<{\@4(; 电离方式:EI
wYK-YY:Q3 B uV@w-
| 电离能量:70eV
{Sm^F &=y)C/u 溶剂延迟:7min
`)$'1,]u +m kub}<a 监测方式:SIM模式,监测离子见下表
aaW(S
K ^%tmHDNL. 结论:Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质,完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限,笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。
f3h]t0M [i>D|X 附件三 ' 8Q}pp`
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牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 +HD2]~{EkL
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按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验,得到的数据如下:表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表
Q]dKyMSSA )U8=-_m Le,;)Nd Z8
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某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 DJ1!Xuu
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按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验,得到的数据如下:表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表
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