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[重金属/有害元素]【分享】不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的系统解决方案 [复制链接]

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只看楼主 倒序阅读 使用道具 楼主  发表于: 2012-10-07
— 本帖被 admin 从 食品农产 移动到本区(2012-12-10) —
关键词： 食品邻苯二甲酸酯检测
此帖售价 3 世科币,已有 0 人购买 [记录] [购买]
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只看该作者 沙发  发表于: 2012-10-07
附件一： jj`# ;Y  
9Y3"V 3EZ  
高效液相色谱法检测15种邻苯二甲酸酯的含量
$6n J+  
qiet <F  
色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L） B :%Vq2`  
7I ~O| Mw  
流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50 !\#Wq{p>W*  
Time/min
A/%
B/%
0
40
60
2
50
50
10
60
40
12
70
30
20
70
30
31
100
0
40
100
0
40.01
40
60
$T K*w8@:  
流  速：1.0 mL/min a]Pi2:S  
#H7 SLQr\  
波  长：242 nm \HB fM&  
n1; a~0P  
进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm） 1{M?_~g 4  
4Wgzp51Aq!  
样  品：15种邻苯二甲酸酯 ,esEh5=Ir  
K1X-<5]{  
浓  度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A） 4AL,=C3  
P DY :?/  
溶  剂：正己烷 /40%流动相A $Z;8@O3  
K\ Wzh;  
柱  温：30℃ \SmsS^z(]  
R'Ue>k  
图1 邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度：10ppm)
l1] N&jN{  
m|fcWN[  
（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP） .=YV  
gH7  +#/  
结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 }eSy]r[J  
~Q=;L>Qd  
附件二 UA'bE~i  
气质联用法检测15种邻苯二甲酸酯
t8Pf~v  
>&HW6 c  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS D)G oWt  
r]LP=K1  
色谱条件： xpp nBnu$7  
_t,aPowX  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm #rW -jW=A  
:kcqf,7   
进样口：250℃，不分流进样 ]4B;M Ym*  
7}qxWz  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） YCP D+  
;^s|n)F#c  
进样量：1μL ?`OF n F,K  
gHh (Q RA  
流速：1 mL/min D|U bh]  
1d!s8um;  
质谱条件： :BR_%$  
q/w5Dx|:  
接口温度：280℃ N/lEfy<&g:  
({Yfsf,  
电离方式：EI kqX %y  
hc$m1lLn  
电离能量：70eV 29 !QE>Q  
CUdpT$$x3  
溶剂延迟：7min 5o{U$  
 e4_A`j'  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 C3.]dsv:  
Jo8fMG\P  
(e _p8[x  
序号 ekfa"X_  
 }'{"P#e8"q  
保留时间/min nT 4Ryld  
 Xa-TNnws?  
中文名称 D\ZH1C!d  
 b&,Z mDJh  
英文缩写 2 N(Z^  
 ,| 8aDL?  
SIM离子 Q6 o1^s  
US's`Ehx  
1 v 9G~i  
 k!z.6di  
8.265 67H?xsk@n  
 rkh%[o 9"/  
邻苯二甲酸二甲酯 q|klsup  
 ' 8R5 Tl  
DMP }"RVUYU  
 ,QA=)~;D  
163、77 S^i8VYK,C5  
toj5b;+4F  
2 [".94(qs  
 iBWEZw)  
9.135 4S+E% b|)  
 vN]_/T+  
邻苯二甲酸二乙酯 _h,X3P   
 W7.RA>  
DEP FKe/xz  
 ] fA5D)/m<  
149、177 xVI"sBUu  
S,,Wb &A$  
3 n Jz*}=  
 "NEKz  
10.888 Q?>*h xzoP  
 wvxqgXnB\  
邻苯二甲酸二异丁酯 < uV@/fn<  
 ht+wi5b  
DIBP %Zfh6Bl\X  
 2>J;P C[;  
149、223 @.dM1DN)  
 "}[ ]R  
4 ^4[QX -_2  
 nc.P  
11.637 W=#jtU`:5  
 ,>kXn1 ,  
邻苯二甲酸二丁酯 rc`Il{~k  
 gA 5DEit  
DBP W3X;c*j  
 ?H{?jJj$H  
149、223 tPw7zFy6r  
h,/3 }  
5 Fv nf;']q  
 <BdC#t:*L  
11.979 zR=g<e1xe  
 p@?(m/m$  
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 :X1Y  
 1P BnGQYM  
DMEP lZ,$lZg9Z  
 1bCS4fs^>  
59、149、193 {PL,3EBG  
a^&RV5o  
6 a=[|"J<M  
 H_l>L9/\  
12.72 xf qu=z8X  
 UwDoueXs  
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 JgldC[|7  
 NL"w#kTc()  
BMPP w#sP5qKv8  
 8PGuZw<  
149、251 %1i *Y*wg  
oIKuo~  
7 z9zo5Xc=  
 XfwH1n/o#  
13.044 )U2%kmt  
 / DS T|2  
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 fydQaxCND  
 NV3oJ0f&2  
DEEP R9Y{kk0M  
 PO0/C q)  
45、72 bB.Yq3KI  
 p;vrPS  
8 #pMpGw$  
 z`|E0~{-  
13.41 Ozc9yy!%  
 ]8XIw`:f  
邻苯二甲酸二戊酯 lp]q%P  
 Ua>.k|>0  
DPP  d|$-Sz  
 8t& 'Yk  
149、237 bKPjxN?!9  
;DI"9  
9   ev(E  
 Qkg([q4  
15.552 :N:e3$c  
 )0 i$Bo  
邻苯二甲酸二己酯 [AAIBb +U  
 X0%BE!  
DHXP ( z%t  
 _." X# }W  
104、149、76 v|YJ2q?19  
coc :$Sr%  
10 &ETPYf%#  
  B*Q  
15.694 L"V~M F  
 /)xQ# yfX  
邻苯二甲酸丁基苄基酯 ^NOy: >  
 ZUeA&&{  
BBP x\6i(k-  
 B7BikxUa  
149、91 /pnQKy.  
pB0Do6+{  
11 V@1K  
 wi-{&  
17.153 bR? $a+a)  
 ( 0Z3Ksfj1  
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 .FAuM~_99b  
 AZjj71UE  
DBEP AA0zt N  
 z[ N_3n  
149、223 )v?-[ oR  
_79 ?,U]  
12 f:K`M W  
 Z8Il3b*)  
17.81 W&(98}oT  
 ]&/KAk  
邻苯二甲酸二环己酯 *]_GFixi  
 p~THliwd  
DCHP mh8~w~/[  
 Z'sO9Sg8>  
149、167 s%R'c_cGZ  
]w=6.LzO*  
13 Bswd20(w  
 \aO.LwYm;:  
18.056 35[8XD  
 s GP}>w-JZ  
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 ;hLne0|)}  
 |cBpX+D  
DEHP a/wkc*}}/  
 J12 ZdC'O  
149、167 sm>Hkci%  
<IBzh_  
14 AT{ewb  
 1!E+(Iq  
20.444 N|ut^X+|\  
 GBZx@B[TY  
邻苯二甲酸二正辛酯 k'BLos 1W  
 EO;f`s)t  
DNOP m dC.M$  
 ~qiSkG  
149、279 O>Nop5#o  
j]"Yz t~u  
15 GGs3r;(t  
 ,diV;d  
22.98 %Ya-;&;`  
 By@<N [I@  
邻苯二甲酸二壬酯 3X{=* wvt  
 gT R:9E:B  
DNP *Df|D/,WE  
 sDCa&"6+@  
57、149、71 '7W?VipU  
 
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只看该作者 板凳  发表于: 2012-10-07
结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 o~<fw]y  
7i 334iQZ  
附件三 [^ 7^&/0  
}Ax$}#  
f} } Bb8  
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 s'~_pP  
e *;"$7o9  
$vGl Z<3g  
JkQ4'$:  
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表 1mI)xDi9  
"vU :qwm  
序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 z ; :E~;  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 87.82% 3gv>AgG  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 72.31% r ^*,eF  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 81.97% xOTm-Cm9L  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 77.33% wAkoX  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 83.87% bG.aV#$FIg  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 83.83% #Y`U8n2F  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 109.08% gyI5;il~  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 86.36% %I6iXq#  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 84.67% $G*$j!  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 98.33% Z"e|DP`  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 101.30% Bj% {PK  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 92.47% l Fzb$k}_{  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 132.32% \8_&@uLm  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 89.73% ~73YOGiGJH  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 70.10% 9-bDgzk   
=UTv  
!u\X,.h  
   !y4o^Su[  
mI"|^!L  
q'K=Ly+  
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 G+\2Aj  
v9M ;W+J  
61!R -  
(zgXhx_!D  
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 @Cw<wrem  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 149.97% AbLOq@lrK  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 93.49% ->K*r\T  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 125.70% M@8 <^CK  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 136.89% e-{k;V7b  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 90.84% +XFF@h&=t  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 82.29% Cd6^aFoK!  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 106.38% XQlK}AK  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 88.14% #.Ft PR  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 75.32% u]"oGJj1  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 89.56% d;;]+%  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 105.05% kQ{pFFO  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 72.94% 8BLtTpu  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 124.27% d t0?4 d  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 78.19% X`^9a5<"  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 75.27% &W`yHQ"JY  
 
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关于油脂中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案的补充说明 *VHBTO9  
u%XFFt5  
Xuh_bW&zF  
II>X6  
1、  关于Cleanert MAS-PAE（c）的注意事项 g+ 2SB5 2D  
R&ou4Y:DG  
Cleanert MAS-PAE（c）采用多种吸附材料，可以去除蛋白质、色素、油脂（在样品中含量少）以及水等，只剩下邻苯二甲酸酯被以乙腈为主的溶剂提取出来，然后可以经过过滤直接进样检测。方法方便快捷，十分适合于快速检测。 |i|YlWQS  
"5{Yn!-:  
随方法可以提供12mL和40mL透明玻璃瓶作为玻璃离心管，分别可配套10mL和50mL离心转子。  %ef+Z  
$XyGCn  
涡旋时一定要盖上玻璃离心管（上述玻璃瓶）的盖子，盖子的内壁是PTFE材料，不含增塑剂。 <>j, Q  
^jf$V #z0/  
;Jx ^  
6O tv[8^}  
2、  关于Cleanert PAE（c）方法原理的说明 Qbv)(&i# ~  
5Qy,P kje  
采用正己烷溶解或提取邻苯二甲酸酯，同时也会溶解油脂及少量其他杂质。一般来说， #:s'&.6  
ulj`+D?H  
油脂中含有甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯、脂肪酸，以及甘油三酯氧化产物（多见于经过热加工的含有产品）。用正己烷提取，不仅利用了其优良的溶解脂类的性质，保证对邻苯二甲酸酯的充分提取，也避免了采用乙腈这样相对极性较强的溶剂进行提取时，引入更多的极性杂质和溶剂转换的繁琐。 1"v;w!uh  
SCGQo.~,  
笔者认为，邻苯二甲酸酯的化学性质十分类似于油脂，也是酯类化合物，其极性介于甘油三酯和其他成分之间，而尤其是邻苯二甲酸壬酯和甘油三酯的极性较为接近，给分离带来难题。同时，邻苯二甲酸酯的分子量又和甘油一酯、脂肪酸等接近，采用传统GPC处理，不仅所需时间长，同时也不能完全将邻苯二甲酸酯和甘油一酯、脂肪酸等分开。 "H G:by  
L {B#x@9tQ  
Cleanert PAE柱含有极性吸附填料和独特的GPC材料，利用其极性吸附的原理，可以从正己烷及乙酸乙酯：正己烷（1:1，v/v）的溶剂中去除极性杂质，如甘油一酯和脂肪酸等；同时独特的GPC材料可以使得大部分的甘油三酯在淋洗的时候即被正己烷淋洗下来。从而，可以去除大部分油脂成分。最终的洗脱液被吹干后，仅会剩下少量的甘油三酯。 (_nkscf  
\2NiI]t]  
需要说明的是，因为邻苯二甲酸酯的各种性质和油脂的成分过于接近，而且要检测的物质有16种之多，其性质分布范围宽，为了要保证每一种物质的回收率，很难将它们和油脂基质的多种组分彻底分开。 xFpJ#S&  
:"QRB#EC%  
不过，最后可以采用与甘油三酯不互溶的乙腈来反萃取，可以既保证邻苯二甲酸酯的回收率，又能去除剩余的大部分甘油三酯。反萃取的时候，采用超声会提高邻苯二甲酸酯的回收率。 8\I(a]kM`  
"UA W  
    而Cleanert PAEc中增加了吸附色素及其他复杂成分的炭材料，可以保证更加彻底地去除杂质。 u[dI81`  
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含油脂食品中邻苯二甲酸酯类化合物的检测的样品前处理
Q1ABn acR  
4z0R\t jT  
ahi57r[  
K7[AiU_I  
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下： ++Ys9Y)*,  
{7Gx9(  
vA "`0  
gSv[4,hXd  
1、样品提取方法： R Z<+AX9R  
@cS1w'=  
1.1纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。 =~W0~lxX  
SP D 207  
1.2其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。 Ah"'hFY  
Dc&9emKI  
h[-d1bKwS  
,. 6J6{  
2、固相萃取方法： <>T&ab@dE(  
^ =/?<C4  
2.1若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下： 6m-:F.k1(  
wzDk{4U  
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化； m<FWv2)^  
j*eUF-J1  
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中； ~<2 IIR$H  
:~ZqB\>i  
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱； R%Ui6dCLo  
'#,e @v  
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。 kb"_6,[Ms  
`x{.z=xC  
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。 {uaZ<4N.  
n) _dH/"  
2.2若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同2、1。 M('s|>\l  
i}/e}s<-6  
&dhcKO<4  
vU_d=T%$  
补充说明： mQd4#LJ_  
JmU<y  
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。 ia%z+:G  
w(76H^e  
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。 {fGd:2dh  
IVI~1~  
GVmC }>z  
q"gqO%Wb|  
% v;e  
"w}-?:# j  
s kN9O"^A  
L'zE<3O'3  
LHs-&  
X}ZlWJ  
'3A+"k-}mh  
WtEI] WO  
>Bc> IO  
95=g Y  
>^a$  
^>C 11v  
"\e:h| .G  
3Jk[/ .h  
lC0~c=?J  
et=7}K]l  
气质联用法检测16种邻苯二甲酸酯
.*BA 1sjE  
R (G2qi  
XAe\s`  
&VDl/qnaL  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS ]*qU+&  
@Mm/C?#*O  
色谱条件： F/>*If s  
.2 0V 3  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm ?~J i-{#X  
#)o7"PW:  
进样口：250℃，不分流进样 .wmnnvtl,  
~2 @Lx3t$  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） ^"9* 'vTtc  
*^] ~RhjB  
进样量：1μL WK0 C  
/.Fj.6U5  
流速：1 mL/min D8%AV; -Y  
SHV4!xP-V  
^rL_C}YBj-  
1svi8wh  
质谱条件： DVlJ*A  
Kc #|Z  
接口温度：280℃ DIaYo4  
=wG+Ao  
电离方式：EI #DFV=:|~  
O/Rhf[7v*  
电离能量：70eV C$d>_ r  
8 Ti G3  
溶剂延迟：7min 0:=ZkEEeU  
3GH(wSv9\  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表  fvEAIs  
2-'Opu  
g5Z#xszj+  
nXA\|c0  
序号
保留时间/min
中文名称
英文缩写
定量离子
辅助定量离子
1
8.351
邻苯二甲酸二甲酯
DMP
163
77
2
9.228
邻苯二甲酸二乙酯
DEP
149
177
3
11.018
邻苯二甲酸二异丁酯
DIBP
149
223
4
11.788
邻苯二甲酸二丁酯
DBP
149
223
5
12.135
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯
DMEP
59
149、193
6
12.857
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯
BMPP
149
251
7
13.231
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯
DEEP
45
72
8
13.605
邻苯二甲酸二戊酯
DPP
149
237
9
15.805
邻苯二甲酸二己酯
DHXP
149
104、76
10
15.97
邻苯二甲酸丁基苄基酯
BBP
149
91
11
17.436
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯
DBEP
149
223
12
18.108
邻苯二甲酸二环己酯
DCHP
149
167
13
18.345
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯
DEHP
149
167
14
18.511
邻苯二甲酸二苯酯
—
225
77
15
20.785
邻苯二甲酸二正辛酯
DNOP
149
279
16
23.379
邻苯二甲酸二壬酯
DNP
149
57、71
I.'b'-^  
i3VW1~.8  
yX!HZu;j  
Ju2l?Rr X  
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