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[重金属/有害元素]【分享】不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的系统解决方案 [复制链接]

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只看楼主 倒序阅读 使用道具 楼主  发表于: 2012-10-07
— 本帖被 admin 从 食品农产 移动到本区(2012-12-10) —
关键词： 食品邻苯二甲酸酯检测
此帖售价 3 世科币,已有 0 人购买 [记录] [购买]
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只看该作者 沙发  发表于: 2012-10-07
附件一： F5P[dp-`1  
c 0,0`+2~  
高效液相色谱法检测15种邻苯二甲酸酯的含量
NQBpX  
'u*D A|HC  
色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L） 1 eS&&J5  
Q# ~Q=T'<  
流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50 -`'I{g&A  
Time/min
A/%
B/%
0
40
60
2
50
50
10
60
40
12
70
30
20
70
30
31
100
0
40
100
0
40.01
40
60
C'9Cr}cZ.  
流  速：1.0 mL/min ;&9)I8Us  
|n2qVR,  
波  长：242 nm Si_ _8D  
[$mHv,~  
进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm） T. }1/S"m  
H3z: ZTI  
样  品：15种邻苯二甲酸酯 SEo'(-5  
@P#N2:jwj  
浓  度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A） /k E6@  
(uXL^oja  
溶  剂：正己烷 /40%流动相A :y+2*lV  
Tl%`P_J)-S  
柱  温：30℃ ,`|3KE9  
u__9Z:+  
图1 邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度：10ppm)
`[z<4"Os   
/'Ass(=6  
（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP） Umz KY  
aEFJ;n7m  
结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 +M./@U*g  
9`T)@Uj2n  
附件二 #9B)Xx!g  
气质联用法检测15种邻苯二甲酸酯
k|v3.< -  
T%x}Y#U'`  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS 10G}{  
S(o#K|)>  
色谱条件： 5<iV2Hx  
<>n0arAn  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm rR$h*  
}wWKFX  
进样口：250℃，不分流进样 ucuSe!IcX  
K#l:wH _  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） bo<~jb{  
x[4`fM.m*  
进样量：1μL ZufR {^W  
jAGTD I  
流速：1 mL/min 062,L~&E  
9lTv   
质谱条件： TSA,WP\  
V @rI`~$  
接口温度：280℃ VJ84?b{c W  
]~844J p  
电离方式：EI oYHj~t  
s|@6S8E  
电离能量：70eV Gk967pC  
k2E0/ @f{k  
溶剂延迟：7min =6xrfDbN8  
?xK8#  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 so^lb?g  
-\+s#kE:  
()`7L|(`;q  
序号 ;sfb 4x4  
 ]&?Y~"{cD  
保留时间/min 8'n/?.7cX  
 W egtyO  
中文名称 [N1hWcfvd  
 ygOd69  
英文缩写 Xf0M:\w=M  
 :iFIQpk  
SIM离子 &lR 6sb\  
*Kyw^DI  
1 Xm +8  
 u83J@nDQ  
8.265 MzPzqm<  
 |\_^ B  
邻苯二甲酸二甲酯 A"`foI$0  
 K6y :mJYp\  
DMP aqYa{hXio  
  XEC(P  
163、77 "~=mG--I  
GQ*wc?f3  
2 Z?pnj8h -&  
 <F'X<Bau  
9.135 :,WtR  
 j>]nK~[ka  
邻苯二甲酸二乙酯 ;=geHiQHA  
 ]BtbWKJBqe  
DEP ?I/qE='*  
 N-jTc?mT~&  
149、177 _2k]3z?  
so)"4 SEu  
3 7@Zx@  
 lE!a  
10.888 zrR`ecC(b  
 @Ys!DScY,  
邻苯二甲酸二异丁酯 y;t6sM@  
 #O$  
DIBP t<T[h2Wd  
 vo\fUT@k  
149、223 psnTFe  
89n:)|rWq  
4 aO@ 7O*  
 OkCQ?]  
11.637 V[}4L| ad  
 W%.v.0   
邻苯二甲酸二丁酯 MZTx:EN!  
 k% sO 0  
DBP "6R 5+  
 Di@GY!  
149、223 Yk'9U-.mc  
DUL4noq{  
5 Mmo6MZ^  
 oEx\j+}@n  
11.979  Vs)--t  
 ~_9n.C  
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 }R)=S_j  
 )mJf|W!Z#  
DMEP 277ASCWLkU  
 9U {y1}  
59、149、193 gP-nluq  
Cv>o.Bp|  
6 4<lQwV6=  
 -w;(cE  
12.72 l{:a1^[>y  
 -UZ@G~K  
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 g|Y] wd  
 9Ew7A(BG_3  
BMPP ~1* A  
 nx:KoB"ny  
149、251  \dl ph  
:s-o0$PlJ  
7 "o&HE@t  
 1z*kc)=JF8  
13.044 Z,c,G2D  
 ?Pwx~[<1""  
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 o5Y2vmz?9  
 dQgk.k  
DEEP #FYAV%pi  
 02Jo A+  
45、72 ~~F2Ij  
~vgA7E/XV  
8 _2hXa!yO  
 y69J%/c ra  
13.41 R4e&^tI@*  
 O'NW Ebl/  
邻苯二甲酸二戊酯 H]31l~@]  
 X6RQqen3:  
DPP uH\kQ9f  
 -s__ E  
149、237 V/"}ku  
znZ7*S >6\  
9 dl l%4Sd  
 TSo:7&|  
15.552 8 #oR/Nt  
 G+"8l!dC?  
邻苯二甲酸二己酯 8SnS~._9  
 45}v^|Je\  
DHXP ARL   
 Rt= X% [YL  
104、149、76 's@MQ! *  
#i@h{ R01  
10 "D> ]ES%5  
 g0#q"v55  
15.694 ]b[,LwB\`~  
 BpT"~4oV5  
邻苯二甲酸丁基苄基酯 {y);vHf$  
 L :U4N*  
BBP  t.3 \/  
 B 1w0cS%%:  
149、91 q]v,  
_:,.yRez  
11 n8FT<pUq  
 }B*,mn2 N  
17.153 +G\0L_B  
 ;zm ks]  
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 %g-0O#8}  
 y"Ihr5S\  
DBEP 5^o3y.J?P  
 l) iv\j  
149、223 <dJIq"){  
7Ff?Ysr  
12 <q1'Li)_R  
 xtu]F  
17.81 mj,qQ=n;p  
 ax;{MfsK  
邻苯二甲酸二环己酯 /W?z0tk`  
 bA0uGLc  
DCHP D'85VZEFyo  
 `Q+ i-y  
149、167 KWtu,~O_u  
f>?^uSpWH  
13 5_PWGaQa  
 zL6 \p)y  
18.056 zuU Q."#i  
 zZ<ns+h  
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯  W{L  
 ^l&nB.  
DEHP :QxL 9&"  
 $^!a`Xr  
149、167 wxH (&CB-{  
rSM$E  
14 l6',  
 *(@L+D0N  
20.444 !G+n"-h9'  
 Ufm(2`FQ  
邻苯二甲酸二正辛酯 ({D}QEP  
 e6 tH/`Uln  
DNOP HA$^ *qn  
 T#MA#H2  
149、279 GI0x>Z+  
$[HcHnf  
15 +YGw4{\EL  
 G\'u~B/w  
22.98 c+,7Zu!  
 1YF+(fk  
邻苯二甲酸二壬酯 }}4 sh5z  
 h"RP>fZt  
DNP 0)6i~MglY  
 7G<KrKal  
57、149、71 Mp^OL7p^^  
 
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只看该作者 板凳  发表于: 2012-10-07
结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 d lLk4a+  
&2]D+aL|h  
附件三 'htA! KHF  
eRy'N|'  
;f^jB;\<  
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 h GXD u;{  
f4I9H0d;!  
lFV|G J  
@N{Ht)1r  
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表 c qyh#uWe  
FN`kSTm*0!  
序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 &.4_4"l(  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 87.82% %9Fg1LH42r  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 72.31% L/LN X{|   
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 81.97% ,ToEK Id  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 77.33% Li^!OHro.  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 83.87% {[~,q\M[  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 83.83% yuX 0Y{:I  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 109.08% W)hby `k  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 86.36% p<19 Jw<  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 84.67% kl"Cm`b)  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 98.33% * 60)Vo.=  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 101.30% I GtH<0Du  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 92.47% >C3 9 `1  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 132.32% H4Ek,m|c  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 89.73% 9V\`{(R  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 70.10% `BD`pa7.%  
9 `&D  
`<~P>  
   g XMkI$ab  
^yTN (\9  
Z4' v  
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 X ii#Qtd.  
WpZ^R;eK  
#u@!O%MJ  
l !v#6#iq  
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 yr'`~[oSCy  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 149.97% .*"IJD9  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 93.49% _Hk`e}}  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 125.70% Qafg/JU  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 136.89% H l@rS  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 90.84% nE84W$\  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 82.29% Fu$sfq  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 106.38% m>_'f{&u  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 88.14% CjGI}t  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 75.32% 6"(&lK\^  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 89.56% #Uu"olX7  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 105.05% O"Q=66.CR  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 72.94% e|P60cd /  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 124.27% V*~5*OwB  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 78.19% yrX]w3kr%  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 75.27% -E1}mL}I`  
 
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关于油脂中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案的补充说明 )4vZIU#  
Es/\/vF7]D  
M}kt q)  
: n 4 ?  
1、  关于Cleanert MAS-PAE（c）的注意事项 nlQ<Aa-%  
q90eB6G0g  
Cleanert MAS-PAE（c）采用多种吸附材料，可以去除蛋白质、色素、油脂（在样品中含量少）以及水等，只剩下邻苯二甲酸酯被以乙腈为主的溶剂提取出来，然后可以经过过滤直接进样检测。方法方便快捷，十分适合于快速检测。 N:[22`NP  
*,A?lX,9A  
随方法可以提供12mL和40mL透明玻璃瓶作为玻璃离心管，分别可配套10mL和50mL离心转子。 @-|{qP=Dy  
gDU~hv  
涡旋时一定要盖上玻璃离心管（上述玻璃瓶）的盖子，盖子的内壁是PTFE材料，不含增塑剂。 =(Y 1y$  
B:Ec(USe  
]:m>pI*z.  
zA4m !l*eM  
2、  关于Cleanert PAE（c）方法原理的说明 t2d _XQOK  
Ch8w_Jf1yx  
采用正己烷溶解或提取邻苯二甲酸酯，同时也会溶解油脂及少量其他杂质。一般来说， `KBgVhS>  
ij i<+oul  
油脂中含有甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯、脂肪酸，以及甘油三酯氧化产物（多见于经过热加工的含有产品）。用正己烷提取，不仅利用了其优良的溶解脂类的性质，保证对邻苯二甲酸酯的充分提取，也避免了采用乙腈这样相对极性较强的溶剂进行提取时，引入更多的极性杂质和溶剂转换的繁琐。 3)ac  
""Nu["|E  
笔者认为，邻苯二甲酸酯的化学性质十分类似于油脂，也是酯类化合物，其极性介于甘油三酯和其他成分之间，而尤其是邻苯二甲酸壬酯和甘油三酯的极性较为接近，给分离带来难题。同时，邻苯二甲酸酯的分子量又和甘油一酯、脂肪酸等接近，采用传统GPC处理，不仅所需时间长，同时也不能完全将邻苯二甲酸酯和甘油一酯、脂肪酸等分开。 d:jD  
C,T9xm  
Cleanert PAE柱含有极性吸附填料和独特的GPC材料，利用其极性吸附的原理，可以从正己烷及乙酸乙酯：正己烷（1:1，v/v）的溶剂中去除极性杂质，如甘油一酯和脂肪酸等；同时独特的GPC材料可以使得大部分的甘油三酯在淋洗的时候即被正己烷淋洗下来。从而，可以去除大部分油脂成分。最终的洗脱液被吹干后，仅会剩下少量的甘油三酯。 h$7rEs  
04>dxw)8  
需要说明的是，因为邻苯二甲酸酯的各种性质和油脂的成分过于接近，而且要检测的物质有16种之多，其性质分布范围宽，为了要保证每一种物质的回收率，很难将它们和油脂基质的多种组分彻底分开。 7 \) OWp  
<\uz",e}  
不过，最后可以采用与甘油三酯不互溶的乙腈来反萃取，可以既保证邻苯二甲酸酯的回收率，又能去除剩余的大部分甘油三酯。反萃取的时候，采用超声会提高邻苯二甲酸酯的回收率。 C;7?TZ&xw  
IH|PdVNtg  
    而Cleanert PAEc中增加了吸附色素及其他复杂成分的炭材料，可以保证更加彻底地去除杂质。 AY{#!RtV  
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含油脂食品中邻苯二甲酸酯类化合物的检测的样品前处理
m;IKV,  
NXz/1ut%  
D5xTuv9T  
Jy[rA<x$  
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下： {K|ds($ 5  
: Q2=t!  
-]YsiE?r  
hOs~/bM  
1、样品提取方法： *IF ~ab2  
zxd<Cq>d  
1.1纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。 hh.`Yu L  
jxq89x  
1.2其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。 8u"C7} N_  
N ;n55N  
Lm0q/d2|\X  
eSW}H_3  
2、固相萃取方法： sebm  
)IIWXN2A  
2.1若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下： $z5C+K@  
wLg @BSC.  
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化； /CbM-jf  
)o&}i3~Q  
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中； S6_dmTV*  
/>7G  
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱； =trLL+vGw'  
Rp}Sm,w(  
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。  ` EVy  
KFM)*Icg\8  
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。 a7la CHI  
.wQM_RZJ  
2.2若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同2、1。 ,T+.xB;Q@  
qu/b:P  
@$o^(my  
?!n0N\|i]  
补充说明： tE:6  
OH`|aqN  
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。 U#(#U0s*-  
'w`9lIax  
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。 7)l+h Z  
*orP{p -U  
RjGJfN {  
>8w=Vlp  
_4X3g%nXl  
h`V#)Q  
=_vW7-H  
!sh>`AF  
f9?f!k  
#CNK [y  
7tU=5@M9D  
Qjd<%!]+\  
v|;}}ol  
fwz-)?   
,];QzENw  
~cb7]^#u1l  
@ wx  
d\j[O9W>  
jLF,R7t  
|,WP)  
气质联用法检测16种邻苯二甲酸酯
j5bp )U  
9?4:},FRmE  
2HF_kYZ  
aW;DfH  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS y5`$Aa4~  
o'Kl+gw4  
色谱条件： W?R@ eq.9  
n1;zml:7_  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm F$te5 ` a  
ytyB: # J  
进样口：250℃，不分流进样  } @4by<  
!6*m<#Qm  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） 9oTtH 7%  
:'X:cL  
进样量：1μL kB-]SD#  
);=0cnr3  
流速：1 mL/min FG)(,?q  
v?(z4oOD/>  
uo-1.[9ds  
Mew,g:m:  
质谱条件： ;C,t`(  
V-k x=M"k  
接口温度：280℃ y_LFkZ  
+,T z +!  
电离方式：EI Y T'olk  
6 l7iX]  
电离能量：70eV BKKW3PT  
`wKd##v'@  
溶剂延迟：7min G.]'pn  
~Z' /b|x<3  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 [C{oj*"c]  
PFjh]/=  
ZC"a#rQ   
Jk;dtLL}4  
序号
保留时间/min
中文名称
英文缩写
定量离子
辅助定量离子
1
8.351
邻苯二甲酸二甲酯
DMP
163
77
2
9.228
邻苯二甲酸二乙酯
DEP
149
177
3
11.018
邻苯二甲酸二异丁酯
DIBP
149
223
4
11.788
邻苯二甲酸二丁酯
DBP
149
223
5
12.135
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯
DMEP
59
149、193
6
12.857
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯
BMPP
149
251
7
13.231
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯
DEEP
45
72
8
13.605
邻苯二甲酸二戊酯
DPP
149
237
9
15.805
邻苯二甲酸二己酯
DHXP
149
104、76
10
15.97
邻苯二甲酸丁基苄基酯
BBP
149
91
11
17.436
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯
DBEP
149
223
12
18.108
邻苯二甲酸二环己酯
DCHP
149
167
13
18.345
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯
DEHP
149
167
14
18.511
邻苯二甲酸二苯酯
—
225
77
15
20.785
邻苯二甲酸二正辛酯
DNOP
149
279
16
23.379
邻苯二甲酸二壬酯
DNP
149
57、71
8Y [4JXUK  
pgBIYeY,  
,*8)aZ1 k  
%k @4}M>  
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