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[重金属/有害元素]【分享】不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的系统解决方案 [复制链接]

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只看楼主 倒序阅读 使用道具 楼主  发表于: 2012-10-07
— 本帖被 admin 从 食品农产 移动到本区(2012-12-10) —
关键词： 食品邻苯二甲酸酯检测
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只看该作者 沙发  发表于: 2012-10-07
附件一： 8"rX;5 vP  
< tq9  
高效液相色谱法检测15种邻苯二甲酸酯的含量
D6:J* F&?  
z=pV{ '  
色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L） VO6y9X"  
1qN9bwRO  
流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50 ',%&DA2  
Time/min
A/%
B/%
0
40
60
2
50
50
10
60
40
12
70
30
20
70
30
31
100
0
40
100
0
40.01
40
60
 e) (|  
流  速：1.0 mL/min ,p1]_D&  
K)@Buu&,p  
波  长：242 nm }w8AnaC  
v w;  
进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm） jU~%5R  
8;NO>L/J]i  
样  品：15种邻苯二甲酸酯 s~w+bwr  
21j+c{O  
浓  度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A） r8.v0b"1  
 8[OiG9b  
溶  剂：正己烷 /40%流动相A +60;z4y}w  
uHCgIR l>  
柱  温：30℃ YPEd XU8}  
dY.uOafr  
图1 邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度：10ppm)
'wt|buu-H  
^*Fkt(ida  
（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP） mY( _-[ W  
-9"Ls?Cu  
结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 sSK $  
0k 8SDRWU  
附件二 E>D@#I>  
气质联用法检测15种邻苯二甲酸酯
OHo0W)XUU  
'*; rm*n  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS W =m_G]"L  
{ Se93o  
色谱条件： !%@{S8IP.v  
IM/\t!*7  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm jp]JF h;3  
nLg7A3[1v  
进样口：250℃，不分流进样 ijB,Q>TgO  
?6bE!36  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） ngjbE+  
f@mM&e=f  
进样量：1μL 5 \J;EWTU  
/[L:ol6;!  
流速：1 mL/min ?*;zS%93U9  
^5+-7+-S  
质谱条件： U DG _APf  
Yq_zlxd%F  
接口温度：280℃ o%.cQo=v*  
iR-O6*PTC  
电离方式：EI eD3F%wxz  
$4"OD"Z Cq  
电离能量：70eV L[K_!^MZ  
Ou%>Dd5|?  
溶剂延迟：7min LHz{*`22q  
o\#C] pp  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 _W+TZa@_  
m8?(.BJ%  
Fi#t88+1  
序号  0c{N)  
  -<sXvn  
保留时间/min ,y.0 Cb0  
 mNJB0B};m  
中文名称 [{ pc1U-  
 ;@L#0  
英文缩写 c(jA"K[|b  
 qH ~usgqB7  
SIM离子 .28*vkH%C=  
<L-L}\-I"  
1 ?tcbiXRG+  
 ^vPa{+N  
8.265 !CWqI)=  
 DlP}Fp{  
邻苯二甲酸二甲酯 !cpBX>{w  
 k@2gw]y"  
DMP \Q6Ip@?  
 T \AuL  
163、77 |qr[*c3$1  
+bXZE  
2 X;1q1X)K  
 O[]+v  
9.135 UYPBKf]A9  
 'G^=>=w|Nv  
邻苯二甲酸二乙酯 d+^;kse  
 UJZa1p@L  
DEP [bcqaT  
 g R6:J  
149、177 }$o%^ "[  
+Lyh F2  
3 Ne[O9D 7  
 1eJ\CdI  
10.888 /Iskjcc60W  
 6?74l;  
邻苯二甲酸二异丁酯 6R<%. -qr  
 4 8DsRy  
DIBP |amEuKJ  
 jm?mO9p~  
149、223 c{ <3\  
:Cuae?O,  
4 4 $J/e?i  
 / [19ITZ  
11.637 HP8pEo0Y  
 MhsG9q_%  
邻苯二甲酸二丁酯 md_Ld /  
 XkD_SaL}  
DBP >5j/4Ly  
 /t/q$X  
149、223 &a:aW;^A7  
}a`LOBne  
5 -lp_~)j^  
 U".-C`4v  
11.979 ^T[ #rNkeL  
 w5;EnI  
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 B^qB6:\t  
 8%"e-chd  
DMEP o#Y1Uamkf  
 ,&9|Ac?$  
59、149、193 e,BJD>N ?  
ovohl<o\  
6 >"[u.1J_'I  
 }u&JX  
12.72 Gl:AS PZ6  
 7jPmI  
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 7Av]f3 Zr  
 ra&C|"~E  
BMPP wnX6XyUH  
 x#^kv)  
149、251 _=] FJhO  
)N/KQ[W  
7 D H^^$)  
 { \ePJG#  
13.044 RBXoU'.  
 4Q>F4 v`  
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 G!\x c  
 a|NU)mgEI  
DEEP =N c`hP  
 xpM~* Gpm  
45、72 4pqZ!@45|  
*v+ fkg  
8 .kIf1-(<U  
 J^:~#`8  
13.41 @jHio\/_  
 i1 &'Zh  
邻苯二甲酸二戊酯 .yPx'_e  
 n&]w* (,  
DPP GN0'-z6Uy  
 YC'~8\x3z  
149、237 i"xDQ$0G6  
}b`*%141  
9 iE(grI3  
 c29Z1Zs2)  
15.552 @{u c  
 Z.pw!mu"  
邻苯二甲酸二己酯 L ]c9  
 &v,p_'k  
DHXP ?C35    
 [<QWTMjR  
104、149、76 EB<q.  
]?{lQ0vw'w  
10 MFuI&u!g:  
 'OCo1|iK~  
15.694 AW5g (  
 Bq_P?Q+\  
邻苯二甲酸丁基苄基酯 i&)C,  
 rrYp^xLa`  
BBP "b4iOp&:=  
 E G4bFmcs  
149、91 q}Z T?Xk?  
MXk. 2  
11 P1stL,  
 9PK-r;2  
17.153 :<k|u!b}y  
 &>.1%x@R  
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 k=2l9C3Z  
 cu!bg+,zl  
DBEP ?0<INS~  
 x*8f3^ wE  
149、223 `)M\(_  
Y zW7;U S  
12 #aY<J:Nx  
 ugCS &  
17.81  Cmx2/N  
 \}QuNwc   
邻苯二甲酸二环己酯 f \_!N "HW  
 " IkF/  
DCHP RG r'<o)  
 I= h4s(  
149、167 qL5#.bR  
:8Ts'OGwI  
13 |+xtFe  
 Z F yX@#B9  
18.056 Rk jKIa  
 Jv^cOc  
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 ?V)C9@bp  
 4IP\iw#w  
DEHP "K+N f  
 eIUuq&(  
149、167 RJ}yf|d-C  
*J Y`.t  
14 SXo[[ao  
 yg-F J/  
20.444 nl-t<#z[  
 |IX` (  
邻苯二甲酸二正辛酯 bg1"v a#2  
 2Z;`#{  
DNOP 2 ]DCF  
 V3 _b!  
149、279 %eJ\d?nw  
!M]%8NTt2  
15 Z.aLk4QO@  
 E)80S.V  
22.98 | z#m  
 ,a9D~i 9R  
邻苯二甲酸二壬酯 Sqdc1zC  
 qu<B%v  
DNP  `CA G8D  
 k(-Z@   
57、149、71 Ox7uG{t$#  
 
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只看该作者 板凳  发表于: 2012-10-07
结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 i)=m7i  
en%J!<&W{K  
附件三 ;3mL^  
xF&6e&nv  
WX LK89ev\  
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 ti}f&w ICJ  
,'=hjIel  
hv3;irK]&  
'(tj[&aL  
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表 Cpe#[mE  
>:A<"wZ  
序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 C\OECVT  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 87.82% s"q=2i  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 72.31% -;vT<G3  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 81.97% ^,`M0g\ $  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 77.33% (#If1[L  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 83.87% [z2eCH  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 83.83% !3@{U@*Z]  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 109.08% 9)Ly}Kzx  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 86.36% ,m:L2 -J@  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 84.67% Y([d;_#P  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 98.33% Y[@0qc3UO  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 101.30% 0yaMe@&,  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 92.47% J+|/-{g  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 132.32% z+ ZG1\  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 89.73% 0p `")/  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 70.10% 7E\g &R.  
o<rsAe  
xp^ 7#`MJ?  
   </=3g>9Z  
[S0mY[ "  
VX!hv`E  
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 %J!NL0x_  
JD*8@N  
, D"]y~~I5  
E30Z`$cz:  
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 qnXTNs ?b  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 149.97% 8k H<$9  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 93.49% |'$ l7  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 125.70% ^V .'^=l  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 136.89% *)D1!R<\,R  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 90.84% oj@g2H5P  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 82.29% +?AW>&68y  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 106.38% i*CnoQH  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 88.14% l9J*um-  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 75.32% <u0,Fp  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 89.56% 8R?I`M_b  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 105.05% #xp(B5  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 72.94% ]0-<>  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 124.27% D/:3R ZF  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 78.19% iRve)   
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 75.27% X=,6d9,  
 
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关于油脂中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案的补充说明 ov bEmb  
Enu!u~1]F  
%6N)G!P  
^glX1 )  
1、  关于Cleanert MAS-PAE（c）的注意事项 :q(D(mK  
%uj[`  
Cleanert MAS-PAE（c）采用多种吸附材料，可以去除蛋白质、色素、油脂（在样品中含量少）以及水等，只剩下邻苯二甲酸酯被以乙腈为主的溶剂提取出来，然后可以经过过滤直接进样检测。方法方便快捷，十分适合于快速检测。 ygMd$0:MN  
*/4tJ G1U  
随方法可以提供12mL和40mL透明玻璃瓶作为玻璃离心管，分别可配套10mL和50mL离心转子。 }iMXXXBOT  
4Q@\h=r  
涡旋时一定要盖上玻璃离心管（上述玻璃瓶）的盖子，盖子的内壁是PTFE材料，不含增塑剂。 C0gfJ~M )  
g%ZdIKj!  
1E8$% 6VV  
)sRN!~  
2、  关于Cleanert PAE（c）方法原理的说明 7,f:Qi@g  
lK "' nLL  
采用正己烷溶解或提取邻苯二甲酸酯，同时也会溶解油脂及少量其他杂质。一般来说， q)NXyy4BT  
UE\% e9<l  
油脂中含有甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯、脂肪酸，以及甘油三酯氧化产物（多见于经过热加工的含有产品）。用正己烷提取，不仅利用了其优良的溶解脂类的性质，保证对邻苯二甲酸酯的充分提取，也避免了采用乙腈这样相对极性较强的溶剂进行提取时，引入更多的极性杂质和溶剂转换的繁琐。 Rq"VB.ef&{  
GI}4,!^N  
笔者认为，邻苯二甲酸酯的化学性质十分类似于油脂，也是酯类化合物，其极性介于甘油三酯和其他成分之间，而尤其是邻苯二甲酸壬酯和甘油三酯的极性较为接近，给分离带来难题。同时，邻苯二甲酸酯的分子量又和甘油一酯、脂肪酸等接近，采用传统GPC处理，不仅所需时间长，同时也不能完全将邻苯二甲酸酯和甘油一酯、脂肪酸等分开。 DE5d]3B  
" 98/HzR  
Cleanert PAE柱含有极性吸附填料和独特的GPC材料，利用其极性吸附的原理，可以从正己烷及乙酸乙酯：正己烷（1:1，v/v）的溶剂中去除极性杂质，如甘油一酯和脂肪酸等；同时独特的GPC材料可以使得大部分的甘油三酯在淋洗的时候即被正己烷淋洗下来。从而，可以去除大部分油脂成分。最终的洗脱液被吹干后，仅会剩下少量的甘油三酯。 Tc9&mKVE%(  
>y]?MGk  
需要说明的是，因为邻苯二甲酸酯的各种性质和油脂的成分过于接近，而且要检测的物质有16种之多，其性质分布范围宽，为了要保证每一种物质的回收率，很难将它们和油脂基质的多种组分彻底分开。 _MGNKA6JI  
cZ6?P`X  
不过，最后可以采用与甘油三酯不互溶的乙腈来反萃取，可以既保证邻苯二甲酸酯的回收率，又能去除剩余的大部分甘油三酯。反萃取的时候，采用超声会提高邻苯二甲酸酯的回收率。 3Wjq>\  
4s[`y V  
    而Cleanert PAEc中增加了吸附色素及其他复杂成分的炭材料，可以保证更加彻底地去除杂质。 o^8*aH)I>Y  
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只看该作者 4楼 发表于: 2012-10-07
含油脂食品中邻苯二甲酸酯类化合物的检测的样品前处理
wA< Fw )  
H^fErl  
:{=2ih-}  
x5(B(V@b  
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下： N$!  Vm(S  
?#gYu %7DN  
@+&QNI06S  
i%# <Hi7  
1、样品提取方法： o 2_mcJ  
OM (D@up  
1.1纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。 94'0X  
i1 ^#TC$x  
1.2其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。 RxUzJ  
z;1qYW[-A  
9-hVlQ~|  
J_N`D+m  
2、固相萃取方法： ;t5e]  
!9g >/9h  
2.1若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下： Rdl^-\BV  
7thB1cOJ  
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化； L9^h .Y7  
VjGtEIew  
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中； ]vUTb9>{?  
YdF\*tZ  
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱； o}6d[G>  
W8Aii'Q8C/  
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。 .?LP$O=  
H-'~c \)  
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。 yGX"1Fb?;x  
!fK9YW(Im  
2.2若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同2、1。 +kZW:t!-  
b5Vn_;V*  
NTy0NH  
5/C#*%EH'  
补充说明： WN9K*Tt~o&  
@ !m+s~~]h  
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。 rBrJTF:.  
k/mO(i%qi  
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。 WJF#+)P:Y  
%eQw\o,a  
mIm.+U`a2  
U]W+ers  
}.74w0~0^  
QX >Pni  
gbL!8Z1h  
/.<2I  
<P #]U"?A  
oRQJ YH  
lCC(N?%Q  
q;L~5q."E  
c]!Yb-  
K3On8  
OjRJyhzS*  
'980.  
|)W N%#v  
W&Pp5KR  
5\\a49k.p  
41Htsj  
气质联用法检测16种邻苯二甲酸酯
e SlZAdK  
FEzjP$  
w] =q>p  
Ln C5"  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS M9scZuj  
4A@77#:J5  
色谱条件： D`C#O 7.N  
1?j[ '~aE  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm 3HI- G.]hC  
r}]%(D](v  
进样口：250℃，不分流进样 Y&JK*d  
Yl#|+xYA5[  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） MrGq{,6C  
DLP G  
进样量：1μL r(Vz(  
LqA&@  
流速：1 mL/min (S d8S`xO  
zXRq) ;s  
g{d(4=FM  
8\H*Z2yF+  
质谱条件： *~>} *  
?0%3~E`l:  
接口温度：280℃ KqI<#hUl  
&ap&dM0@%a  
电离方式：EI >&g^ `  
a#L:L8T;j  
电离能量：70eV 6J""gyK.  
>nqCUhS   
溶剂延迟：7min xxS>O%  
b:6NVHb%  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 suF<VJ)&s  
>=+: lD  
K}j["p<!  
Ua2waA  
序号
保留时间/min
中文名称
英文缩写
定量离子
辅助定量离子
1
8.351
邻苯二甲酸二甲酯
DMP
163
77
2
9.228
邻苯二甲酸二乙酯
DEP
149
177
3
11.018
邻苯二甲酸二异丁酯
DIBP
149
223
4
11.788
邻苯二甲酸二丁酯
DBP
149
223
5
12.135
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯
DMEP
59
149、193
6
12.857
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯
BMPP
149
251
7
13.231
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯
DEEP
45
72
8
13.605
邻苯二甲酸二戊酯
DPP
149
237
9
15.805
邻苯二甲酸二己酯
DHXP
149
104、76
10
15.97
邻苯二甲酸丁基苄基酯
BBP
149
91
11
17.436
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯
DBEP
149
223
12
18.108
邻苯二甲酸二环己酯
DCHP
149
167
13
18.345
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯
DEHP
149
167
14
18.511
邻苯二甲酸二苯酯
—
225
77
15
20.785
邻苯二甲酸二正辛酯
DNOP
149
279
16
23.379
邻苯二甲酸二壬酯
DNP
149
57、71
gx ]5)O  
s'4%ZE2Dr  
@ yj$  
49iqrP'  
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