[重金属/有害元素]【分享】不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的系统解决方案 [复制链接]

附件一： 2.|
Y  
& MAIm56~  
YT-t$QyL  
Kr9 @  
色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L） 8sL7p4  
\ii^F?+b  
流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50 {6~W 2zX&  
oW-luC+  
流  速：1.0 mL/min 9g>ay-W[(  
u<):gI  
波  长：242 nm =_TCtH  
@!K)(B;A0b  
进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm） =7Nm=5@  
"bRck88V  
样  品：15种邻苯二甲酸酯 hYF<Wn3L  
)(y&U  
浓  度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A） +xB!T1pD  
YS/{q~$t  
溶  剂：正己烷 /40%流动相A IL`5RZi1  
_! \X>rfz  
柱  温：30℃ V/<dHOfR\  
N%n#
mV;  
Pa%XLn'5  
DBbm M*r  
（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP） R2Lq,(@-  
uXyNj2(d.  
结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 9T`xW]Zf  
ycIT=AFYqd  
附件二 "-9 0:"W  
M +
~guTh  
KSMe#Qnw  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS &B/cy<;y,  
:DR G=-M  
色谱条件： 6oL-Atf  
~BaU2S@y  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm \"<&8  
t9zPJQlT}  
进样口：250℃，不分流进样 OHR9u  
?A
8Uf=  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） _r+9S.z  
X.o
[=E  
进样量：1μL [f:>tRdH  
 @j9yc  
流速：1 mL/min OE}L})"  
u)t1t69T\g  
质谱条件： Y=vA;BE]R  
0Dc$nL?TqX  
接口温度：280℃ MP w@O0QS  
sog?Mvoq  
电离方式：EI {1#5\t>9yD  
[77]0V7  
电离能量：70eV ,
HUs MCXQ  
Kcsje_I-M  
溶剂延迟：7min !}l)okQH<#  
P]yER9'  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 )WwysGkqol  
>|.jG_s  

;Zw!   序号 UF D_	q/m}+v]   保留时间/min rya 4sxCh	Y49 kq}   中文名称 [GU!],Y	*v8Cj(69   英文缩写 r/:9j(y xr	?#J~X\5   SIM离子 l]oGhM;
FZjtQ{M   1 Z|'tw^0e5	.6e5w1r63   8.265 dYfVox;	dXrv   邻苯二甲酸二甲酯 # ?}WQP!	|{t}ULc   DMP SJy:5e?zk	r o^Y$;G   163、77 HbZ3QWP
{ U-VInu   2 hj 0uv6t.c	L7a+ #mGE   9.135 0r:8ni%cL	QJOP*<O   邻苯二甲酸二乙酯 Q0ev*MS9Z	f8'&(-   DEP !7^fji	uop_bJ   149、177 Z*s/%4On
8oN4!#:   3 wQ(ME7t	m!E36ce}   10.888 D zl#[|q	,|xG2G6   邻苯二甲酸二异丁酯 lKH"PH7*_w	nV"[WngN   DIBP P]r"E	,MOB+i(3*u   149、223 ((;9%F:/$
$@8\9Y {   4 ?uQ|?rk	R%3H"FU9w   11.637 },[S9I`p	Yn1U@!   邻苯二甲酸二丁酯 NF&\<2kX	,EwJg69   DBP }1;Ie0l=_e	*p.ELI1IC   149、223 `yuD/-j
H~Q UN   5 7zQD.+&L	Y7 1b  Lg   11.979 3_Oq4/	V TEyqo2   邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 vBM\W%T|d	s V [|op   DMEP -F5U.6~`!	m41n5T`   59、149、193 v3]q2*`G#
Ogjjjy84vM   6 EG9S? $	IndN R:"g   12.72 F48 `1+	sO(Kpo9jq   邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 Bj ]0Cz	j?&FK   BMPP qc`_&!*D	,cm2uY   149、251 ]gmf%g'C
MRJdQCBV   7 :))AZ7 _	[M;P : @   13.044 }~ +	Y{J/Oib   邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 hrXN38-	@*c+`5)_   DEEP \]r{73C	o?%x!m>   45、72 e~-Dk .i
f?{Y<M~]   8 D'2O#Rj4q	Y8AU<M   13.41 prm	d>aZpJ[.   邻苯二甲酸二戊酯 Al` ;SWN	l s_i)X   DPP =_ UPZ]	nnE@1X3   149、237 r*3;gyG.,#
S\ li<xl   9 O/<jt'	r|#4+'   15.552 HD`%Ma Yhc	'shOSB   邻苯二甲酸二己酯 `"bm Hs7	_&:o"""Wf   DHXP cvC;QRx	m2V4nxw]Qp   104、149、76 Ii K&v<(]
\/,SH?>4x   10 CtE".UlCA	NeWssSje   15.694 ).&$pXj	B(>_.x#kv   邻苯二甲酸丁基苄基酯 tG{Vn+~/	FTB"C[>   BBP LyQO _mT2	,<[os   149、91 UjfB+=7I{L
T xN5K`q   11 J5\> 8I,a	\Z~m6;   17.153 "q%)we	j^k{~]+_^]   邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 Oe= ,-\&_	:Rq D0>1   DBEP jVA xa|S	XYn$yR\dj   149、223 1n,JynJ
bv] ZUF0   12 x^ Wgo`v)	ePF9Vzq   17.81 Qejzp/2	<;Xj4 J   邻苯二甲酸二环己酯 Ufk7%`	n.T [a   DCHP \;sUJr "$	y@(U6ZOyx   149、167 *AJW8tIP
1M +mH#?   13 -yC},tK	a~{mRh   18.056 T+gqu &9R	{?t=*l\S{w   邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 gXF.e. uU	"eBpSV>nnQ   DEHP |{Oe&j3|	uv Z!3UH.   149、167 g<tr | n
q i$6 y?   14 g_-Y-.M	hX<0{pXM4   20.444 l+R Be<Mq	8I`>tY   邻苯二甲酸二正辛酯 4y:yFTp	YG$Y4h" @"   DNOP ,d$V-~2,	up#W"`"   149、279 )|zLjF$
^cn%]X#.   15 !#Ub*qY1Z	I r]#u]Ap   22.98 N2#Wyt8MC	0}$Zr*|;Y   邻苯二甲酸二壬酯 r~nD%H:}P	H65><38X/   DNP lJb1{\|.,	X$BN&DD   57、149、71 JbX"K< nQ

结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 `)w=@9B)"  
&h6 `hP_  
附件三 37tJ6R6[  
*9F{+)A
 
fP
( n3Q  
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 i~4$V  
N{Pa&/V  
ZNDjk  
m='_O+ $  
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表 {]7lh#M  
~(.&nysZ-  
序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 YE -}1&8  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 87.82% &?AP
Y9\.  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 72.31% x0dBg~I  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 81.97% `M,Gsy1h  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 77.33% :io[9B [  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 83.87% XWUi_{zn  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 83.83% 6'1Lu1w  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 109.08% ~Z$Ro/;l  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 86.36% dY.NQ1@"  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 84.67% W$Z8AZ{E  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 98.33% UkM#uKr:  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 101.30% -n 6e;p]  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 92.47% X-cP'"  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 132.32% G PL^!_  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 89.73% j`_tb
 
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 70.10% kjO
I7`DU  
{1'M76T  
6bBNC
2K$-  
   #x(3>}  
3q`Uq`t4mR  
]!cLFXa  
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 v\Zq=,+  
sKDL=c;?j  
GD#W=O  
?,
FL"ye  
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 5z"[{#/  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 149.97% p&3~n: Fo  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 93.49% jx8hh}C  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 125.70% Bt"*a=t;  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 136.89% 9XW[NY#)#  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 90.84% +ZeK,Y+Xy  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 82.29% O<6!?1|KP  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 106.38% -Hu]2J)  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 88.14% VWcR@/3  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 75.32% Ue]GHJ2  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 89.56% J0"<}"  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 105.05% ;yK:.Vg  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 72.94% K# dV.  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 124.27% N/fH%AtM  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 78.19% .\>I -  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 75.27% 8+<vumnw  

关于油脂中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案的补充说明 X3]E8)645N  
ItKwB+my  
gRdE6aIZ  
6{azzk8  
1、  关于Cleanert MAS-PAE（c）的注意事项 }~QB2&3  
Q(]-\L
'  
Cleanert MAS-PAE（c）采用多种吸附材料，可以去除蛋白质、色素、油脂（在样品中含量少）以及水等，只剩下邻苯二甲酸酯被以乙腈为主的溶剂提取出来，然后可以经过过滤直接进样检测。方法方便快捷，十分适合于快速检测。 i $I|JJJ  
/WHhwMc!  
随方法可以提供12mL和40mL透明玻璃瓶作为玻璃离心管，分别可配套10mL和50mL离心转子。 5\4>H6  
8dA
/dMQ  
涡旋时一定要盖上玻璃离心管（上述玻璃瓶）的盖子，盖子的内壁是PTFE材料，不含增塑剂。 RDqC$Gu  
@2$8o]et  
hN:Z-el  
/vV 0$vg  
2、  关于Cleanert PAE（c）方法原理的说明 JQ1VCG  
,-"]IR!,w  
采用正己烷溶解或提取邻苯二甲酸酯，同时也会溶解油脂及少量其他杂质。一般来说， :Rn9rdX  
pi{ahuI#_o  
油脂中含有甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯、脂肪酸，以及甘油三酯氧化产物（多见于经过热加工的含有产品）。用正己烷提取，不仅利用了其优良的溶解脂类的性质，保证对邻苯二甲酸酯的充分提取，也避免了采用乙腈这样相对极性较强的溶剂进行提取时，引入更多的极性杂质和溶剂转换的繁琐。 6uyf  
]*|K8&jxl  
笔者认为，邻苯二甲酸酯的化学性质十分类似于油脂，也是酯类化合物，其极性介于甘油三酯和其他成分之间，而尤其是邻苯二甲酸壬酯和甘油三酯的极性较为接近，给分离带来难题。同时，邻苯二甲酸酯的分子量又和甘油一酯、脂肪酸等接近，采用传统GPC处理，不仅所需时间长，同时也不能完全将邻苯二甲酸酯和甘油一酯、脂肪酸等分开。 L7-n
PH  
D6u>[Z[T  
Cleanert PAE柱含有极性吸附填料和独特的GPC材料，利用其极性吸附的原理，可以从正己烷及乙酸乙酯：正己烷（1:1，v/v）的溶剂中去除极性杂质，如甘油一酯和脂肪酸等；同时独特的GPC材料可以使得大部分的甘油三酯在淋洗的时候即被正己烷淋洗下来。从而，可以去除大部分油脂成分。最终的洗脱液被吹干后，仅会剩下少量的甘油三酯。 d%3BJ+J  
0,/x#  
需要说明的是，因为邻苯二甲酸酯的各种性质和油脂的成分过于接近，而且要检测的物质有16种之多，其性质分布范围宽，为了要保证每一种物质的回收率，很难将它们和油脂基质的多种组分彻底分开。 UD{/L"GG  
-(1\`g07  
不过，最后可以采用与甘油三酯不互溶的乙腈来反萃取，可以既保证邻苯二甲酸酯的回收率，又能去除剩余的大部分甘油三酯。反萃取的时候，采用超声会提高邻苯二甲酸酯的回收率。 G:`Jrh  
/T[ICd2J  
    而Cleanert PAEc中增加了吸附色素及其他复杂成分的炭材料，可以保证更加彻底地去除杂质。 R Sz[6  

bN.Pex  
*4 n)  
j>kqz>3  
K sCyFp  
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下： xSu >  
FI.\%x  
qP ,E
BE  
Y-9I3?ar  
1、样品提取方法： \7_y%HR  
IGgL7^MF  
1.1纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。 $Kd>:f=A  
';"VDLb3  
1.2其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。 sRf
cF`7  
Ca-j?bb!  
JS77M-Ac  
/RF
7j;  
2、固相萃取方法： 7Lt)nq-b  
PW4q~rc=:  
2.1若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下： 4\i[m:e=@  
3oqHGA:}  
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化； wS*E(IAl  
Je{ykL?N  
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中； ;);kEq/=P  
26nx`w?j(  
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱； ]tD]Wx%  
?EL zj  
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。 E3i4=!Y  
liZxBs :%i  
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。 ~BF&rx5Q  
%RVZD# zr  
2.2若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同2、1。 :A
l!1BJQ
 
&L:!VL{I  
>sF)BoLc  
KXrjqqXs  
补充说明： C^){.UGmJ  
Ni>[D"|  
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。 2eogY#  
/QQ*8o8  
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。 `V1]k_h  
PnTu  
=]t| ];c%  
' QG?nu  
w xH7?tsf  
IPk4
;,  
p?!/+  
%4H%?4  
+nL[MSw  
rH-23S  
[~HN<>L@C  
{FkF  
]Um/FAW  
LVGe] lD  
]Ze1s02(  
T)/eeZ$  
`yyG/ l  
6P3*Z  
="+#W6bZT  
HMXE$d=[  
U^PgG|0N  
# !=tDc &  
0GLM(JmK  
h[ ZN+M  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS ;uW FHc5@B  
Om&Dw|xG8  
色谱条件： f$( e\++  
}Z>)DN=+  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm CLSK'+l  
$>gFf}#C  
进样口：250℃，不分流进样 NA*&#X#~  
PFR:>^wK2  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） u-TUuP  
ZuIefMiG~+  
进样量：1μL bcR_E5x$  
n(Uyz`qE  
流速：1 mL/min p7Cs.2>M>S  
/>Nt[o[r  
2Hdu:"j  
<or2  
质谱条件： J=L5=G7(  
|%v^W 3  
接口温度：280℃ 2-b6gc7  
fzA9'i`  
电离方式：EI cAc@n6[`3  
V> bCKtf&  
电离能量：70eV }T$p)"  
Yrn)VV[)h  
溶剂延迟：7min `#gie$B{  
w\brVnt  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 ~!3r&(  

IkXx# )  
u?{ H}V  
zkdetrR  

序号	保留时间/min	中文名称	英文缩写	定量离子	辅助定量离子
1	8.351	邻苯二甲酸二甲酯	DMP	163	77
2	9.228	邻苯二甲酸二乙酯	DEP	149	177
3	11.018	邻苯二甲酸二异丁酯	DIBP	149	223
4	11.788	邻苯二甲酸二丁酯	DBP	149	223
5	12.135	邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯	DMEP	59	149、193
6	12.857	邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯	BMPP	149	251
7	13.231	邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯	DEEP	45	72
8	13.605	邻苯二甲酸二戊酯	DPP	149	237
9	15.805	邻苯二甲酸二己酯	DHXP	149	104、76
10	15.97	邻苯二甲酸丁基苄基酯	BBP	149	91
11	17.436	邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯	DBEP	149	223
12	18.108	邻苯二甲酸二环己酯	DCHP	149	167
13	18.345	邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯	DEHP	149	167
14	18.511	邻苯二甲酸二苯酯	—	225	77
15	20.785	邻苯二甲酸二正辛酯	DNOP	149	279
16	23.379	邻苯二甲酸二壬酯	DNP	149	57、71

~<OSYb  
mcX/G O}  
^B2 -)  
{LQ#y/H?