[重金属/有害元素]【分享】不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的系统解决方案 [复制链接]

附件一： (V | P6C  
2)U3/TNe  
<1hwXo  
)>=`[$D1t  
色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L） Vv zd>yII  
6jKM,%l  
流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50 H-I*;  
!'+t)h9^  
流  速：1.0 mL/min TsR20P@  
Qi[T!1  
波  长：242 nm JhuKW>7  
BURiLEYZl  
进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm） uz*C`T0:rj  

d*H-l3N  
样  品：15种邻苯二甲酸酯 X_=oJi|:  
5|AZ/!rb  
浓  度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A） uD. 0?*_  
=lV
frna  
溶  剂：正己烷 /40%流动相A 1P6~IZVN  
Wmp\J3  
柱  温：30℃ J\2F%kBej?  
sX@e1*YE_  
I</Nmgf  
\2~.r/`1  
（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP） p-ry{"XA  
1f~_ # EIC  
结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 1)k))w9  
m.lNKIknQ  
附件二 H#6J7\xcS  
\*_qP*vq@  
+y-:(aP  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS k ^+h>B-;  
^QXUiXzl  
色谱条件： }_u)3X.O  
7_A(1Lx/l7  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm FUMAvVQ  
6~D:O?2  
进样口：250℃，不分流进样 k9Yr&8B  
hWuq  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） <y!6HJ"  
][TS|\\  
进样量：1μL ]_#[oS  
HaLEQ73  
流速：1 mL/min gSC8 qip  
e?F r/n  
质谱条件： ,P5HR +h  
@-Gf+*GZys  
接口温度：280℃ T*'5-WV|3t  
<o p !dS  
电离方式：EI v82@']IN  
vChkSY([  
电离能量：70eV 7%L-;xcr]B  
ijC;"j/(  
溶剂延迟：7min 'gQm%:qU3r  
e@@kTny(  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 DlTV1X-^1  
qAkx52v6  

NOo &5@z;H   序号 KvC:(Vqj	Zni8im,_j   保留时间/min <XGOcekG	babDLaC@   中文名称 _MnMT9	3{~hRd   英文缩写 o"TEmZUP	(#7pGGp*E   SIM离子 B.|2w
;I]TM#qGF   1 NS<lmWx+	\- `L}$   8.265 PDM>6U	m6aoh^I   邻苯二甲酸二甲酯 b&V =X{V4	O:pQf/Xn   DMP Qy$8!(	t55CT6Se   163、77 j@2 -^q:`
.|x0du|   2 :IbrV@gN{@	goWD~'\   9.135 l.fNkLC#	-&@[]/   邻苯二甲酸二乙酯 v>7tJ[s	9]7 +fu   DEP W>;AMun	=@w};e#D   149、177 S3btx9y{
p^\>{   3 G@ed2T	>Py;6K   10.888 At+on9&=	|'Ve75 W6u   邻苯二甲酸二异丁酯 r(%#@?&	9tk}_+   DIBP x/bO;9E%U4	'00DUUa   149、223 r$G;^
r{p?aG   4 jk) V[7P	b>Vs5nY!   11.637 78y4nRQ*	pZ OVD%   邻苯二甲酸二丁酯 ~)sb\o	3PI{LU   DBP ;l}TUo	%+>I1G   149、223 }SUe 4r&4}
JcvK]x   5 X(g<rz1J]	@qg=lt|(F   11.979 GS<,adD	Kax85)9u   邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 vseu k@>	{.Nt#l   DMEP W}a&L	C+*: lLY   59、149、193 <|s|6C
5A:b \   6 l*b3Mg	iS=}| 8"   12.72 ON] z-	Da)9s %_4   邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 zF3fpEKe	(lTM^3 }   BMPP jrZM	Nt'(JAZ;   149、251 _l{GHz
%Nzg~ZPbmT   7 ]k " j	rpQB# Pz   13.044 j a#E}`wC4	R U>T?2   邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 t' o:aI	p\WW~qD   DEEP gle_~es'K	+F ]X   45、72 G=!Gy.
9~SfZ,(   8 AQDT6E:	9EIHcUXe   13.41 pGc_Klq	?MHVkGD   邻苯二甲酸二戊酯 Rjqeuyj:	t$m268m~   DPP )}0(7z Yu	kXFgvIpg<   149、237 jSsbL a@
/bjyV]N   9 m}54yo	qL/4mM0   15.552 :aS8%m	Ghs{B8   邻苯二甲酸二己酯 $,ZBK6CT	K;a] +9C   DHXP =;#+8w=^	9D#"Ey   104、149、76 d~M;@<eD
b_+dNoB   10 o?BcpWp	!C]0l   15.694 F)Oe ;z6	2+y<&[A8U   邻苯二甲酸丁基苄基酯 Nj4=	R>f$*T   BBP E&ou(Q={	K:hZ   149、91 do@`(f3g
=aR'S\<   11 I-<U u2	0/z=G!z\   17.153 +ExXhT	X!#rw= Q   邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 Qa-]IKOs	/o%J /|   DBEP O1!hSu&	%zDh07VT\   149、223 0*G =~:
hr9rI   12  @Tk5<B3	otaB$Bb   17.81 4L<h% 'Zn	#( G>J4E,   邻苯二甲酸二环己酯 i~1bfl 	)> >Tj7   DCHP m+&)eQ:	W%$sA}O   149、167 dZ]['y%
_4~'K?   13 Q)vf>LwC2S	/4K ^-   18.056 {k:W?`	<<#j?%   邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 uKOs YN%D	_6O\*|'6   DEHP |/!3N	J*I G]2'H   149、167 SLGo/I*
>v\t> [9t   14 q-t m`t*7	,\".|m1o.   20.444 @cc4] >4	Qf=+%-$Y   邻苯二甲酸二正辛酯 4 C7z6VWg	L+GVB[@3Y   DNOP 1\XR6q:2	PjxZ3O   149、279 %qI.Qw$
q eW{Cl~    15 ()\=(n!J	bxXNv^   22.98 ].(l^W	78u9> H   邻苯二甲酸二壬酯 Zb? u'Vm=u	' 5F3,/r   DNP |mS-<e8LY4	CW+]Jv]"   57、149、71 1+Z@4;fk

结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 ?a{>QyL  
f@
H>by N  
附件三 jM;? );Dd  
jFGY`9Zw0  
'=1@,Skj-  
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 A"Sp7M[J  
b
w*D!mm,  
17S<6
j#H5  
q|S,^0cU  
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表 -|( q9B  
3im2 `n  
序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 7-2,|(Xg  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 87.82% A1
/[3Bz  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 72.31% FcmL4^s.`  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 81.97% 7YQ689"J6B  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 77.33% Z8q*XpUH  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 83.87% e|Mw9DIW  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 83.83% e<-^  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 109.08% QR *{}`+l  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 86.36% vlx \hJ<I  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 84.67% 'jjJ[16"d  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 98.33% _NB8>v
  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 101.30% Rv@( [rn+  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 92.47% GdtR /1  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 132.32% !?J?R-C  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 89.73% A\T9>z^k  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 70.10% cDqj&
:$e  
.R{
+Pz D  
CQ^I;[=d  
   ?PDrj/: *  
9<6Hs3|.!  
jWJ/gv~ $  
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 %a$Fsn  
g0"KCX  
r!HB""w  
w"?E=RS  
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 0/0rWqg /  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 149.97% _~_6qTv-d  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 93.49% u}BN)%`B  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 125.70% }*R.>jQ+Y  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 136.89% wVY;)1?  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 90.84% ybgAyJ{J<  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 82.29% ~[9(}UM  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 106.38% E?3$ * t  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 88.14% lp%i%*EQ*  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 75.32% o;M-M(EZQ6  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 89.56% tx{tIw^2;  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 105.05% 3+| {O  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 72.94% >5}jM5$  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 124.27% |? l6S
 
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 78.19% 20p/p~<  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 75.27% 9dXtugp|  

关于油脂中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案的补充说明 W'-B)li  
/^i7^  
|jk"; h  
g03I<<|@  
1、  关于Cleanert MAS-PAE（c）的注意事项 k!>MZ  
S j)&!  
Cleanert MAS-PAE（c）采用多种吸附材料，可以去除蛋白质、色素、油脂（在样品中含量少）以及水等，只剩下邻苯二甲酸酯被以乙腈为主的溶剂提取出来，然后可以经过过滤直接进样检测。方法方便快捷，十分适合于快速检测。 lDnF(  
E Q-r  
随方法可以提供12mL和40mL透明玻璃瓶作为玻璃离心管，分别可配套10mL和50mL离心转子。 PP.QfY4  
"Up3W%]SB  
涡旋时一定要盖上玻璃离心管（上述玻璃瓶）的盖子，盖子的内壁是PTFE材料，不含增塑剂。 :,Q\!s!  
0hn N>?  
0+}42g|_Z  
h<f_Eoz-a  
2、  关于Cleanert PAE（c）方法原理的说明 s%2w&Us*  
JQj?+PI  
采用正己烷溶解或提取邻苯二甲酸酯，同时也会溶解油脂及少量其他杂质。一般来说， [ p$f)'  
o|*ao2a  
油脂中含有甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯、脂肪酸，以及甘油三酯氧化产物（多见于经过热加工的含有产品）。用正己烷提取，不仅利用了其优良的溶解脂类的性质，保证对邻苯二甲酸酯的充分提取，也避免了采用乙腈这样相对极性较强的溶剂进行提取时，引入更多的极性杂质和溶剂转换的繁琐。 n#Q;bSw  
>k"Z'9l  
笔者认为，邻苯二甲酸酯的化学性质十分类似于油脂，也是酯类化合物，其极性介于甘油三酯和其他成分之间，而尤其是邻苯二甲酸壬酯和甘油三酯的极性较为接近，给分离带来难题。同时，邻苯二甲酸酯的分子量又和甘油一酯、脂肪酸等接近，采用传统GPC处理，不仅所需时间长，同时也不能完全将邻苯二甲酸酯和甘油一酯、脂肪酸等分开。 s {p-c
V  
eRKuy l  
Cleanert PAE柱含有极性吸附填料和独特的GPC材料，利用其极性吸附的原理，可以从正己烷及乙酸乙酯：正己烷（1:1，v/v）的溶剂中去除极性杂质，如甘油一酯和脂肪酸等；同时独特的GPC材料可以使得大部分的甘油三酯在淋洗的时候即被正己烷淋洗下来。从而，可以去除大部分油脂成分。最终的洗脱液被吹干后，仅会剩下少量的甘油三酯。 0?8O9i  
_dky+ E  
需要说明的是，因为邻苯二甲酸酯的各种性质和油脂的成分过于接近，而且要检测的物质有16种之多，其性质分布范围宽，为了要保证每一种物质的回收率，很难将它们和油脂基质的多种组分彻底分开。 N DZ :`D  
18f!k  
不过，最后可以采用与甘油三酯不互溶的乙腈来反萃取，可以既保证邻苯二甲酸酯的回收率，又能去除剩余的大部分甘油三酯。反萃取的时候，采用超声会提高邻苯二甲酸酯的回收率。 *pK bMG#  
1O]'iS"  
    而Cleanert PAEc中增加了吸附色素及其他复杂成分的炭材料，可以保证更加彻底地去除杂质。 }^U7NZn<"  

;bq EfV0`2  
[U{RDX  
uJ,I6P~9  
ur k@v  
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下： `y.i(~^1  
jF5oc  
;fv/s]X86I  
PmDar<m  
1、样品提取方法： &MP8.(u `  

iLFhm4.PO  
1.1纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。 8V:yOq10  
j<i:rk|  
1.2其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。 v=+>ids  
B 6,X)  
=/HT e&  
?s: 2~Qlu  
2、固相萃取方法： BP@Lhii  
|Oe$)(`|h  
2.1若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下： rjT!S1Hs  
<' b%  
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化； 'I)E.DoF  
aAkO>X%[  
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中； ~r>
N  
KRP)y{~o  
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱； }U7><I  
'q=Ly?9  
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。 nc%ly *  
uCpk1d  
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。 [z`m`9Aq  
1PJ8O|Zt8  
2.2若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同2、1。 nA^UF_rD-  
l] o&D))R  
?k*s!YCZ  
bPtbU:G  
补充说明： !B{N:?r  
X+T +y>ea  
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。 j5;eSL@/  
t,K_!-HX+  
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。 u%=M
4| 7  
_S;L|1>S  
{'#^  
g^DPbpWxu  
k%Q>lf<e   

skn`Q>a  
TY3WP
$u  
VL/%D*  
rSVU|O3m;  
;Qc_Tf=,  
X, <n|zp  
`}^_>  
)MZQ\8,)]  

%K_ [Bx{B  
OIa=$l43C  
el*C8TWlw  
X#mppMU  
joh=0nk;D  
Y,kTk  
ui,#AZQ#{4  
&41=YnC6  
f#a ~av9rC  
MH`H[2<\!,  
BOLG#}sm  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS xGq,hCQHV  
"]ow1{  
色谱条件： \w !G  
is%qG?,P  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm dQR2!yHEq  
MX 2UYZ&  
进样口：250℃，不分流进样 AfG!(AF`  
h1Ca9Z_  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） cy)gN g  
nKJJ7'$'3  
进样量：1μL c
xdhG"  
W xyQA:3s  
流速：1 mL/min AG2iLictv  
<L@0w8i`  
wh:O
"&qk  
qx<`Kc4  
质谱条件： HHD4#XcU  
+I#5?  
接口温度：280℃ EVMhc"L  
eP-q[U?$n  
电离方式：EI HH3WZ^0>  
\pB"R$YZ6  
电离能量：70eV OC9_EP\"  
;"\e aKl  
溶剂延迟：7min `~[zIq:}7  
{j[[E/8N!y  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 LpJ\OI*v  
Ob?>zsx  
Eu\&}n`i
 
Rk5 6H  

序号	保留时间/min	中文名称	英文缩写	定量离子	辅助定量离子
1	8.351	邻苯二甲酸二甲酯	DMP	163	77
2	9.228	邻苯二甲酸二乙酯	DEP	149	177
3	11.018	邻苯二甲酸二异丁酯	DIBP	149	223
4	11.788	邻苯二甲酸二丁酯	DBP	149	223
5	12.135	邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯	DMEP	59	149、193
6	12.857	邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯	BMPP	149	251
7	13.231	邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯	DEEP	45	72
8	13.605	邻苯二甲酸二戊酯	DPP	149	237
9	15.805	邻苯二甲酸二己酯	DHXP	149	104、76
10	15.97	邻苯二甲酸丁基苄基酯	BBP	149	91
11	17.436	邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯	DBEP	149	223
12	18.108	邻苯二甲酸二环己酯	DCHP	149	167
13	18.345	邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯	DEHP	149	167
14	18.511	邻苯二甲酸二苯酯	—	225	77
15	20.785	邻苯二甲酸二正辛酯	DNOP	149	279
16	23.379	邻苯二甲酸二壬酯	DNP	149	57、71

|uQJMf[L)  
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