[重金属/有害元素]【分享】不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的系统解决方案 [复制链接]

附件一： :zPK  
0<NS1y  
] +W){W=ai  
Qz#By V:  
色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L） vZ"gCf3#?3  
M(LIF^'U:m  
流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50 ipbhjK$  
iaeNY;T  
流  速：1.0 mL/min AJxN9 [Z!N  
H>%AK'

'  
波  长：242 nm k'#3fz\  
h%ys::\zF  
进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm） /}8Au$nA  
<TtPwUX  
样  品：15种邻苯二甲酸酯 4A6Y \ZXI  
Pg(Y}Tu  
浓  度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A） PR:B6 F8  
[07E-TT2U  
溶  剂：正己烷 /40%流动相A f/UU{vX(  
ISs&1`Y  
柱  温：30℃ DX>LB$dy?  
@M4c/k}  
)LFbz#;Y  
;P)oKx
 
（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP） E0
+L?(;  
RxYENG]/6  
结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 zl:by?  
Rh^@1{yr  
附件二 <|_>r`@%l  
ZL<X*l2  
J Ha1lj  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS zFm`e:td  
)v_Wn[Y.H  
色谱条件： '=E;^' Rl  
LP#wE~K"b  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm (dSYb&]  
A)]&L`s  
进样口：250℃，不分流进样 1<_][u@  
,:(s=JN+  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） qK.( wFx  
C`;igg$t_  
进样量：1μL %oa@2qJ^  
JGHj(0j  
流速：1 mL/min 7o+L  
/";tkad^  
质谱条件： }X{rE|@  
8C3oi&av/{  
接口温度：280℃ 5]dlD #  
7e+C5W*9b  
电离方式：EI TbD  
nu\ AEFT  
电离能量：70eV N 0S^{j,i  
=O
O4C  
溶剂延迟：7min htbE Q NW  
p48enH8CO  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 P0}B&B/a:  
?:$ q~[LY  

];w}?LFb   序号 jr)M],	kfnh1|D=aY   保留时间/min '=$`N G8l	qj~=qV0p   中文名称 y]yl7g =~	=i vlS   英文缩写 ^Saf z8-3o	GPLop/6    SIM离子 X:s~w#>R
=,zB|sjn   1 "T=j\/Q	]^"Lc~w8&   8.265 M#4;y,n<k	\r:*`Z*y   邻苯二甲酸二甲酯 ~v(c9I)	n`Z}tQ%)o   DMP b|AjB:G	!IR cv a   163、77 S6M7^_B4F
(.=Y_g .   2 U<&=pv	\\ItN   9.135 s/@uGC0>	>QYx9`x&   邻苯二甲酸二乙酯 >[wxZ5))	Q0"?TSY   DEP JJ1>)S}X-	j.6!T'$|   149、177 GmNC w5F
afHRy:<+%   3 X,+a 6F	fr`#s\JKw   10.888 <=_!8A	^! h3#4   邻苯二甲酸二异丁酯 00IW9B-	.n_Z0&i/w   DIBP mEYfsO	0x5\{f   149、223 lE% KzX?&
0?t;3z$n   4 \kV|S=~@	oR`rs[Kj   11.637 "D>/#cY1/	\s)$ AF   邻苯二甲酸二丁酯 +68age;dM	z@ZI$.w   DBP 1Hhr6T^)	wAu]U6!   149、223 L$"x*2[A
%@ >^JTkY8   5 +>eX1WoTy	R)N^j'R~=   11.979 =Gj~:|;$	&)Zv>P8z`   邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 z*b|N45O	Exv!!0Cd^   DMEP /_expSPHl	GU1 c Me   59、149、193 FncP,F$8 
;InMgo,   6 ZF#lh]	UWqX}T[^   12.72 mo4F\$2N	ghkV^ [   邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 &F;bg	$ %&OaAg   BMPP C[ KMaB	*U\`HUW   149、251 aAd1[?&
NYxL7:9   7 %bdBg	e!w{ap8u   13.044 hDoFF8)c	 c&<Ei1   邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 RA+M.	G_k_qP^:   DEEP 931GJA~g	66MUrNW   45、72 * +6Z^7
lEQj62zIQ   8 [ 'B u	{?cF2K#   13.41 d7Cs a c	|@'K] $vZ*   邻苯二甲酸二戊酯 8|!"CQJ|H	^7:UC\_   DPP r. rzU	:pvVm>   149、237  9zLeyw\
&EC8{.7   9 ?|Wxqo	]4FAbY2'h   15.552 W6u(+P]("	@JJ{\?>   邻苯二甲酸二己酯 NR^3 1&}It	iqWkhJphv   DHXP ++|e z{	sei%QE]!/   104、149、76 l5enlYH
C5X!H_p   10 ndvt $*	*4Z! 5iOs   15.694 8&7zV:= 	LS<*5HWX   邻苯二甲酸丁基苄基酯 "(p&Oz	+rDKx(Rk   BBP y@ c[S;	]1q`N7   149、91 lQ2vQz-J
h9&0"LHr   11 UrdSo"%	uLt31G()   17.153 NLev(B:OQH	z'Ut9u   邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 ql_,U8Jw	`bNLmTS   DBEP jq(rnbV	wqJ1^>TB   149、223 dF+:9iiAm
M{X; H'2   12 ^B(:Hv}G(:	xp]_>WGq   17.81 W'5c%SI	(l)r. Vj   邻苯二甲酸二环己酯 Az6tu <	|p*s:*TJp   DCHP y+M9{[ i/O	35~1$uRA   149、167 v.>95|8
@5cY5e*i{   13 mz3Dt>	:Mq{ES%   18.056 !Gh*Vtd8-	p u[S   邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DP!~WkU~	{A{sRT=%   DEHP R- 1C# R[	_i2k$Nr   149、167 G`,M?lmL
VB}^&{t)!   14 Ko %e#q-	$)VnHr `hy   20.444 8l >Xbz	4Xe8j55   邻苯二甲酸二正辛酯 I"HA( +G	?~tx@k$;Es   DNOP #:tC^7qk	O+ xzM[[   149、279 f;obK~b[
9~4@AGL   15 Y {|is2M9'	}z-6,i)'k   22.98 ;e6-*	!JA//{?   邻苯二甲酸二壬酯 -v$ q8_$m"	5.QY{+k   DNP gB]jLe	u]&+TR   57、149、71 gpogv -

结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 T 1_B0H2  
BwGOn)KL  
附件三 cfRUVe  
3orL;(.G  
P}(c0/  
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 &;p}HL,  
6@3v+Vf'  
6ecx!u
c$  
gg8)oc+w  
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表 ~l.C
-  
Evqy e;  
序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 ?iEn~9WCS  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 87.82% 4:733Q3oK  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 72.31% VS>hi~j  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 81.97% w(X
}  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 77.33% + 65<|0  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 83.87% gp~-n7'~O  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 83.83% !{ _:k%B  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 109.08% LWSy"Cs *  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 86.36% $P#+Y,r~\  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 84.67% +W8#]u|  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 98.33% I$)9T^Ra  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 101.30% iEy2z+/"^  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 92.47% QfM^J5j.M?  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 132.32% ~x_(v,NW  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 89.73% C:bA:O  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 70.10% m9jjKu]|  
wLt0Fq6QG  
VeQ [A?pER  
   L]BTX]  
6O 2sa-{d  
9jl\H6JY|  
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 N5k9o:2  
8-b~p  
HJ!)&xT  
Ww{-(Ktx  
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 FOcDBCrOe  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 149.97% EVbDI yFn  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 93.49% >rh<%55P`  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 125.70% uQWd`7  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 136.89% hDEZq>&  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 90.84% [@s5v  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 82.29%  a6
op  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 106.38% 6AmFl<  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 88.14% s|"4!{I t  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 75.32% HYg7B  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 89.56% lHPhZ(Z  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 105.05% zU};|Zw  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 72.94%  .O.fD  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 124.27% vYG
$>*  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 78.19% :SpPT  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 75.27% Qp>Q-+e0  

关于油脂中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案的补充说明 QE*O~Yj  
mI
gc)"  
8+K=3=05#U  
NC'+-P'y  
1、  关于Cleanert MAS-PAE（c）的注意事项 huFT_z_;;  
?,
uTH 4  
Cleanert MAS-PAE（c）采用多种吸附材料，可以去除蛋白质、色素、油脂（在样品中含量少）以及水等，只剩下邻苯二甲酸酯被以乙腈为主的溶剂提取出来，然后可以经过过滤直接进样检测。方法方便快捷，十分适合于快速检测。 07 [%RG  
CZ*#FY  
随方法可以提供12mL和40mL透明玻璃瓶作为玻璃离心管，分别可配套10mL和50mL离心转子。 XCr\Y`,Z@  
yN}upYxp  
涡旋时一定要盖上玻璃离心管（上述玻璃瓶）的盖子，盖子的内壁是PTFE材料，不含增塑剂。 eD5:0;X2  
"c5C0 pK0  
aDEz|>q  
5@l[!Jl0k  
2、  关于Cleanert PAE（c）方法原理的说明 MO}J  
74f3a|vx/  
采用正己烷溶解或提取邻苯二甲酸酯，同时也会溶解油脂及少量其他杂质。一般来说， 5'iJN$7  
:eIPPh|\  
油脂中含有甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯、脂肪酸，以及甘油三酯氧化产物（多见于经过热加工的含有产品）。用正己烷提取，不仅利用了其优良的溶解脂类的性质，保证对邻苯二甲酸酯的充分提取，也避免了采用乙腈这样相对极性较强的溶剂进行提取时，引入更多的极性杂质和溶剂转换的繁琐。 fzcPi9+  
55lL aus  
笔者认为，邻苯二甲酸酯的化学性质十分类似于油脂，也是酯类化合物，其极性介于甘油三酯和其他成分之间，而尤其是邻苯二甲酸壬酯和甘油三酯的极性较为接近，给分离带来难题。同时，邻苯二甲酸酯的分子量又和甘油一酯、脂肪酸等接近，采用传统GPC处理，不仅所需时间长，同时也不能完全将邻苯二甲酸酯和甘油一酯、脂肪酸等分开。 0u0<)gdX  
KKMzhvf]#  
Cleanert PAE柱含有极性吸附填料和独特的GPC材料，利用其极性吸附的原理，可以从正己烷及乙酸乙酯：正己烷（1:1，v/v）的溶剂中去除极性杂质，如甘油一酯和脂肪酸等；同时独特的GPC材料可以使得大部分的甘油三酯在淋洗的时候即被正己烷淋洗下来。从而，可以去除大部分油脂成分。最终的洗脱液被吹干后，仅会剩下少量的甘油三酯。 n =SY66   
"F_o%!l  
需要说明的是，因为邻苯二甲酸酯的各种性质和油脂的成分过于接近，而且要检测的物质有16种之多，其性质分布范围宽，为了要保证每一种物质的回收率，很难将它们和油脂基质的多种组分彻底分开。 *qx<bY@F  
oL?[9aww  
不过，最后可以采用与甘油三酯不互溶的乙腈来反萃取，可以既保证邻苯二甲酸酯的回收率，又能去除剩余的大部分甘油三酯。反萃取的时候，采用超声会提高邻苯二甲酸酯的回收率。 [>`[1;aX  
In
1VW|4h  
    而Cleanert PAEc中增加了吸附色素及其他复杂成分的炭材料，可以保证更加彻底地去除杂质。 OBF3)L]  

r(TIw%L$  
Jq-]7N%k/  
W:2( .?  
)D7m,Wi+  
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下： lukB8  
By!o3}~g  
&DX! f  
xJ]
\+ 50  
1、样品提取方法： @
Cyvf5|bL  
sY&IquK^  
1.1纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。 |0b`fOS  
e
 X|m  
1.2其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。 ]w8(&,PP  
^jZbo{  
LU%E:i|  
+a+Om73B2  
2、固相萃取方法： @RKryY)  
]{@-HTt  
2.1若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下： sUQ@7sTj  
bq*eH (qx  
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化； NZ0;5xGR  
W^l-Y%a/o  
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中； -FaJ^CN~  
8&slu{M- t  
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱； (O3nL.  
Ad_hKO  
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。 Rima;9.Y0  
i8]S:49  
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。 *$g-:ILRuZ  
( a#BV}=  
2.2若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同2、1。 Q*Pq{]0K  
}qD\0+`qi  
Y}wyw8g/  
I; rGD^  
补充说明： S?2
>Er  
]D\D~!R  
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。 'm$L Ij?@  
r9?Mw06Wc5  
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。 |2A:eI8 ^  
"3J}b?u_[  
oQJtUP%  
4_ML ],.  
5[0?g@aO  
wC'Szni  
(/$^uWj  
1|:KQl2q  
*0ro0Z|Iq  
|w3M7;~eF  

B33\?Yj)  
lU]nd[x  
F"mmLao  
!()Qm,1u  
B)U Z`?>c  
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[T  
\{D" !e  
=EsavN  
M3au{6y  
2KZneS`  
1.>m@
Slr>  
qxj(p o  
jiC>
d@~y  
`H+lPM66  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS y_[vr:s5pG  
 AOx[  
色谱条件： fB,_9K5i  
~Q VH<`sn  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm 
T]$U""  
BJ0?kX@  
进样口：250℃，不分流进样 DV{=n C  
,+ ~W4<f  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） nj4 /#W  
tnIX:6  
进样量：1μL j|Q-*]V
 
w#J2 wS  
流速：1 mL/min K+iP6B   
(iGTACoF  
.sA.C]f  
 z$Qbj   
质谱条件： B\n[.(].r  
P>6{&(  
接口温度：280℃ FgI3   
(I}v[W  
电离方式：EI !VK
|u8i
 
|D
.ND%K&  
电离能量：70eV u-C)v*#L  
Xry47a )  
溶剂延迟：7min G#1GXFDO{  
v.ui
!|c  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 Q5_o/wk  
6`-jPR  
Ic4H#w  
k $7Jj-+~  

序号	保留时间/min	中文名称	英文缩写	定量离子	辅助定量离子
1	8.351	邻苯二甲酸二甲酯	DMP	163	77
2	9.228	邻苯二甲酸二乙酯	DEP	149	177
3	11.018	邻苯二甲酸二异丁酯	DIBP	149	223
4	11.788	邻苯二甲酸二丁酯	DBP	149	223
5	12.135	邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯	DMEP	59	149、193
6	12.857	邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯	BMPP	149	251
7	13.231	邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯	DEEP	45	72
8	13.605	邻苯二甲酸二戊酯	DPP	149	237
9	15.805	邻苯二甲酸二己酯	DHXP	149	104、76
10	15.97	邻苯二甲酸丁基苄基酯	BBP	149	91
11	17.436	邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯	DBEP	149	223
12	18.108	邻苯二甲酸二环己酯	DCHP	149	167
13	18.345	邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯	DEHP	149	167
14	18.511	邻苯二甲酸二苯酯	—	225	77
15	20.785	邻苯二甲酸二正辛酯	DNOP	149	279
16	23.379	邻苯二甲酸二壬酯	DNP	149	57、71

:a)u&g@G  
2 Vrw  
ofv)SCjd  

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