[重金属/有害元素]【分享】不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的系统解决方案 [复制链接]

附件一： GYO"1PM  
/FY_LM  
L\I/2aiE  
F
44")fY  
色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L） sXA=KD8  
KMa?2cJH#  
流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50 nm..$QL  
!WNr09`  
流  速：1.0 mL/min ~9=g"v  
LvS`  
波  长：242 nm A#}IbcZ|b  
r?{tBju^  
进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm） [1Rs~T"  
92EvCtf  
样  品：15种邻苯二甲酸酯 b@Fa|>"_  
=Z2sQQVS  
浓  度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A） ,Ao8QN  
4q2aVm  
溶  剂：正己烷 /40%流动相A f -bVcWI  
$%LjIeVA5  
柱  温：30℃ -YD6  
wJ i
p{  
m8 .sHw  
aB.`'d)V  
（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP） A#*0mJ8IK  
'~2;WF0h  
结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 bmFnsqo  
6s@'z<Ct  
附件二 lUbQ@7a<'  
crG+BFi
 
pbt
/i+!  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS >d%;+2  
A@^Y2:pY  
色谱条件： gZ8n[zxf6  
T*e>_\Tx  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm R9%Um6  
RsU!mYs:H  
进样口：250℃，不分流进样 gJz~~g'  
ruiAEC<Ej  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） av~dH=&=  
4AA3D!$  
进样量：1μL &b~if}vcb  
,z8<[Q-#  
流速：1 mL/min =GGt:3Kx-  
fZ8at  
质谱条件： &\[3m^L  
(`nn\)  
接口温度：280℃ AC'$~4  
60*;a*cy  
电离方式：EI iobL6SUZ  
~i3/Ec0\  
电离能量：70eV *cNqgw#\qL  
JYQ.Y!X1O  
溶剂延迟：7min N9lCbtn(0x  
mn5
"kYy?
 
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 +@ '(N  
Ib$*w)4:  

M!KHBr   序号 /hC[>t<	\ow3_^Bk   保留时间/min '/Y D$*,	H,/|pP.   中文名称 &) '5_#S	VxlK:*t`   英文缩写 UKIDFDn6_	9t`Z_HwdCb   SIM离子 n@3(bl 5{
IEi E6z]L(   1 ~:65e 8K	:z;}:+7n   8.265 1wx& /#a	{ gSR49!Q   邻苯二甲酸二甲酯 T>"GH M	ELF,T(   DMP tDuQ+|~M	)~hsd+ 0t   163、77 7=.}484>J
)N{Qpbh   2 .uAOk0^z	*+p9u 1B5   9.135 ~r B eJZ	Q+ ;6\.#r   邻苯二甲酸二乙酯 )Cuc]>SC	C\7qAR\   DEP ffGiNXCM	qyMR 0ai-   149、177 &Y"u*)bm
be`\O   3 R9gK>}>Y	xW*L^97 ;   10.888 ;4of7d	0_Tr>hz   邻苯二甲酸二异丁酯 i '|rx2]e	*M;!{)m?   DIBP Oqeoh<y!\	*+h2,Z('a   149、223 +`l>_u'
 q%,q"WU   4 ~p<o":k+Lv	F>E'/r*   11.637 Epsc2TuH7	XHcT7}]   邻苯二甲酸二丁酯 F`-|@k	}5-^:}gL   DBP F)g.CDQ!c	wmdv AMN   149、223 B'>(kZYMs
U`sybtuBP'   5 4tU3+e5h	A$.woE@   11.979 6T0[ ~@g5	kb{h`   邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 4HEp}Y"}V	I@~hz%'   DMEP ^;4nHH7z-,	SFAh(+t   59、149、193 BtDi $d%'
+~mBo+ ,   6 N4Yvt& 	Ga0= G&/   12.72 \NwL#bQ~	7Fb |~In<Z   邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 [P`t8	AA34JVm]   BMPP fhlhlOg	(5S(CYls   149、251 ]l.y/pRP5[
g,/gApa   7 AK%2#}k.	z;`o>Ja2   13.044 M;*f(JY$	)+ T\LU   邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯  mD` v>L	td{M%D,R"   DEEP Yg@k+	U6V+jD}L]   45、72 o>lk+Q#L @
#T_m|LN7   8 6}bUX_!&s	mD@#,B7A   13.41 <:=}1t.Z	.{U@Hva_K   邻苯二甲酸二戊酯 /.!ytHw8	U1zcJl^   DPP V2-fJ!	<)01]lKH   149、237 $-4OveS~B
$ {29[hO   9 f0UB? |	')]K&   15.552 ~loJYq'y	$#|iKi<Y@j   邻苯二甲酸二己酯 jSLC L'	i-6,r[<   DHXP @y3u'Y,B	)"Ef* /+   104、149、76 TQ-V61<5
:z=C    10 Y\CR*om!W	D%PrwfR   15.694 TDvUiJm	< 0S+[7S"   邻苯二甲酸丁基苄基酯 UkO  L7M	- v\n0Jt   BBP aSu6SU	< 5%:/j   149、91 RbexsBq
P[;<,U;'HO   11 l4 @	:>@6\   17.153 x1g0_&F	z_)`='&n   邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 4#pn]	;7Hse^Oc   DBEP `v]|x,l+C	+ [ +4h}?   149、223 G5C=p:o{/
vG`;2laY   12 9n(.v}	mz|#K7:   17.81 EWI2qaSnO	\yQs[l%J   邻苯二甲酸二环己酯 !Vtj:2PQL	kjS9?>i   DCHP g>@T5&1q *	K!L0|WH%!   149、167 *bOgRM[
j'2:z#   13 Hzn6H4Rc	p7Q}xx   18.056 eeOE\	}$5e!t_K   邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 ?'jRUfl 	UHaY|I${U   DEHP v}>5!*	9 M< 3m   149、167 !#b8QER
c]OK)i-{l   14 m7n8{J1O2	&>KZ4%&?   20.444 Q=}U	)r +o51gp   邻苯二甲酸二正辛酯 \ld{Z;e	IFd2r;W8   DNOP O>~ozW&	LNU#NJ^Axt   149、279 NR@n%p
X61p xPa   15 ^@a|s Sb	CKau\N7T   22.98 #383W)n	D$OUy}[2`.   邻苯二甲酸二壬酯 CPj8`kl	{G^f/%   DNP pMy];9SvW	~$ Fg iW   57、149、71 btZ9JZvMx

结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 %)|_&Rh  
mHnHB.OL  
附件三 U'Xw'?Uj  
T9N&Nh7 3  
pO;BX5(x  
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 -d|VXD5N  
d+6 by,'  
_QhB0/C  
iTt#%Fs)4M  
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表 =t+{)d.w  
2WA =U]  
序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 =h083|y>  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 87.82% =uYz4IDB  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 72.31% cI5*`LML1  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 81.97% Kp|#04]  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 77.33% '.@'^80iQ  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 83.87% [n`SXBi+n  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 83.83% !U,^+"l'GP  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 109.08% m_%1IJ  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 86.36% + *YGsM`E9  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 84.67% '~-Lxvf'  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 98.33% &FWPb#  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 101.30% ;Yrg4/
Ipa  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 92.47% c<V.\y0x  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 132.32% XpzdvR1  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 89.73% *G^n<p$"  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 70.10% ?Z@FxW  
%/dYSC  
e~r%8.Wm  
   B$k<F8!%  
9?r|Y@xh]  
)5lo^Qb  
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 b r)oSw  
2 [a#wz'  
@.fuR#  
SN|EWe^  
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 ]
]$s"F<  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 149.97% ~oI7T
P  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 93.49% w!)B\l^+c  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 125.70% *52*I
RH  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 136.89% $b\`N2J-_  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 90.84% ;A~S){  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 82.29% A1@
tp/L=o  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 106.38% zcD&xoL\H  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 88.14% 5+b[-Daz  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 75.32% VYkOJAEBg  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 89.56% E#r6e+e1Q%  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 105.05% =v=
a:e  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 72.94% G>&=rmK"  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 124.27% n;Tpf<*U  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 78.19% H1 rge<  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 75.27% 4.7OX&L'G  

关于油脂中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案的补充说明 [1{#a
{4  
Pd-0u>k  
m(Ghe2T:  
sevaNs  
1、  关于Cleanert MAS-PAE（c）的注意事项 =#)Zm?[;  
;/gH6Z?  
Cleanert MAS-PAE（c）采用多种吸附材料，可以去除蛋白质、色素、油脂（在样品中含量少）以及水等，只剩下邻苯二甲酸酯被以乙腈为主的溶剂提取出来，然后可以经过过滤直接进样检测。方法方便快捷，十分适合于快速检测。 WrvSYqN  
YC!Tgb~H  
随方法可以提供12mL和40mL透明玻璃瓶作为玻璃离心管，分别可配套10mL和50mL离心转子。 -I."= c%  
/G)Y~1ASA%  
涡旋时一定要盖上玻璃离心管（上述玻璃瓶）的盖子，盖子的内壁是PTFE材料，不含增塑剂。 EHpIbj;n  
x3ds{Z$,>(  
xj6ht/qq  
",wv*z)_>  
2、  关于Cleanert PAE（c）方法原理的说明 kmHIU}Z  
R.n:W;^`  
采用正己烷溶解或提取邻苯二甲酸酯，同时也会溶解油脂及少量其他杂质。一般来说， Z"spu a5  
O
cR6\t'  
油脂中含有甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯、脂肪酸，以及甘油三酯氧化产物（多见于经过热加工的含有产品）。用正己烷提取，不仅利用了其优良的溶解脂类的性质，保证对邻苯二甲酸酯的充分提取，也避免了采用乙腈这样相对极性较强的溶剂进行提取时，引入更多的极性杂质和溶剂转换的繁琐。
T\;7'  
,S"a ,}8  
笔者认为，邻苯二甲酸酯的化学性质十分类似于油脂，也是酯类化合物，其极性介于甘油三酯和其他成分之间，而尤其是邻苯二甲酸壬酯和甘油三酯的极性较为接近，给分离带来难题。同时，邻苯二甲酸酯的分子量又和甘油一酯、脂肪酸等接近，采用传统GPC处理，不仅所需时间长，同时也不能完全将邻苯二甲酸酯和甘油一酯、脂肪酸等分开。 nNbOq[  
Y{c_5YYf  
Cleanert PAE柱含有极性吸附填料和独特的GPC材料，利用其极性吸附的原理，可以从正己烷及乙酸乙酯：正己烷（1:1，v/v）的溶剂中去除极性杂质，如甘油一酯和脂肪酸等；同时独特的GPC材料可以使得大部分的甘油三酯在淋洗的时候即被正己烷淋洗下来。从而，可以去除大部分油脂成分。最终的洗脱液被吹干后，仅会剩下少量的甘油三酯。 J:s^F n  
EW;R^?Z  
需要说明的是，因为邻苯二甲酸酯的各种性质和油脂的成分过于接近，而且要检测的物质有16种之多，其性质分布范围宽，为了要保证每一种物质的回收率，很难将它们和油脂基质的多种组分彻底分开。 _`6fGu& W  
*#ccz  
不过，最后可以采用与甘油三酯不互溶的乙腈来反萃取，可以既保证邻苯二甲酸酯的回收率，又能去除剩余的大部分甘油三酯。反萃取的时候，采用超声会提高邻苯二甲酸酯的回收率。 "Mt4
~vy  
S $wx>715  
    而Cleanert PAEc中增加了吸附色素及其他复杂成分的炭材料，可以保证更加彻底地去除杂质。 py9zDWk~  

da[u@eNrnX  
pX:FXzYQ  
%G<!&E!0h  
.oJs"=h:m  
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下： CWVCYm@!kz  
FT1h\K|a  
pr|P#mc"J  
>A$J5B>d  
1、样品提取方法： XIu3n9g^#  
1@nGD<,.  
1.1纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。 8?GS:+  
|5wuYG  
1.2其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。 D!. r$i)  
.(Gq9m[~8H  
Ojkbv  
kO:iA0KUX  
2、固相萃取方法： g1Q ^x/  
T/ CI?sn  
2.1若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下： A#W%ud4  
R|T_9/#)  
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化； XelY?Ph,,  
R>"E Xq  
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中； (lhbH]I  
fW Vd[zuD4  
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱； Eb`U^*A  
?op6_a-wm  
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。 =6t)-53  
Wig
C'  
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。 XF1x*zc  
93%U;0w[Nw  
2.2若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同2、1。 .J3
lo:  
ZD1UMB0$4  
!!ZNemXct$  
5gg_c?Vh/  
补充说明： >R/^|hnJ  
+ )?1F  
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。  o@_p V  
x+(h#+F  
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。 7t\W{y  
'DlY8rEGP  
p^+k:E>U  
Py6c=&*  
/ocd
AW`0  
?gjM]Ki%:  
~=P&wBnJ  
zt!mx{l
'  
[i.2lt#]  
UaCEh?D +Y  
4x
U[oaa  
V@<tIui$  
@
!^c@  
3> -/sii  
.Xh^L  
Afo(! v  
}S3m wp<Y  
wH~Q4)#=o  
<r.f ?chf  
Skl1 %`  
<WtX> \]l(  
/K<Xr[z~y  
:51Q~5
k4  
lh3%2Dq$  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS pNr3u   
eI; %/6#  
色谱条件： <^|8
\<J  
jwyJ=W-  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm {_|~G|Z  
0FsGqFt  
进样口：250℃，不分流进样 J:)Q)MT24:  
1\{0
z3P  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） yAG4W[  
j\f;zb?F  
进样量：1μL K=M5d^K<E  
6gY5v@!w  
流速：1 mL/min 0!o&=Qh  
LR]P?  
>& RpfE[  
-OZXl  
质谱条件： w
'~f Z*  
;:vbOG#aSN  
接口温度：280℃ 25t2tj@S  
&48wa^d  
电离方式：EI aRdk^|}  
U PGS  
电离能量：70eV 0diQfu)Fi  
G?&0Z++  
溶剂延迟：7min Eh#W*Bg  
M-,vX15S  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 ce.'STm=  
_S{HVc  
{kD|8["Ie'  
l6:k|hrm;  

序号	保留时间/min	中文名称	英文缩写	定量离子	辅助定量离子
1	8.351	邻苯二甲酸二甲酯	DMP	163	77
2	9.228	邻苯二甲酸二乙酯	DEP	149	177
3	11.018	邻苯二甲酸二异丁酯	DIBP	149	223
4	11.788	邻苯二甲酸二丁酯	DBP	149	223
5	12.135	邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯	DMEP	59	149、193
6	12.857	邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯	BMPP	149	251
7	13.231	邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯	DEEP	45	72
8	13.605	邻苯二甲酸二戊酯	DPP	149	237
9	15.805	邻苯二甲酸二己酯	DHXP	149	104、76
10	15.97	邻苯二甲酸丁基苄基酯	BBP	149	91
11	17.436	邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯	DBEP	149	223
12	18.108	邻苯二甲酸二环己酯	DCHP	149	167
13	18.345	邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯	DEHP	149	167
14	18.511	邻苯二甲酸二苯酯	—	225	77
15	20.785	邻苯二甲酸二正辛酯	DNOP	149	279
16	23.379	邻苯二甲酸二壬酯	DNP	149	57、71

_=3H!b =  
zC(DigN  
wWko9h=|mQ  
eVjr/nm