一、实验目的 LYuMR,7E 建立白酒中塑化剂的前处理和检测方法,使用Cleanert DEHP(500mg/6mL,玻璃柱)富集白酒这类极性基质中的邻苯二甲酸酯类物质,建立固相萃取方法,以期得到优良的加标回收率,保证检测结果的准确性。 82YZN5S3]3 )%q )!x 二、仪器及材料 L,
3%}_ 材料:白酒;纯化水,16种邻苯二甲酸酯(PAEs)混标1ppm;Cleanert DEHP(500mg/6mL,玻璃柱管);玻璃移液管;洗耳球;烧杯 Me-H'Mp~ 仪器:Agilent GC/MS 7890-5075c,Agilent HPLC1200,氮吹仪 H284
]i 5ZjM:wrF| 三、实验过程 Cdc=1,U( 注意事项:实验过程中,试剂及容器必须为玻璃,尽量避免接触塑料制品。 `o%Ua0x2 甲醇和乙酸乙酯必须是进口色谱纯。
wTn" 3.1 溶液配制 lsOZ%p%fV (1)将白酒用去离子水稀释,使其中的乙醇的含量为5%。
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例如:某种白酒含酒精52%,那么取9.6mL白酒,用去离子水稀释定容至100mL,即可得5%的酒精含量的样品液。 SI;SnF'[7 (2)取1mL甲醇加入19mL去离子水,混匀,得到5%甲醇水溶液,为淋洗液。 &uxwz@RC0 3.2 固相萃取 XD|vB+j\O 活化:用玻璃移液管分别取5mL乙酸乙酯、5mL甲醇,5mL水,在重力状态下依次过柱; B1 [O9 U: 上样:用玻璃移液管取100mL样品液加到柱上; S)*!jI 淋洗:用玻璃移液管取5mL 5%甲醇/水溶液淋洗固相萃取柱。 J/ ^|Y6 淋洗结束之后,开启真空泵,抽20min,抽干之后,加入2mL甲醇浸泡柱床约1min; @W*Zrc1NF 洗脱:用10mL乙酸乙酯洗脱固相萃取柱,收集洗脱液。 2~SjRIp Uw 将洗脱液分别于35℃氮吹至干,用1mL甲醇定容,将溶液转移至进样样品瓶,进行GC/MS或HPLC检测,具体检测方法参见附录1及附录2。 Q2ky| S t0AV.N1 四、实验结果及结果分析 2j7e@pr 取2份10mL含5%酒精的白酒样品溶液,各加入1ppm邻苯二甲酸酯类混标100μL,按照上述方法进行操作和GC/MS检测,得到的色谱图见图1,回收率数据见表1. \i$WXW]| 4.1 实验谱图图1加标样品洗脱液色谱图(定容浓度为100ppb)
}w8:`g'T0/ 4.2 实验数据 {9C+=v?
表1 回收率数据
_P*<T6\J> T5+iX`#M 注意:邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二丁酯是使用非常普遍的增塑剂,广泛的存在于环境中,因而测试时十分容易造成背景过高的干扰问题。尤其需要注意的是氮吹时,使用的氮吹仪,应该是专用的仪器,而且必须定期用进口色谱纯的乙酸乙酯清洗氮吹的针头。 4_w+NI
,; 附录1 GC/MS法检测16种邻苯二甲酸酯类化合物
Z:PsQ~M 仪器:Agilent 7890/5975c GC/MS $G5;y> d= -/'_' 色谱条件: 007SA6xq >}*iQq 色谱柱:DA-5MS(30m*0.25mm*0.25μm)(订货号:1525-3002);进样口:250℃,不分流进样; / ` 7p'i 进样量:1μL;程序升温:50℃(1min)20℃/min 220℃(1min)5℃/min 280℃(4min); Jk)^6 流速:1 mL/min。质谱条件: ?[\(i)] Mlp[xk| 接口温度:280℃;电离方式:EI; mlR*S<Z 电离能量:70eV;溶剂延迟:7min; <aR8fU 监测方式:SIM模式,监测离子见表2。 dFF [2
表2 16种邻苯二甲酸酯类化合物定量离子及定性离子
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JO 图2 100ppb标样色谱图 /a\6&Eb
表3 16种邻苯二甲酸酯类化合物GC/MS检测标准曲线表
KvC`6 nZa.3/7dJ 结论:Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离16种邻苯二甲酸酯类物质,完全满足16种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限,笔者手头上只有16种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。 I|JMkP 附件2 HPLC法检测16种邻苯二甲酸酯类化合物 yc2c{<Ya5
色谱柱:Agela Venusil XBP C18-L ,4.6×250mm,5µm,150Å流动相:A:水,B:甲醇:乙腈=50:50
U7.3`qd"
表4 梯度洗脱表
流 速:1.0 mL/min
波 长:242 nm
进样量:5 µL(100ppm),50µL(10ppm)
样 品:16种邻苯二甲酸酯
浓 度:100 ppm(正己烷),10 ppm(40%流动相A)
溶 剂:正己烷 /40%流动相A
柱 温:30℃
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图3 16种邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度:25ppm)
s<[%76Y! (邻苯二甲酸二甲酯DMP,邻苯二甲酸二乙酯DEP,邻苯二甲酸二正丁酯DBP,邻苯二甲酸二辛酯DNOP,邻苯二甲酸二苯酯,邻苯二甲酸丁苄酯BBP,邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯DEHP,邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯DMEP,邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP,邻苯二甲酸二戊酯DPP,邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯BMPP,邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP,邻苯二甲酸二环己酯DCHP,邻苯二甲酸二异丁酯DIBP,邻苯二甲酸二己酯DNP,邻苯二甲酸二壬酯DINP)
)y(pd 表5 16种邻苯二甲酸酯类化合物HPLC检测标准曲线表
结论:Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离16种邻苯二甲酸酯类物质,分离度较好,完全满足LC检测16种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限,笔者手头上只有16种邻苯二甲酸酯物质,所做实验,供大家参考。