1 仪器及材料 |J}~a8o 仪器:Agilent GC-MS 7890-5975c;涡旋混合器;氮吹仪; G#%
=R`k/ 玻璃器皿:10mL样品瓶;容量瓶;进样样品瓶;带刻度试管。 -`?V8OwY] 材料及试剂:氨基甲酸乙酯专用净化柱;氨基甲酸乙酯标准品;PTFE滤膜;二氯甲烷、甲醇均为色谱纯;无水硫酸钠(经600度煅烧)。 orU4{.e 2 标准溶液配制 Y66 vJ<lM 准确称取约0.1g(精确至0.0001g)氨基甲酸乙酯标准品于100mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,得到标准储备液。用甲醇逐级稀释储备液,得到20、10、5、1、0.1、0.05(单位为μg/mL)标准溶液,用于绘制标准曲线。同时稀释得到标准工作液0.4LINK1">
μg/mL、4μg/mL、40μg/mL,用于进行加标回收率实验。 jN {ED_ 3 GC-MS操作条件
b'Uaj`Sn 3.1 GC条件 $K
G?d>wx 毛细柱DA-INOWAX(30m*0.25mm*0.25um);进样口温度230℃;载气:高纯氦气;流速1ml/min;程序升温:60℃(5min)3.5℃/min 150;不分流进样,进样量1μL。 5g&'n 3.2 MS条件 (Pu*[STTT 接口温度:240℃,电离方式:EI,电子能量:70eV,离子源温度:230℃,四级杆温度:150℃;扫描模式:SIM模式,监测离子:62,74,89,其中定量离子为62. $Y4
Ao-@ 4 样品处理 HxM-VK ' 4.1 黄酒加标样品 W.CIyGK 称取2g黄酒于10mL样品瓶中,加入标准工作液50μL,涡旋混合均匀,将样品载入到净化柱上,静置10min以保证黄酒样品和填料充分湿润。然后用12mL二氯甲烷洗脱,用流速调节阀控制流速为2 mL/min左右,用带刻度试管收集洗脱液,将洗脱液在30℃下氮吹至1mL(若体积小于1mL可以用二氯甲烷定容至1mL),加入少量无水硫酸钠,静置5min,用PTFE滤膜进行过滤,收集,取少量入进样样品瓶,待测。 . }1!MK5 4.2 黄酒样品 !kz\
{ 称取2g黄酒,将样品载入到净化柱上,往下操作步骤同4.1(将样品载入到净化柱上,静置……)。 x-W0 h 4.3 空白样品 r:o!w7C:a 称取2g去离子水,将样品载入到净化柱上,往下操作步骤同4.1(将样品载入到净化柱上,静置……)。 bBQp:P?E 1 h"B-x 5 实验结果 ~>EVI=? 色谱图 jW*A(bK8: 将处理得到的样品在仪器条件(3)下进行检测,得到的色谱图如图1~图3. K4tX4U[Z 3A9|{Vaz+6 图1 标准溶液色谱图(浓度为0.2μg/mL) {%$=^XO 0'
<S7?~| 图2 黄酒样品加标色谱图(定容浓度为0.2μg/mL) ])JJ`Z8Bk (+@.L7>m+t 图3 黄酒样品色谱图
e?7paJ 标准曲线 g=%&p?1@E 将步骤(2)配制的标准溶液,在仪器条件(3)下进行检测,绘制标准曲线,得到线性方程为y=2.19e+005*x+4.40e+003(相关系数为0.999),其中y为峰面积,x为目标物浓度(μg/mL),方法检出限为3ng/mL,定量限为10ng/mL F,bl>;{[{ 加标回收率及精密度 3m^BYr*y^ 称取17份2g酒样,其中5份分别加入浓度为0.4μg/mL标准工作液50μL,5份分别加入浓度为4μg/mL标准工作液50μL,另外5份分别加入浓度为40μg/mL标准工作液50μL,余下2份酒样作为空白,在条件(4)下进行样品处理,将得到的样品在仪器条件(3)下进行检测,结果如表1所示。表1 加标回收率及精密度
:8ZxO wwv 计算公式 eOb`
uyi Yc$|"to 样品中氨基甲酸乙酯的含量(X)以mg/kg表示,按式(1)计算:X=(C1-C2)*V/m…………………………..(1)
C/bttd 式中:C1为试样中氨基甲酸乙酯的含量,单位为μg/mL; :U9R
1^}A C2为空白试样氨基甲酸乙酯的含量,单位为μg/mL;V为试样最终定容体积,单位为mL; MXy{]o_H~ m为称取试样的质量,单位为g。 }:%pOL n 6 结论 1 W0; YcT] 实验结果表明,该净化柱对氨基甲酸乙酯能有较好的回收率,同时,使用净化柱能较好的去除酒中的氨基酸、蛋白质、糖、有机酸等干扰成分。该方法洗脱剂用量仅为12mL,实验操作快速、简便,可应用于大批量样品的前处理。 Q@8[q l1l