1 仪器及材料 2i{cQ96 仪器:Agilent GC-MS 7890-5975c;涡旋混合器;氮吹仪; M$4[)6Y 玻璃器皿:10mL样品瓶;容量瓶;进样样品瓶;带刻度试管。 $Xm6N@ 材料及试剂:氨基甲酸乙酯专用净化柱;氨基甲酸乙酯标准品;PTFE滤膜;二氯甲烷、甲醇均为色谱纯;无水硫酸钠(经600度煅烧)。 #>=j79~ 2 标准溶液配制 C)'q
QvA 准确称取约0.1g(精确至0.0001g)氨基甲酸乙酯标准品于100mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,得到标准储备液。用甲醇逐级稀释储备液,得到20、10、5、1、0.1、0.05(单位为μg/mL)标准溶液,用于绘制标准曲线。同时稀释得到标准工作液0.4LINK1">
μg/mL、4μg/mL、40μg/mL,用于进行加标回收率实验。 u9+kLepOT 3 GC-MS操作条件 l5xCz=dw 3.1 GC条件 \s"U{N- 毛细柱DA-INOWAX(30m*0.25mm*0.25um);进样口温度230℃;载气:高纯氦气;流速1ml/min;程序升温:60℃(5min)3.5℃/min 150;不分流进样,进样量1μL。 DGW+>\G 3.2 MS条件 7>XDNI 接口温度:240℃,电离方式:EI,电子能量:70eV,离子源温度:230℃,四级杆温度:150℃;扫描模式:SIM模式,监测离子:62,74,89,其中定量离子为62. Yim<>. ! 4 样品处理 D:^$4}h
f 4.1 黄酒加标样品 AfeCK1mC @ 称取2g黄酒于10mL样品瓶中,加入标准工作液50μL,涡旋混合均匀,将样品载入到净化柱上,静置10min以保证黄酒样品和填料充分湿润。然后用12mL二氯甲烷洗脱,用流速调节阀控制流速为2 mL/min左右,用带刻度试管收集洗脱液,将洗脱液在30℃下氮吹至1mL(若体积小于1mL可以用二氯甲烷定容至1mL),加入少量无水硫酸钠,静置5min,用PTFE滤膜进行过滤,收集,取少量入进样样品瓶,待测。 No]~jnqDM 4.2 黄酒样品 98=wnWX6$ 称取2g黄酒,将样品载入到净化柱上,往下操作步骤同4.1(将样品载入到净化柱上,静置……)。 vAY,E=&XvM 4.3 空白样品 STZPYe
XE 称取2g去离子水,将样品载入到净化柱上,往下操作步骤同4.1(将样品载入到净化柱上,静置……)。 qW:HNEiir lj+u@Z<xA 5 实验结果 ;XM{o:1Y[ 色谱图 zOg7raIa 将处理得到的样品在仪器条件(3)下进行检测,得到的色谱图如图1~图3. T~QJO0 aQ:5d3m0 图1 标准溶液色谱图(浓度为0.2μg/mL) .bB
dQpF- PkI:*\R 图2 黄酒样品加标色谱图(定容浓度为0.2μg/mL) =zQN[ N F)~W# 图3 黄酒样品色谱图 :
]C~gc 标准曲线 >EY3/Go> 将步骤(2)配制的标准溶液,在仪器条件(3)下进行检测,绘制标准曲线,得到线性方程为y=2.19e+005*x+4.40e+003(相关系数为0.999),其中y为峰面积,x为目标物浓度(μg/mL),方法检出限为3ng/mL,定量限为10ng/mL J:V?EE,\- 加标回收率及精密度 vWAL^?HUP 称取17份2g酒样,其中5份分别加入浓度为0.4μg/mL标准工作液50μL,5份分别加入浓度为4μg/mL标准工作液50μL,另外5份分别加入浓度为40μg/mL标准工作液50μL,余下2份酒样作为空白,在条件(4)下进行样品处理,将得到的样品在仪器条件(3)下进行检测,结果如表1所示。表1 加标回收率及精密度
*6q5S4 r 计算公式 .W js~0c @S|XGf 样品中氨基甲酸乙酯的含量(X)以mg/kg表示,按式(1)计算:X=(C1-C2)*V/m…………………………..(1)
-Uml_/rd_ 式中:C1为试样中氨基甲酸乙酯的含量,单位为μg/mL; -'6Dg C2为空白试样氨基甲酸乙酯的含量,单位为μg/mL;V为试样最终定容体积,单位为mL; eJg8,7WC m为称取试样的质量,单位为g。 p5G?N(l 6 结论 O%bEB
g 实验结果表明,该净化柱对氨基甲酸乙酯能有较好的回收率,同时,使用净化柱能较好的去除酒中的氨基酸、蛋白质、糖、有机酸等干扰成分。该方法洗脱剂用量仅为12mL,实验操作快速、简便,可应用于大批量样品的前处理。 d3xmtG {i