={& }8VA ;/gH6Z? 包括：
(p4|,\+ 1. Venusil ASB-C18或ASB-C8色谱柱或XBP-C8色谱柱（4.6*250mm,5μm,150Å）任选1支
tMM *m 2. 混合型的阳离子交换柱(Cleanert PCX 60mg/3mL)50支/盒，3盒
5IOMc 4v 以上2项均为科技部“十一五”国家支撑计划成果
p.{9OrH(4 3.
三聚氰胺标准品1瓶（250mg，≥99.5%）
eu!B
, 4. 真空固相萃取装置（12位）
z'cVq}vl 5. 0.22μm，13mm Nylon针式过滤器过滤 200个/包
tbz?th\ # 6. 三聚氰胺
分析方法手册1份
Yphru" \$ 7. 庚烷磺酸钠（10g/瓶），高纯甲醇、乙睛
?-"xP'# w74 )kIi * 试剂规格请以签订合同时为准，博纳艾杰尔科技拥有最终解释权。
7.hgne'< 1 固相萃取(SPE)柱的选择：
US8pT|/ 三聚氰胺呈弱碱性(弱阳离子化合物)，净化过程一般选择阳离子交换柱。混合型的阳离子交换柱(PCX)通过将磺酸基团(-SO3H)键合在极性高聚物聚苯乙烯/二乙烯苯（PEP）吸附剂上，具有阳离子和反相两种吸附机理，并具有以下优点：
N>, `l 1) 可通过两种不同溶液的洗涤(水/一定pH值的缓冲溶液和有机溶剂)，使样品更干净，提高
检测的灵敏度。
(Uo:WyVj|F 2) 批次重复性好。
.j*muDVQn 3) 回收率高，重现性好，即使小柱跑干也可以得到较高回收率。
t__UqCq~h 2 样品前处理步骤：
<b 0;Nf
2.1标准样品配制：
&\ (p<TF 取50mg三聚氰胺标准品，以20%甲醇溶解定容至50mL得到1000ppm的标准溶液，使用时，以合适溶液稀释至所要的浓度。
25xpq^Zw 2.2提取：
>)g`;iO 称取饲料/奶粉样品5g (或牛奶10mL)，加入50mL 1%三氯乙酸提取液，充分混匀，加入2mL 2%乙酸铅溶液，超声20min。然后取部分溶液转移至10mL离心管中，8000rpm/min离心10min，取上清液3mL过混合型阳离子交换小柱(PCX)，同时处理多个样品，需要用真空固相萃取装置（12位），可达到方便、快速、高通量分析样品的目的。
U\N|hw#f!! 2.3净化(PCX小柱，60mg/3mL) ：
:1 Jg;G 1) 活化及平衡：3mL甲醇，3mL水
$N$
ZJC6(@ 2) 上样：加入提取液3mL
BR1oE3in 3) 淋洗：3mL水；3mL 甲醇；弃去淋洗液并将小柱抽干。
lq2P10j @ 4) 洗脱：5mL 5%氨化甲醇(v/v)洗脱。(5%氨化甲醇的配制：5mL氨水+95mL甲醇)。
sF NB rL 5) 浓缩：50℃，氮气吹干，20%甲醇/水定容至1mL。
6FMW}*6< ]
Lg$p Q v/}WnBk 2.4检测：HPLC-UV检测方法
xL,; (F\^ CB(Qy9C%h[ 三聚氰胺在传统的C18柱上保留很差，需要用离子对试剂色谱方法才能有良好的保留与分离，按照
美国食品药品监督管理局（
FDA）的三聚氰胺
检测方法和
中国农业部颁部的三聚氰胺检测方法，采用艾杰尔(Agela) Venusil ASB系列和Venusil XBP色谱柱，均能得到良好的结果，分析色谱图如下：1、 三聚氰胺的FDA检测方法
0eQwi l@ 色谱柱：Venusil ASB C8 4.6×250mm
0) /L+P 5 缓冲液：10mM柠檬酸，10mM辛烷磺酸钠，调pH为3.0。
$5XE'm 流动相：缓冲液：乙腈= 85：15
^J,Zl`N 进样量：样品用缓冲液溶解成约0.1mg/mL，进10μL，
5VWyc9Q 进样前用0.22μm针式过滤器过滤
<=;#I_E#E 流 速：1.0mL / min
\A@Mlpe&t 柱 温：40 ℃
nCF1i2*6|" 波 长：240nm
z;? 3 2K 2、三聚氰胺的中国农业部颁标准检测方法
[ =dK %7v （1）色谱柱：Venusil ASB-C18 4.6×250mm
}GV5':W@WG 缓冲液：10mM柠檬酸, 10mM庚烷磺酸钠
Ae,P&( 流动相：缓冲溶液:乙腈=85:15
O,m0Xb2s]~ 进样量：样品用缓冲液溶解成约0.1mg/mL，进10uL
~\;s}Fv. 进样前用 0.22μm针式过滤器过滤
0s >ozAJ 流 速：1.0mL/min
mUFg(;ya 柱 温：40℃
%Z T@& )
YSS>V 波 长：240nm
BhJag L ^o （2）色谱柱：Venusil XBP-C8 4.6×250mm缓冲液：10mM柠檬酸，10mM庚烷磺酸钠
z"[}Sk 流动相：缓冲液：乙腈=85：15进样量：样品用缓冲溶液溶解成约0.1mg/ml，进10μL
i@Vi.oc4[ 进样前用0.22μm针式过滤器过滤流速：1.0mL/min
FVi7gg.? 柱温：20℃波长：240nm
VZ69s{/.B Rt＜10minLC-MS参考方法
J erueF;J 由于HPLC-UV方法中，流动相添加了离子对试剂，限制了液质联用方法的使用；但不用离子对试剂色谱方法，三聚氰胺在传统的C18柱上保留很差，没有良好的保留与分离。源于此
问题，博纳艾杰尔科技公司自主开发了新的方法，采用博纳艾杰尔(Agela) Venusil ASB系列亲水色谱柱，不用离子对试剂也能得到有效的保留与分离，参考方法如下：
@Kl' 0>U 缓冲液：10mM NH4AC流动相：缓冲液：ACN=95：5
'
];| 流 速：1.0mL/min进样量：先用70%ACN溶解成约1mg/mL，用ACN稀释成0.1mg/mL，进10μL
S .i CkX 进样前用0.22μm针式过滤器过滤柱温：40℃
57nSyd] PR 波长：240nm
}{3XbvC
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