三聚氰胺分析方法包组件清单 [复制链接]

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包括： ?)Gb=   
1. Venusil ASB-C18或ASB-C8色谱柱或XBP-C8色谱柱（4.6*250mm,5μm,150Å）任选1支   y~t e!C  
2. 混合型的阳离子交换柱(Cleanert PCX 60mg/3mL)50支/盒，3盒 \G/ZA) t  
以上2项均为科技部“十一五”国家支撑计划成果 z+0#H39&  
3. 三聚氰胺标准品1瓶（250mg，≥99.5%） IK4(r /  
4. 真空固相萃取装置（12位） NDe FY  
5. 0.22μm，13mm Nylon针式过滤器过滤 200个/包 [ f<g?w  
6. 三聚氰胺分析方法手册1份 %vG;'_gMB  
7. 庚烷磺酸钠（10g/瓶），高纯甲醇、乙睛 >N~jlr|  
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* 试剂规格请以签订合同时为准，博纳艾杰尔科技拥有最终解释权。 ;'!h(H  
1 固相萃取(SPE)柱的选择： S!R(ae^}  
三聚氰胺呈弱碱性(弱阳离子化合物)，净化过程一般选择阳离子交换柱。混合型的阳离子交换柱(PCX)通过将磺酸基团(-SO3H)键合在极性高聚物聚苯乙烯/二乙烯苯（PEP）吸附剂上，具有阳离子和反相两种吸附机理，并具有以下优点： >k}Kf 1I  
1) 可通过两种不同溶液的洗涤(水/一定pH值的缓冲溶液和有机溶剂)，使样品更干净，提高检测的灵敏度。 *li5/=UC5*  
2) 批次重复性好。 ']X0g{%  
3) 回收率高，重现性好，即使小柱跑干也可以得到较高回收率。 `+Mva  
2 样品前处理步骤： ' #t1e]
 
2.1标准样品配制： p5nrPL  
取50mg三聚氰胺标准品，以20%甲醇溶解定容至50mL得到1000ppm的标准溶液，使用时，以合适溶液稀释至所要的浓度。 m&_!*3BAG  
2.2提取： M?ElD1#Z  
称取饲料/奶粉样品5g (或牛奶10mL)，加入50mL 1%三氯乙酸提取液，充分混匀，加入2mL 2%乙酸铅溶液，超声20min。然后取部分溶液转移至10mL离心管中，8000rpm/min离心10min，取上清液3mL过混合型阳离子交换小柱(PCX)，同时处理多个样品，需要用真空固相萃取装置（12位），可达到方便、快速、高通量分析样品的目的。 l2 LO,j}  
2.3净化(PCX小柱，60mg/3mL) ： $fW8S8  
1) 活化及平衡：3mL甲醇，3mL水 \AD|;tA\vE  
2) 上样：加入提取液3mL z8PV&o  
3) 淋洗：3mL水；3mL 甲醇；弃去淋洗液并将小柱抽干。 ':T"nORC  
4) 洗脱：5mL 5%氨化甲醇(v/v)洗脱。(5%氨化甲醇的配制：5mL氨水+95mL甲醇)。 G^\.xk]  
5) 浓缩：50℃，氮气吹干，20%甲醇/水定容至1mL。 jpfFJon)w  
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2.4检测：HPLC-UV检测方法 >!P !F(  
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三聚氰胺在传统的C18柱上保留很差，需要用离子对试剂色谱方法才能有良好的保留与分离，按照美国食品药品监督管理局（FDA）的三聚氰胺检测方法和中国农业部颁部的三聚氰胺检测方法，采用艾杰尔(Agela) Venusil ASB系列和Venusil XBP色谱柱，均能得到良好的结果，分析色谱图如下：1、 三聚氰胺的FDA检测方法 &28%~&L  
色谱柱：Venusil ASB C8 4.6×250mm ->U9u lTC  
缓冲液：10mM柠檬酸，10mM辛烷磺酸钠，调pH为3.0。 r(/+- t  
流动相：缓冲液：乙腈= 85：15 5]@"f/  
进样量：样品用缓冲液溶解成约0.1mg/mL，进10μL， dy2<b+
..  
进样前用0.22μm针式过滤器过滤 $<s 3;>t  
流 速：1.0mL / min -85W
/%  
柱 温：40 ℃ "E )0)A3=  
波 长：240nm , [<+7  
2、三聚氰胺的中国农业部颁标准检测方法  a EmLf  
（1）色谱柱：Venusil ASB-C18 4.6×250mm tE HgQto  
缓冲液：10mM柠檬酸, 10mM庚烷磺酸钠 l's*HEx
R  
流动相：缓冲溶液:乙腈=85:15 ,@4~:OY  
进样量：样品用缓冲液溶解成约0.1mg/mL，进10uL "8sB ,$  
进样前用 0.22μm针式过滤器过滤 *$yU|,  
流 速：1.0mL/min {YigB  
柱 温：40℃ "9bd;Tt:  
b:t|9FE%  
波 长：240nm eNc>^:&y*  
（2）色谱柱：Venusil XBP-C8 4.6×250mm缓冲液：10mM柠檬酸，10mM庚烷磺酸钠 }NpN<C+  
流动相：缓冲液：乙腈=85：15进样量：样品用缓冲溶液溶解成约0.1mg/ml，进10μL 5u=>~yK+  
进样前用0.22μm针式过滤器过滤流速：1.0mL/min DA_}pS"  
柱温：20℃波长：240nm ^2C \--=;  
Rt＜10minLC-MS参考方法 i62GZeE  
由于HPLC-UV方法中，流动相添加了离子对试剂，限制了液质联用方法的使用；但不用离子对试剂色谱方法，三聚氰胺在传统的C18柱上保留很差，没有良好的保留与分离。源于此问题，博纳艾杰尔科技公司自主开发了新的方法，采用博纳艾杰尔(Agela) Venusil ASB系列亲水色谱柱，不用离子对试剂也能得到有效的保留与分离，参考方法如下： V `7(75  
缓冲液：10mM NH4AC流动相：缓冲液：ACN=95：5 ^C'{# p"  
流 速：1.0mL/min进样量：先用70%ACN溶解成约1mg/mL，用ACN稀释成0.1mg/mL，进10μL [\-)c[ /  
进样前用0.22μm针式过滤器过滤柱温：40℃ -% \LW1  
波长：240nm P!dSJ1'oC