QuEChERS-高效液相色谱法同时检测动物组织中的克球酚、地克珠利和磺胺类药物残留量 [复制链接]

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1．材料 X@AkA9'fq  
PSA吸附剂：Cleanert PSA .q9|XDqQc  
C18吸附剂：Cleanert C18 X>GY*XU  
中性氧化铝吸附剂：层析用（用前于600℃马弗炉烘烤） +$QL0|RL  
2．样品处理 P"_}F  
试样粉碎并混合均匀，准确称取5g（精确至0.01 g），置于50mL离心管中，加入14mL乙腈+氯仿（10+1）溶液，1.0mL10%硫酸钠溶液，均质提取。以5000转/分钟离心5分钟。准确吸取10mL提取液氮吹或浓缩至近干，用乙腈+氯仿（10+1）溶液定容至2 mL，根据样品基质情况，分别选择并称入适量C18、PSA、氧化铝吸附剂，涡混2分钟进行分散型固相萃取净化，5000转/分钟离心3分钟。准确移取1.0mL上清液于另一15mL离心管中，N₂吹干，用1.0mL乙腈+水（12+88）溶液涡混溶解残渣，过0.45μm滤膜，进样。 ~W*j^+T"  
3．色谱条件 4Z~D xo  
色谱柱：Venusil ASB C18 (5μm,3.9*150mm) x(zZqOed  
流动相：A：乙腈； B：冰乙酸+水（3+1000） jG(~9P7  
采用梯度洗脱，如表1 >Wit"p  
流速：1.0 mL/min；进样量：20μL； G1^!ej  
柱温：40℃；检测波长：270 nm。 r\ Yur  
                   34^C fh  

^?]H$e   时间/min         A %        B %          梯度曲线

HWfX>Vf>}k   0.00          12           88              线性 5YH mp7c-z   8.50          12           88              线性 eL?si!ZL^   8.51          35           65              线性 ^` MDP`M;   15.00         35           65              线性 Q!e0Vb   15.01         60           40              线性 8 (h   20.00         60           40              线性 ?[B[ F   20.01         12           88              线性 "s<lLgi   25.00         12           88              线性

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4．结果 &p4<@k\L  
4.1 线行范围和方法检测限 \\Tp40m+  
由于不同样品即使在相同的添加水平下，回收率也不可能完全相同，所以方法检测限会略有差别，但7种化合物检测限至少能分别达到：克球酚：0.05mg/kg、磺胺类：0.05 mg/kg、地克珠利：0.10mg/kg。 B]F7t4Y!  
4.2 回收率和方法精密度 xi. KD
 
用空白样品加标方法进行回收率和精密度实验。分别对空白鸡肉和空白鸡肝进行三个不同水平的加标，每个水平平行测定6次，计算回收率和相对标准偏差。当添加水平在 0.10mg/kg～1.0mg/kg范围内，回收率均可在65%～100%之间，相对标准偏差 1%～10%之间。鸡肉和鸡肝的加标回收谱图分别见图1和图2。 jF_I4
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5．讨论 y+afUJT  
原QuEChERS方法应用于农残检测，称取15g果蔬样品，振荡提取，取提取液直接进行下一步净化；改进后的方法应用于兽残检测时，称取5g动物组织样品，采用均质提取，提取效率更高，然后从提取液中取10mL，旋蒸至近干，用提取溶剂溶解残渣定容至2mL，再进行下一步净化，比直接取提取液净化富集了更多的目标物，使方法检测限理论上可以提高5倍。 rg/vxTl  
原QuEChERS方法用PSA去除果蔬中的脂肪酸、色素，而动物组织中含有大量蛋白和脂肪，所以净化过程中同时考虑C18和中性氧化铝吸附剂，采用混合型分散固相萃取净化，各种吸附剂的用量针对不同的样品基质进行调整，一般在100～250mg之间。在回收率方面，C18和中性氧化铝对地克珠利吸附性较强，使其回收率降低；而对其它6种兽药化合物基本没有吸附。PSA对7种化合物均有不同程度吸附。实际检测中，可根据基质情况和目标化合物性质选择合适的吸附剂及其用量。 X2?_lZ[\