HPLC法测定十八种天然氨基酸和三种非天然氨基酸 [复制链接]

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三种非天然氨基酸：Pal，Nal，Cpa {9*k \d/;  
氨基酸标准溶液和样品溶液的衍生（PITC柱前衍生氨基酸分析方法） W: v w.  
氨基酸标准溶液含有17种天然氨基酸。 \w\{x0u  
样品溶液含有十七种天然氨基酸和三种非天然氨基酸。 yUzpl[*e^o  
准确量取样品溶液200μl，置1.5ml塑料离心管中，准确加入20μl正亮氨酸内标溶液，混匀，用氮吹仪上吹干后，加220μl 0.1mol/L盐酸溶解，加入三乙胺乙腈溶液100µl，异硫氰酸苯酯乙腈溶液100µl，混匀，室温放置1小时，然后加入正己烷400µl，振摇后放置10分钟，取下层溶液，用0.45µm小滤器过滤。 }qOj^pkJ  
另准确量取混合氨基酸标准溶液200µl，置一1.5ml塑料离心管中，准确加入20μl正亮氨酸内标溶液，混匀，加入三乙胺乙腈溶液100µl，异硫氰酸苯酯乙腈溶液100µl，混匀，室温放置1小时，然后加入正己烷400µl，振摇后放置10分钟，取下层溶液，用0.45µm小滤器过滤。 _MC\\u/C/  
色谱条件： N++ jI(  
色谱柱：Agela Venusil AA柱，100Å，4.6×250mm，5µm(订货号:AA952505-0) 1rmK#ld"=Z  
流动相A：称取15.2g无水醋酸钠，加水1850mL，溶解后用冰醋酸调pH至6.5，然后加乙腈140mL，混匀，用0.45µm滤膜过滤。 b
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流动相B：80%（V/V）乙腈溶液。 V)8d1S  
洗脱梯度： Q-g}{mFS