]HvZ$ 十八种天然氨基酸和三种非天然氨基酸：
十八种天然氨基酸：Asp,Glu,Ser,Gly,His,Arg,Thr,Ala,Pro,Tyr,Val,Met,Cys-Cys, Ile,Leu,Nle,Phe,Trp,Lys.
U=!@Db5k~ _ 6:ww/ 三种非天然氨基酸：Pal，Nal，Cpa
68 x}w
Ae 氨基酸标准溶液和样品溶液的衍生（PITC柱前衍生氨基酸
分析方法）
?y- s20Kd 氨基酸标准溶液含有17种天然氨基酸。
MD'>jO ;n 样品溶液含有十七种天然氨基酸和三种非天然氨基酸。
Z
g $Tf 准确量取样品溶液200μl，置1.5ml塑料离心管中，准确加入20μl正亮氨酸内标溶液，混匀，用氮吹仪上吹干后，加220μl 0.1mol/L盐酸溶解，加入三乙胺乙腈溶液100µl，异硫氰酸苯酯乙腈溶液100µl，混匀，室温放置1小时，然后加入正己烷400µl，振摇后放置10分钟，取下层溶液，用0.45µm小滤器过滤。
*W^=XbG 另准确量取混合氨基酸标准溶液200µl，置一1.5ml塑料离心管中，准确加入20μl正亮氨酸内标溶液，混匀，加入三乙胺乙腈溶液100µl，异硫氰酸苯酯乙腈溶液100µl，混匀，室温放置1小时，然后加入正己烷400µl，振摇后放置10分钟，取下层溶液，用0.45µm小滤器过滤。
')nnWlK 色谱条件： NJ$e6$g) 色谱柱：Agela Venusil AA柱，100Å，4.6×250mm，5µm(订货号:AA952505-0)
v[" 3 流动相A：称取15.2g无水醋酸钠，加水1850mL，溶解后用冰醋酸调pH至6.5，然后加乙腈140mL，混匀，用0.45µm滤膜过滤。
k!E"wJkpz 流动相B：80%（V/V）乙腈溶液。
4r*Pa(;y 洗脱梯度：
6q%ed
UED r'd/qnd 图1 氨基酸标准溶液（十七种天然氨基酸+正亮氨酸）
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图2 氨基酸标准溶液（十七种然氨基酸+正亮氨酸+三种非天然氨基酸）
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