聚乙二醇200 基硝苯柳胺与钥孔戚血蓝蛋白的相互作用 A[;
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吴勇权, 郭 维, 许丽荣, 唐彪生, 赵娇娇, 郑绿茵, 范小林3 k B]`py!
(赣南师范学院,江西省有机药物化学重点实验室,江西赣州341000) n
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摘 要:采用荧光光谱、紫外吸收光谱和圆二色谱(CD) 研究了聚乙二醇200 基硝苯柳胺与钥孔戚血蓝蛋白( KL H) 的相互作用。结果表明,聚乙二醇200 基硝苯柳胺对KL H 的荧光猝灭机制属于静态猝灭;由Lineweaver2Burk 方程计算出不同温度下结合常数K ,由Van’t Hoff 方程计算出△H 和△S 平均值,结合力主要为静电作用力;根据FÊrster非辐射能量转移机制求得给体与受体间的结合距离r = 5. 76 nm ;同步荧光光谱表明,聚乙二醇200 基硝苯柳胺能够被KL H 存储和转运,但结合时对蛋白的构象有一定的影响;圆二色光谱的数据表明相互作用后KL H 的二级结构发生了改变: KL H的α2螺旋的含量从43. 1 %下降到37. 8 %。 #'s$6gT=
关键词:硝苯柳胺;钥孔戚血蓝蛋白;荧光光谱;紫外吸收光谱;圆二色谱 z&d.YO_W
中图分类号:O657. 3 文献标识码:A 文章编号:100626144 (2010) 0120011204 m#RJRuZ|2V
硝苯柳胺是一种重要的杀蚴剂,对尾蚴也有一定的杀灭作用,在预防日本血吸虫病中有重要作用[122 ] 。由于硝苯柳胺难溶于水,难以直接作为杀蚴剂使用。为增强其水溶性,在硝苯柳胺分子的羟基上连接聚乙二醇200 非离子型表面活性基团,发现改性后的聚乙二醇200 基硝苯柳胺具有良好的杀蚴作用。血蓝蛋白又称血清素,在生物体内的生理功能相当于血红蛋白,是一种重要的氧载体[3 ] 。钉螺是软体动物门腹足纲中重要的螺类动物,钉螺的血液中含有的呼吸色素主要是血蓝蛋白。采用荧光光谱法研究聚乙二醇200 基硝苯柳胺与钥孔戚血蓝蛋白( KL H) 的相互作用目前尚未见相关报道。 U; oXX
本文研究了聚乙二醇200 基硝苯柳胺与KL H 作用的荧光猝灭机理,通过热力学参数讨论了作用力类型,用同步荧光光谱考察了聚乙二醇200 基硝苯柳胺对KL H 构象的影响,采用圆二色谱(CD) 证实其构象发生变化。该研究为进一步了解聚乙二醇200 基硝苯柳胺灭钉螺机理提供一定帮助。 :\"0jQ.y|
1 实验部分 xN
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1. 1 仪器和试剂 lgU!D |v
LS255 型荧光光谱仪(美国, Perkin2Elmer 公司) ;Cintra 10 型紫外可见分光光度计(澳大利亚, GBC公司) ;J2810 型圆二色分光光度计(日本,J asco公司) ;Millipore 超纯水系统。聚乙二醇200 基硝苯柳胺按照文献[ 4 ]方法合成,并配制成1. 0 ×10 - 3 mol/ L 的储备液备用; KL H(购于Sigma2Aldrich 公司) 配制成1. 0 ×10 - 6 mol/ L 储备溶液,并于冰箱中(温度于0~5 ℃) 保存,其余试剂均为分析纯。 I&La0g