色谱柱：Waters Xbridge C18柱 (4.6 mm x 250 mm, 5mm)

保护柱：Waters SymmITry C18柱 (4.6mm x 20mm, 5mm) 

流动相：乙腈：水：乙酸=49：55：1；

检测器波长：激发光333 nm，发射光460 nnq；进样量：25 µL；流速：1mL／min；柱温：30℃

 

提取液：含20% 0.1 mol／L氢氧化钾溶液60%甲醇水溶液；

淋洗液：含30% 0.1mol／L氢氧化钾溶液，50％乙腈水溶液；

洗脱液：甲醇：乙腈：甲酸：蒸馏水=4：5：0．5：0．5

 

2.2.1玉米：将样品粉碎，称取玉米粉10g，加入50mL氯仿，震荡3～5分钟，用滤纸过滤，取滤液10mL进入一个100mL平底烧瓶中，于60℃水浴中旋转蒸发至近干，用20mL石油醚溶解残渣，加入10mL提取液，震荡3～5分钟，分层后，用滤纸过滤，取下层提取液5mL进行固相萃取。

2.2.2糙米、小麦、小麦粉和大豆：将样品粉碎，称取粉碎样品l0g，加入50mL提取液，震荡3～5分钟，用滤纸过滤，取滤液10mL进入一个100 mL平底烧瓶中，加入20 mL石油醚，震荡3～5分钟，分层后，用滤纸过滤，取下层提取液5 mL进行固相萃取。

PAX固相萃取柱分别用5mL甲醇，3mL提取液活化，然后将5mL提取液以1～2滴／秒速度过柱，再用10mL淋洗液以1～2滴／秒速度洗柱，并吹干；最后用4～5mL洗脱液快速洗脱OA，洗脱液收集于一个100mL平底烧瓶中，于60℃水浴中旋转蒸发至干，用1mL流动相溶解残留物，经滤膜过滤后上液相色谱检测。

 

以小麦粉、小麦、玉米、糙米和大豆为研究对象，分别作三个不同浓度OA添加水平，这三个浓度分别为0.8 µg／kg、4µg／kg、10g／kg，每个浓度水平作6次平行性检测。检测回收率和精密度数据见表l、表2和表3；典型色谱图见图3。

 

 

表1 添加OA浓度为0.8µg/kg时各种粮食回收率和精密度

粮食	各个平行试验回收率(%)						平均回收率(%)	RSD(%)
	1	2	3	4	5	6
小麦粉	101.8	107.0	101.4	89.1	107.6	93.4	104.1	4.93
小麦	98.2	94.6	90.2	102.5	89.9	93.4	94.8	5.13
玉米	1130.3	112.2	100.5	98.5	101.9	105.7	104.8	5.13
糙米	86.7	89.0	90.9	85.7	90.0	86.7	88.2	2.36
大豆	101.2	100.9	92.9	92.2	99.4	98.4	97.5	4.07

 

表2 添加OA浓度为4ug/kg时各种粮食回收率和精密度

粮食	各个平行试验回收率(%)						平均回收率(%)	RSD(%)
	1	2	3	4	5	6
小麦粉	96.8	92.8	83.7	85.5	89.8	92.6	90.2	5.34
小麦	101.0	99.3	98.8	106.2	100.2	98.6	100.7	2.78
玉米	91.5	92.7	90.8	86.8	87.7	91.3	90.1	2.60
糙米	90.3	85.7	94.1	96.3	96.1	95.8	93.0	4.56
大豆	89.5	93.8	93.7	89.4	89.1	88.9	90.7	2.61

 

表3 添加OA浓度为10μg/kg时各种粮食回收率和精密度

粮食	各个平行试验回收率(%)						平均回收率(%)	RSD(%)
	1	2	3	4	5	6
小麦粉	98.0	95.8	92.2	78.2	95.6	89.8	91.6	7.85
小麦	85.9	91.7	90.1	86.0	90.5	88.9	88.8	2.71
玉米	91.5	93.3	83.3	82.1	88.1	90.6	88.1	5.22
糙米	96.2	87.9	92.6	91.1	95.4	94.7	93.0	3.35
大豆	99.0	95.3	102.8	97.2	98.4	91.0	97.3	4.05