水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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@<hF.4,]  
1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） d-9uv|SJ  
2．样品处理 ,h3269
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称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 &mX5&e  
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含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 suA+8}o]  
3．净化步骤： f 1sy9nQs  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 pYYqGv^oa  
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4．浓缩及定容： ST[2]   
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ \pjRv  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 4JX`>a{<  
hB|H9+  
5．HPLC条件 |pfhrwJp  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm )2iM<-uB  
流动相：A:B=77:23 `,F&y{A  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. +")qi=
 
B：乙腈 @5{. K/s  
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6．结果：（两个平行） Y|{r vBKjf  

A)b)ff,   名称	\_m\U.*   回收率-1	V_)5Af3wY   回收率-2
tIn7(C   土霉素	_n-VgPRn   128%	M/::`yJQu   137%
vi W~'}^k7   四环素	SREDM   91.8%	\Dvl%:8   97.4%
uE,i-g0$Id   金霉素	c,v^A+sZu   88.5%	R-r+=x&   87.1%
e.)yV'%L   强力霉素	J6*\>N5W   97.3%	4_6W s$x   95.3%