水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL）
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2．样品处理 N||a0&&  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 '" C& dia  
:6TLT-B  
含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 #n_t5 O[  
3．净化步骤： <5O:jd  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 H"NBjVRU%  
yU|=)p5  
4．浓缩及定容： w
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浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ p54e'Zb  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 \ORE;pG  
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5．HPLC条件 b?,''t  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm eNDc220b  
流动相：A:B=77:23 P" aw--f(  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. !ZS5}/ZU  
B：乙腈 ^XT;n  
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6．结果：（两个平行） NCp]!=uM;  

9]gV#uF   名称	mXT{c=N)w   回收率-1	Um!LF"Z   回收率-2
9Xe|*bT    土霉素	PG{"GiZz=   128%	i4<n#]1!t   137%
w ""   四环素	^f] 9^U{   91.8%	^Sc48iDc   97.4%
:M$8<03>F   金霉素	Q"k #eEA   88.5%	4oPr|OKj{*   87.1%
mr+8[0   强力霉素	@4wN-T+1   97.3%	/h,-J8[   95.3%