水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） 3A}8
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2．样品处理 XRz6Yf(/  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 9d} ny
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8HA=O?Cg  
含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 R0d|j#vP  
3．净化步骤： @il}0  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 Y,\mrW}K  
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4．浓缩及定容： r=aQS5  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ } TvAjLIS6  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 K$]B" s  
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5．HPLC条件 ?0Zw ^a   
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm rnE'gH(V'  
流动相：A:B=77:23 3om-,gfZ  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. h zE)> f  
B：乙腈 MJ08@xGa  
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6．结果：（两个平行） qW^l2Jff  

o+&sodt|`   名称	[^f`D%8o   回收率-1	fHi+PEbR   回收率-2
&IYkeGQr   土霉素	:e;fs.C   128%	:JYOC+#q7   137%
w[&BY   四环素	p pq#5t^[)   91.8%	sBwgl9   97.4%
T$e_ ao|   金霉素	*QX$Mo^E   88.5%	>/*\xg&J   87.1%
nL?B   强力霉素	|*b8-a8<   97.3%	*sTQ9 Kr   95.3%