水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） y/}VtD  
2．样品处理 < k+fKl  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA<sub>2</sub>Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 QFNz9c  
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含有EDTA<sub>2</sub>Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA<sub>2</sub>Na，溶解后作为样品提取液。 urrO1  
3．净化步骤： T`g?)
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以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 b 5F4+  
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4．浓缩及定容： 7#Uz*G\iZ  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ d^Zo35X  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 C`NBHRa>  
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5．HPLC条件 vz;7} Zj]  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm 24H^hN9  
流动相：A:B=77:23 _[}G(<  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. }t@f|TX  
B：乙腈 9tzoris[~  
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6．结果：（两个平行） jzl?e[qPA  

E fP>O   名称	B;xZ%M]   回收率-1	bK?1MiXb   回收率-2
u iBl#J Q   土霉素	\@Ee9C13   128%	~A^E   137%
>%9^%p^   四环素	yJDeX1+,   91.8%	f"vk# 3   97.4%
w?kGi>7E   金霉素	fx<FIj7   88.5%	{bT9VZ>   87.1%
+C'XS{K,#   强力霉素	D H:J   97.3%	(VR"Mi4   95.3%