水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL） ezMI\r6  
2．样品处理 A*um{E+  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 q=#} yEG  
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含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 PnoPbk[<  
3．净化步骤： PpgP&;z4  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 lgb?)=  
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4．浓缩及定容： kbMYMx.[  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ ,j$Vvz  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 L*~J%7  
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5．HPLC条件 %y%j*B!%  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm x*Y@Q?`>5W  
流动相：A:B=77:23 yfC^x%d7G  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. p^'3Odd|O  
B：乙腈 NwZ@#D#[ Y  
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6．结果：（两个平行） Z"
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q|LDo~H   名称	HO''&hz   回收率-1	oI#a_/w   回收率-2
7ek&[SJ>,/   土霉素	Kk{< @v)   128%	bcZf>:gVf   137%
yOwA8^q   四环素	<Engi!   91.8%	<~)kwq'   97.4%
gy;+_'.j   金霉素	"hy.GWF|*   88.5%	>B>CB3U   87.1%
Hp(D);0+)   强力霉素	a:_I    97.3%	w`DW(hXJ   95.3%