水产品、进口肉中土霉素、四环素、金霉素含量检测方法 [复制链接]

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1．SPE柱：Cleanert PS柱（200mg/3mL）  GjN/8>/  
2．样品处理 (jd)sf6Tj[  
称取5g经匀浆处理的样品于100mL离心管内，分别加入含有EDTA₂Na的柠檬酸缓冲液30mL、20mL，混合震荡提取，合并上清液。加入20mL正己烷和上清液于分液漏斗中，充分混合震荡5min，合并下层。 FDBj<uXfM|  
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含有EDTA₂Na柠檬酸缓冲液的配制：取0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液307mL和0.5mol/L磷酸氢二钠缓冲溶液193mL混合均匀，向其中加入1.86gEDTA₂Na，溶解后作为样品提取液。 ,<R/jHZP9  
3．净化步骤： *"Yz"PK  
以10mL甲醇，10mL水，5mL EDTA₂Na活化PS柱，加入上清液，然后以10mL水淋洗小柱，抽干，最后以10mL甲醇洗脱目标物，并收集。 p xP,cS  
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4．浓缩及定容： ;D.a |(Q  
浓缩：在旋转蒸发仪上减压浓缩，温度小于40℃ Ey<vvZ  
定容：加入1.0mL的1.36%的磷酸二氢钾溶液，将定容液进行HPLC分析 )y>o;^5
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5．HPLC条件 8 T"C]  
色谱柱：Venusil MP C18, 5µm,4.6*250mm S:!gj2q9|  
流动相：A:B=77:23 @ 3n;>oi  
A：咪唑缓冲液—称取68.08咪，10.72乙酸镁，0.37EDTA₂Na 溶于800mL水中，用冰乙酸调pH到7.2，加水定容到1000mL. Su"9`  
B：乙腈 J)(KG dk  
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6．结果：（两个平行） `y"(\1  

%#5\^4$z|N   名称	RNa59b   回收率-1	E k'~i   回收率-2
\tv^],^`   土霉素	4I"%GN[tA   128%	n*(9:y=l1   137%
#>O!N   四环素	6t zUp/O   91.8%	\!-I Y   97.4%
kmNa),`{s   金霉素	vR`#kxSdJ@   88.5%	h?Y->!'   87.1%
F!k3/z   强力霉素	0iKSUwps   97.3%	cj[a^ ZH   95.3%