[重金属/有害元素]【分享】不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的系统解决方案 [复制链接]

附件一： \,yg@R  
. "`f~s\G  
8PvO_Gz5  
j4Y] 8  
色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L） o.>Yj)U  
kI/%|L%6D  
流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50 HG[gJ7  
_Uup*#m  
流  速：1.0 mL/min n|!O .+\b  
vQDkZ  
波  长：242 nm ]8EkZC  
f9J]-#Iif  
进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm） 2%t!3F:  
kF7`R4Sz  
样  品：15种邻苯二甲酸酯 (JeRJ4  
{m5R=2
2^  
浓  度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A） v$bR&bCT  
_D."KU|  
溶  剂：正己烷 /40%流动相A !8Q9RnGn  
DwH=ln=  
柱  温：30℃ R3} Z"  
VWcR@/3  
2[$` ]{U  
fIc ra  
（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP） y5bELWA  
|&a[@(N:zf  
结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 'Z(4Wuwb  
WL5!H.q  
附件二 WgQ6EV`  
c YMlcwS  
0q ^dpM  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS $di 8#O*  
,ZLg=  
色谱条件： >O&:[CgEF  
.5x+FHu7  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm W!BIz&SY:-  
va/$dD9  
进样口：250℃，不分流进样 T=QV =21qn  
IL]VY1'#  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） \VX~'pkrd/  
Ibd na9z7  
进样量：1μL nVC:5ie  
LA.xLU3  
流速：1 mL/min Z;{3RWV  
VBIY[ 2zf  
质谱条件： heliL/  
H3"[zg9L:a  
接口温度：280℃ D %`64R  
"bRg_]\q6  
电离方式：EI nL+*-R!R  
xP.B,1\X  
电离能量：70eV g< cR/  
nBd!296  
溶剂延迟：7min {6v |d{V+e  
qwu++9BM  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 EOrWax@k$}  
:z%vNKy1  

_7YAF,@vT   序号 CJ_X:Frj)	Jp .Sow   保留时间/min *$x/(!UE	|EaGKC(    中文名称 ]nN']?{7PW	j3VM!/   英文缩写 StWDNAf )	y-}lz#N   SIM离子 bvn?wK
3S:}fPR   1 -:m;ePK	&qFdP'E;$   8.265 bXc7$5(!VB	>DQl&:-)t   邻苯二甲酸二甲酯 ]1%H.pF	p{!aRB%    DMP o&g=Z4jj<	(SoV2[|   163、77  }Q`Kg8L
Pp:(PoH   2 -a]oN:ERb	%H~q3|z   9.135 N+b"LZc	Jm\' =#U#   邻苯二甲酸二乙酯 nO$(\ z)	Q)C#)|S   DEP !a~>;+	G#Nh)ff   149、177 * ?rw'
$o H?oD1   3 vy[* xT]	>wdR4!x!?   10.888 d&wg\"E	G! zV=p   邻苯二甲酸二异丁酯 XtNe) Ry	KU"?ZI   DIBP Aw;~b&.U{_	tUGnD <P   149、223 UVUbxFq:
@7"xDgA   4 iJZqAfG{m?	!\}Dxt   11.637 ES;7_ .q	.LIEZ^@   邻苯二甲酸二丁酯 ]\v'1m"	W% YJ.%I   DBP Qi&!IG	<?yAIhgN*   149、223 glH&v8
}W#Gf.$6C   5 SuB;Nb7r`	'VS!<   11.979 3Nd&*QSV	$ii/Q:w T"   邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 !>TVDN>	()6(eRGJ   DMEP = 7d{lK	dGt;t5AnV   59、149、193 !o+#T==p
@]uvpI!h   6 _Jx.?8	w!,~#hbt6   12.72 }dQW-U	: Kh Af2A   邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 )D\! #<#h	Jte:U*2   BMPP FpN>T	h}r.(MVt   149、251 Opx"'HC@G
I!>pHF 4   7 ` 1k0wT(	;}"!|   13.044 }GI8p* ]o=	"=8= G   邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 3H"bivK	K;j}qJvsb   DEEP Y,0D+sO4	'PiQ|Nnb|   45、72 t A;#yM;
3>O =d>   8 O $SQzLZx&	DVC<P}/   13.41 9qe<bds1	&4]~s:F   邻苯二甲酸二戊酯 iH&BhbRu_	gFBMARxi   DPP U_\3preF	6KpG,%2L#   149、237 `-,y J
(bT3 r_   9 `y%1K|Y=	R\VM6>SN'S   15.552 IJnh@?BC	cbHb!Lbg   邻苯二甲酸二己酯 sPKyg	OI0tgkG   DHXP ;?-`n4B&	@1p,   104、149、76 0lyCk}c
ZJ|@^^GcL   10 HDTdOG)	!edgziuO   15.694 O8J:Tw}M*	GA8cA)]zOD   邻苯二甲酸丁基苄基酯 /G>reG,G	w |1Gb[   BBP /@*J\0h(-	SwDUg }M~   149、91 =&-hU|ur
&<u pjb   11 10/N-=NG18	`R}D@   17.153 ,]N!I%SI	$Xlyc.8YId   邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 ZOFBT(oV	_+,2b:D:   DBEP 5JbPB!5;	>#@1 I   149、223 K/~+bq#+
#lyvb.;   12 [Cz.K?+#M	TJ9,c2d+   17.81 >GiM?*cC	Tk-PCra   邻苯二甲酸二环己酯 yI9l*'	O0"i>}g4   DCHP |xH"Xvp:	l)z15e5X   149、167 0$,Ag;"^?
ew4IAF   13 +D4Nu+~BSN	'oTcx Jx   18.056 g_] u<8&	|.:O$/ Tt[   邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 S#+G?I3w	$7)O&T*q'   DEHP KN~E9oGs	)gR14a   149、167 T|ZZkNP|6
g,y`[dr   14 /l+x&xYD	$'9r=#EH   20.444 T ,7Y7MzF	{K3\S 0L   邻苯二甲酸二正辛酯 f[.hN	i'e^[ oZ   DNOP 82J0t} :U	 b1[U9   149、279 _hh |/4(
"E''ZBLO~   15 cC}s 5`	M0]l!x#7   22.98 4uftx1o	oC7#6W:@w   邻苯二甲酸二壬酯 ~ml\|	_-! 6@^+   DNP w`7l;7[	[Thz Lk#m   57、149、71 %@xYg{

结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 siYRRr  

@jSb
MI  
附件三 ++DQS9b{  
,Bw)n,  
k
_>Fw>Y  
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 9<h]OXv  
rn: zKTyhw  
F4E3c4 81  
Yz-JI=  
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表 lI_Yb:  
XL PpxG  
序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 n<<=sj$\!  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 87.82% pq[X)]z|  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 72.31% AR~$MCR]"k  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 81.97% 8HFXxpt[G  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 77.33% Z@,PZ  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 83.87% g6VD_  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 83.83% TD{=L*{+  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 109.08% i#RElH  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 86.36% j&dx[4|m:h  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 84.67% n</k/Mk}  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 98.33% 6h2x
~@  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 101.30% _,_8X7   
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 92.47% T9z4W]T  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 132.32% )X~Pr?52?  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 89.73% G@!_ZM8h  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 70.10% S5~`T7Ra  
fJLf7+q  
XogvtK*  
   D=r -  
CAUijMI@  
-3.UE^W2  
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 \!^i;1h0c3  
#
P(l2(  
v9%nau4  
\Yj#2ww  
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 9nn>O?  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 149.97% yeh8z:5Z O  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 93.49% ~xS@]3n=  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 125.70% >SvDgeg_7f  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 136.89% R'zu"I  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 90.84% 9b 1?W?"  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 82.29% R|iEv
t  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 106.38% aD2*.ln><  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 88.14% 7i8eg*Gl  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 75.32% z!$gVWG  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 89.56% tQrS3Hz'nA  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 105.05% F?z
<xL@  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 72.94% 2{-!E ^g  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 124.27% !6HuFf  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 78.19% /s:w^g~  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 75.27% %zzYleJ!]  

关于油脂中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案的补充说明 Bs^aII$  
m*&]!mM"0G  
T
(id^
w  
5_GYrR2  
1、  关于Cleanert MAS-PAE（c）的注意事项 0CnOL!3.I  
?WGA?J %2  
Cleanert MAS-PAE（c）采用多种吸附材料，可以去除蛋白质、色素、油脂（在样品中含量少）以及水等，只剩下邻苯二甲酸酯被以乙腈为主的溶剂提取出来，然后可以经过过滤直接进样检测。方法方便快捷，十分适合于快速检测。 3c-GY:VkLM  
Acez'@z  
随方法可以提供12mL和40mL透明玻璃瓶作为玻璃离心管，分别可配套10mL和50mL离心转子。 BtkOnbz8X  
B6MB48#0gs  
涡旋时一定要盖上玻璃离心管（上述玻璃瓶）的盖子，盖子的内壁是PTFE材料，不含增塑剂。 94'&b=5+  
8
I=2lK  
x[ SDl(<@;  
.73X3`P25  
2、  关于Cleanert PAE（c）方法原理的说明 S,88*F(<^q  
1KU! tL  
采用正己烷溶解或提取邻苯二甲酸酯，同时也会溶解油脂及少量其他杂质。一般来说， Ki;*u_4{  
tj'\tW+s'  
油脂中含有甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯、脂肪酸，以及甘油三酯氧化产物（多见于经过热加工的含有产品）。用正己烷提取，不仅利用了其优良的溶解脂类的性质，保证对邻苯二甲酸酯的充分提取，也避免了采用乙腈这样相对极性较强的溶剂进行提取时，引入更多的极性杂质和溶剂转换的繁琐。 bL0yuAwF2  
#$.;'#u'so  
笔者认为，邻苯二甲酸酯的化学性质十分类似于油脂，也是酯类化合物，其极性介于甘油三酯和其他成分之间，而尤其是邻苯二甲酸壬酯和甘油三酯的极性较为接近，给分离带来难题。同时，邻苯二甲酸酯的分子量又和甘油一酯、脂肪酸等接近，采用传统GPC处理，不仅所需时间长，同时也不能完全将邻苯二甲酸酯和甘油一酯、脂肪酸等分开。 ?e%ZOI  
]}V<*f  
Cleanert PAE柱含有极性吸附填料和独特的GPC材料，利用其极性吸附的原理，可以从正己烷及乙酸乙酯：正己烷（1:1，v/v）的溶剂中去除极性杂质，如甘油一酯和脂肪酸等；同时独特的GPC材料可以使得大部分的甘油三酯在淋洗的时候即被正己烷淋洗下来。从而，可以去除大部分油脂成分。最终的洗脱液被吹干后，仅会剩下少量的甘油三酯。 -
{("mR&]  
QFA8N  
需要说明的是，因为邻苯二甲酸酯的各种性质和油脂的成分过于接近，而且要检测的物质有16种之多，其性质分布范围宽，为了要保证每一种物质的回收率，很难将它们和油脂基质的多种组分彻底分开。 49eD1h3'X[  
_?nL+\'V  
不过，最后可以采用与甘油三酯不互溶的乙腈来反萃取，可以既保证邻苯二甲酸酯的回收率，又能去除剩余的大部分甘油三酯。反萃取的时候，采用超声会提高邻苯二甲酸酯的回收率。 q9B$"n  
HVRZ[Y<^  
    而Cleanert PAEc中增加了吸附色素及其他复杂成分的炭材料，可以保证更加彻底地去除杂质。 { $oj.V 4  

w(*vj  
N ,'GN[s  
]_mb7X>  
:t"^6xt  
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下： F'={q{2wH  
6"LcJ%o  
)0.kv2o.  
r_)' Ps  
1、样品提取方法： tzWSA-Li  
Go`vfm"S  
1.1纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。 .KB^3pOpx  
XO>KZV7)  
1.2其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。 #5Qpu  
[SjqOTon{  
%^)fm
u  
7cuE7"  
2、固相萃取方法： JinU
V6cr  
h/QXPdV  
2.1若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下： l] K3Y\#bP  
Fx]WCQo  
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化； pE3 ?"YO  
7zl5yKN  
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中； eFB5=)l
d  
vRTkgH#4l  
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱； CmWeY$Jb  
&.F4b~A7  
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。 K$z2YJ%  
\Zb;'eDv  
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。 qfX6TV5J}!  
\wmN  
2.2若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同2、1。 C;v.S5x  
1l9G[o *  
l#&8x  
Q(
G#W+r  
补充说明： L]7=?vN=8  
=&6eM2>P  
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。 MyOd,vU
 
,};&tR  
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。 $L`d&$Vh  
_IMW{  
cbjs9bu  
l03B=$  
2F;y;l%  
z9f-.72"X  
Ng &% o  
eSn+B;  
L<c4kw  
y8y5*e~A-)  
sfH_5 #w  
W-f=]eWg  
,oe <   
hR n<em  
;}WeTA_-[  
%`r$g[<G  
,pfG  
A  'be
8  
|i*37r6]=  
TqQB@-!  
g =hg%gRy"  
.LZ?S"z$w  
h4}84}5d  
i"FtcP^  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS B@))8.h]  
]0OR_'?,  
色谱条件： ~P qM]^  
=%O6:YM   
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm DfD&)tsMQ  
 }v{LRRi  
进样口：250℃，不分流进样 G!##X: 6 '  
Y|qTyE%  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） ]/6z; ~3U  
J)>c9w  
进样量：1μL v1JzP#  
T>Z<]s  
流速：1 mL/min Fo_sgv8O<  
Om@;J%u/  
dT8S~-d%  
}X6m:#6  
质谱条件： rlLMT6r.8  
'<<t]kK[N  
接口温度：280℃ /6* 42[r  
_{KG 4+5\X  
电离方式：EI Fxz "DZY6  
<'*LRd$1  
电离能量：70eV eMsd37J  
b$joY*< 6  
溶剂延迟：7min Q &JUt(  
D,feF9  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 ~>|ziHx  
'=pU^
Oz<}  
N6:`/f+A>T  
y6a3tG  

序号	保留时间/min	中文名称	英文缩写	定量离子	辅助定量离子
1	8.351	邻苯二甲酸二甲酯	DMP	163	77
2	9.228	邻苯二甲酸二乙酯	DEP	149	177
3	11.018	邻苯二甲酸二异丁酯	DIBP	149	223
4	11.788	邻苯二甲酸二丁酯	DBP	149	223
5	12.135	邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯	DMEP	59	149、193
6	12.857	邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯	BMPP	149	251
7	13.231	邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯	DEEP	45	72
8	13.605	邻苯二甲酸二戊酯	DPP	149	237
9	15.805	邻苯二甲酸二己酯	DHXP	149	104、76
10	15.97	邻苯二甲酸丁基苄基酯	BBP	149	91
11	17.436	邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯	DBEP	149	223
12	18.108	邻苯二甲酸二环己酯	DCHP	149	167
13	18.345	邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯	DEHP	149	167
14	18.511	邻苯二甲酸二苯酯	—	225	77
15	20.785	邻苯二甲酸二正辛酯	DNOP	149	279
16	23.379	邻苯二甲酸二壬酯	DNP	149	57、71

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