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[重金属/有害元素]【分享】不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的系统解决方案 [复制链接]

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只看楼主 倒序阅读 使用道具 楼主  发表于: 2012-10-07
— 本帖被 admin 从 食品农产 移动到本区(2012-12-10) —
关键词： 食品邻苯二甲酸酯检测
此帖售价 3 世科币,已有 0 人购买 [记录] [购买]
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只看该作者 沙发  发表于: 2012-10-07
附件一： UYrzsUjg&  
_O,ZeES  
高效液相色谱法检测15种邻苯二甲酸酯的含量
KmOa^vY1.T  
=?Md&%j  
色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L） c+/C7C o  
5w{pX1z1  
流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50 ;O|63  
Time/min
A/%
B/%
0
40
60
2
50
50
10
60
40
12
70
30
20
70
30
31
100
0
40
100
0
40.01
40
60
mxA )r5s x  
流  速：1.0 mL/min 4PM`hc  
M )^9e?  
波  长：242 nm fEv36xb2S  
{K8T5zrV  
进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm） hAyPaS#  
ZS_f',kE  
样  品：15种邻苯二甲酸酯 $u"$mg7x  
? d\8Q't*  
浓  度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A） 'v  X"l  
EPy/6-5b  
溶  剂：正己烷 /40%流动相A }*.*{I  
a"0~_=  
柱  温：30℃ ] ),' =@  
sN2l[Ous  
图1 邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度：10ppm)
EA .U>5Fq  
aDuanGC/V  
（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP）  7I|Mq  
p~IvkW>ln)  
结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 0 i"OG( ,  
2uIAnbW]M  
附件二 . {I7sUQ  
气质联用法检测15种邻苯二甲酸酯
k"J?-1L  
]7;;uhn`  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS 1a<~Rmcil  
+dfSCs  
色谱条件： I,D=ixK  
"TPMSx&Ei  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm "2mVW_k  
Jm kJ^-A 6  
进样口：250℃，不分流进样 ec|IT0;  
gb-n~m[y  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） 52 oR^ |  
:H~r _>E  
进样量：1μL "QMHY\C  
"YivjHa7H  
流速：1 mL/min #p^D([k \  
{|qz>  
质谱条件： -50|r;a  
m$]?Jq  
接口温度：280℃ 4]Krx m`8  
<=WQs2  
电离方式：EI  $// /N+B  
zI&oZH^vn  
电离能量：70eV O>UR\l|+:2  
='a$>JVJ5  
溶剂延迟：7min ~i(X{ ^,3  
LEG y1L  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 L9"V$MO  
tv5G']vO\  
z.--"cF  
序号 a?_N8|k[  
 9ELLJ@oNC  
保留时间/min |\Nu+w   
 )[i0~o[  
中文名称 E0[ec6^qwY  
 LB1LQ 0M  
英文缩写 h\k@7wgu  
 `83s97Sa  
SIM离子 yhxen  
,T& =*q  
1 1j"_@?H[  
 lV924mh  
8.265 .LMOmc=(  
 :4JqT|nS  
邻苯二甲酸二甲酯 EC#4"bU`'2  
 D#"BY; J  
DMP k_ d)  
 wwmHr!b:6  
163、77 XL=Y~7b  
<;eXbO>Q  
2 b{+7sl  
 y&A 0}>a:d  
9.135 $!Qv f  
 0;J#".(KQ  
邻苯二甲酸二乙酯 [nYm-\M  
 h eR$j  
DEP Ng Jp2ut  
 A vh"(j  
149、177 }piDg(D  
jIvSjlmI  
3 J$+K't5BZ  
 S7(Vc H  
10.888 NA/hs/ '  
 /c4@QbB  
邻苯二甲酸二异丁酯 kv8 /UW  
 )a;ou>u  
DIBP "Vw;y+F}  
 J;R1OJs S  
149、223 +<TnE+>j  
wU $j/~L  
4 \|wUxijJ*,  
 S +mM S  
11.637 \[CPI`yQe  
 gd=gc<zYP  
邻苯二甲酸二丁酯 jSKhWxL;'  
 ?ZS/`P0}[  
DBP f?[0I\V[$  
 UifuRmn  
149、223 #eZm)KFQg  
`COnb@uD  
5 .r4M]1Of  
 %'`L+y  
11.979 fx#Krr @  
 7!kbe2/]'  
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 079mn/8;  
 J~=tR1 k  
DMEP o+F]80CH  
 PYPDK*Ie  
59、149、193 Z7:TPY$b  
-ZKo/ N>6}  
6 |o0?u:  
 ,'>,N/JA  
12.72 hDAxX= FM  
 D qh rg;  
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 rM5{R}+;  
 NL7CeHs5  
BMPP hantGw |  
 {iRXK   
149、251 "S ~(|G  
\n}@}E L  
7 ?9I=XTR  
 XNd%3r m,  
13.044 +T|M U  
 T|fmO<e *n  
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 S.Rq u+  
 [h;&r"1  
DEEP =iZj&B X  
 N~/D| ?P~2  
45、72 _pM~v>~*+  
nS`DI92I  
8 ?oKY"C8/  
 sh|@X\EZO  
13.41 W\W|v?r  
 &-s/F`  
邻苯二甲酸二戊酯 l[)ZEEP  
 +d=cI  
DPP Gx.iZOOH/  
 ML|O2e  
149、237 )w.\xA~|  
0VOj,)K=  
9 #t^y$9^  
 +Je(]b @  
15.552 (zm5 4 Vm  
 BgzER[g|q{  
邻苯二甲酸二己酯 R-8/BTls7  
 LHt{y3l]  
DHXP 7d7"^M  
 *=-o0c  
104、149、76 (Oc[j{6q  
(ei;Y~i  
10 q;))3aQe  
 N}Ol`@@#h  
15.694 5aF03+ko  
 hSgfp  
邻苯二甲酸丁基苄基酯 kAbkhZ1^  
 2V}tDN7c  
BBP uC3o@qGW<  
 vG(Gs=.U  
149、91 8oSndfV  
|bQX9|L  
11 z6)SaSYE  
 `.f<RVk-  
17.153 :)v4:&do  
 7|6uY  
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 nB?$W4  
 #C1u~db  
DBEP 'c 0]8Y 4  
 7/lXy3B4  
149、223 _}.BZ[i  
rvZXK<@#+  
12 =$6z1] ;3  
 Sw<@u+Z;%  
17.81 E7-il;`cKn  
 6m_ fEkS[  
邻苯二甲酸二环己酯 BwwOaO@L  
 $8gj}0}eH  
DCHP >ENZ['F  
 @&(0]kZ6  
149、167 T$[50~  
X6I"&yct  
13 &Z!O   
 PhTMXv<cE  
18.056 1vw [{.wC  
 i+rh&,  
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 (55k70>i3  
 ?r P'PUB  
DEHP eO7 )LM4  
 d2'1 6.lV  
149、167 Tfsx& k\  
s>pM+PoGYd  
14 P|U9f6^3  
 <D}y qq@|  
20.444 WR :I2-1  
 >^!)G^B  
邻苯二甲酸二正辛酯 S:= _o  
 q$iGeE#  
DNOP % 3kS;AaA  
 x?6 \C-i  
149、279 dTTC6?yPXf  
%=*nJvYS  
15 s2kom)  
 3uy^o  
22.98 )YY8`\F>1  
 (yO8G-Z0  
邻苯二甲酸二壬酯 LB\+*P6QM  
 B!AJ*  
DNP i~ITRi@  
 7OdJ&Gzd  
57、149、71 6QX2&[qWS  
 
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只看该作者 板凳  发表于: 2012-10-07
结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 >t Ll|O+  
:*0l*j  
附件三 NL76 jF  
,j|9Bs  
7g a|4j3%  
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 Kf!8PR$  
TtZ '~cGR  
n,+/%IZ  
P$=BmBq18`  
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表 SK @%r  
_3lci  
序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 6zGM[2  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 87.82% s$,gM,|cK  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 72.31% R zOs,  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 81.97% 2 ;z~xR  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 77.33% XmK2Xi;=b  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 83.87% '>wr _ f  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 83.83% ]f3eiHg*  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 109.08% N '8u}WO  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 86.36% 90 7N;r  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 84.67% v `a:Lj  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 98.33% ,u:J"epM  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 101.30% "}ms|  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 92.47% &!xePKvO6k  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 132.32% r~q(m>Ct6  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 89.73% 7z_ EX8^  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 70.10% uuD|%-Ng  
u{6b>c|,X  
yGxAur=dE  
   vj_[LFE  
@L9C_a  
)$> pu{ o  
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 ]gw[ ~  
mBrH`!  
1Zh4)6x  
Ue=Je~Ri;9  
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 ~OE1Sd:2  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 149.97% kA"|PtrW  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 93.49% UG!528;7  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 125.70% F YLBaN  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 136.89% *6` };ASK  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 90.84% Rt9S  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 82.29% QF74'  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 106.38% T!yI+<  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 88.14% LK}*k/eG  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 75.32% JnY.]:  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 89.56% 99YgQ Y]HO  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 105.05% E|K|AdL  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 72.94% [a[.tR38e  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 124.27% B4M rrW4=  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 78.19% qGXY  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 75.27% M->BV9  
 
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关于油脂中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案的补充说明 < z{,@Z}  
K)9f\1\  
Qf|c^B  
4zf(  
1、  关于Cleanert MAS-PAE（c）的注意事项 ]U5/!e  
'k9 1;T[  
Cleanert MAS-PAE（c）采用多种吸附材料，可以去除蛋白质、色素、油脂（在样品中含量少）以及水等，只剩下邻苯二甲酸酯被以乙腈为主的溶剂提取出来，然后可以经过过滤直接进样检测。方法方便快捷，十分适合于快速检测。 O)}5`0@L  
Ert` ]s~  
随方法可以提供12mL和40mL透明玻璃瓶作为玻璃离心管，分别可配套10mL和50mL离心转子。 &y:SK)  
9AZpvQ  
涡旋时一定要盖上玻璃离心管（上述玻璃瓶）的盖子，盖子的内壁是PTFE材料，不含增塑剂。 jftf]n&Z(q  
=BBDh`$R  
*`bAu *  
?-9It|R  
2、  关于Cleanert PAE（c）方法原理的说明 kY`L[1G$  
I?%iJ%  
采用正己烷溶解或提取邻苯二甲酸酯，同时也会溶解油脂及少量其他杂质。一般来说， <LA!L  
eh} {\P  
油脂中含有甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯、脂肪酸，以及甘油三酯氧化产物（多见于经过热加工的含有产品）。用正己烷提取，不仅利用了其优良的溶解脂类的性质，保证对邻苯二甲酸酯的充分提取，也避免了采用乙腈这样相对极性较强的溶剂进行提取时，引入更多的极性杂质和溶剂转换的繁琐。 /l$>W<}@  
@b"J FB|  
笔者认为，邻苯二甲酸酯的化学性质十分类似于油脂，也是酯类化合物，其极性介于甘油三酯和其他成分之间，而尤其是邻苯二甲酸壬酯和甘油三酯的极性较为接近，给分离带来难题。同时，邻苯二甲酸酯的分子量又和甘油一酯、脂肪酸等接近，采用传统GPC处理，不仅所需时间长，同时也不能完全将邻苯二甲酸酯和甘油一酯、脂肪酸等分开。 T_*R^Ukb5  
DZ~qk+,I  
Cleanert PAE柱含有极性吸附填料和独特的GPC材料，利用其极性吸附的原理，可以从正己烷及乙酸乙酯：正己烷（1:1，v/v）的溶剂中去除极性杂质，如甘油一酯和脂肪酸等；同时独特的GPC材料可以使得大部分的甘油三酯在淋洗的时候即被正己烷淋洗下来。从而，可以去除大部分油脂成分。最终的洗脱液被吹干后，仅会剩下少量的甘油三酯。 HCTjFW>C  
;;g'C*_  
需要说明的是，因为邻苯二甲酸酯的各种性质和油脂的成分过于接近，而且要检测的物质有16种之多，其性质分布范围宽，为了要保证每一种物质的回收率，很难将它们和油脂基质的多种组分彻底分开。 Km9Y_`?  
N++ jI(  
不过，最后可以采用与甘油三酯不互溶的乙腈来反萃取，可以既保证邻苯二甲酸酯的回收率，又能去除剩余的大部分甘油三酯。反萃取的时候，采用超声会提高邻苯二甲酸酯的回收率。 _@Le MNv  
4PzCm k  
    而Cleanert PAEc中增加了吸附色素及其他复杂成分的炭材料，可以保证更加彻底地去除杂质。 =Vm"2g,aA  
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只看该作者 4楼 发表于: 2012-10-07
含油脂食品中邻苯二甲酸酯类化合物的检测的样品前处理
-"Y{$/ B  
&AuF]VT  
to8X=80-3  
G1t\Q-|l0  
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下： ~'5  
vhvdKD  
/sR%]q |L  
_8}QlT  
1、样品提取方法： FtufuL?JS  
vN4Qdpdb  
1.1纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。 PCd0 ?c   
\ JG8KE=j  
1.2其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。 9/SXs0  
8$|8`;I(  
=k}SD96  
UH@a s  
2、固相萃取方法： UX`]k{Mz  
H-rWDN#  
2.1若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下： Zn:R PMk*  
Bhp OXqg  
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化； u{&B^s)k.  
QH4wUU3X  
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中； Ot&:mT!2  
0uVv<Q~  
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱； tc_f;S`k  
I4H`YOD%  
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。 si1*Wt<3Bc  
1,2EhfX|s  
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。 (lA.3 4.p  
4}v@C|.p  
2.2若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同2、1。 =1/NFlt8  
R U"/2i  
a+41|)pt  
AWr}"r?s  
补充说明： -=$2p0" R  
 ~m=EM;  
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。 A//?6O Jx?  
6/ g%\ka  
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。 g9tu %cIkR  
SQ(apc}N4  
6k0^x Q  
3><u*0qe%I  
E{^^^"z P  
/lD?VE  
-f>'RI95>  
sOC&Q&eg  
WYIw5 jzC  
E20&hc5 8  
#}o<v|;  
I6dm@{/:>  
TbNGgjT  
:,F=w0O  
-<oZ)OfU  
*T4ge|zUc  
T-P@u-DU  
&%e"9v2`  
WEC-<fN|Y\  
\Da~p9 T&  
气质联用法检测16种邻苯二甲酸酯
MZ^Ch   
2{};6{yz  
@7| )RSBQz  
Ph\F'xROe  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS 2$Y3[$  
%#Q #N,fw  
色谱条件： 2^ kn5  
Oi#k:vq4  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm %,E7vYjT%  
,dq`EsHg`M  
进样口：250℃，不分流进样 L/%xbm~  
oPE.gn_$  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） Is~yVB02  
4v i B=>  
进样量：1μL |O 'Hh7  
LIc*tsl  
流速：1 mL/min g8B&u u #  
:  ,|=Q}  
~p0 e=u  
  U5T^S  
质谱条件： pyGFDB5_P  
Z z{[Al{  
接口温度：280℃ L2do 2_  
UzP@{?  
电离方式：EI OpbszSl"y  
~QQEHx\4zZ  
电离能量：70eV Zi15wE  
W,L>'$#pM  
溶剂延迟：7min !ds"88:5^  
2xz%'X%  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 ]y$V/Ij=qK  
xOX*=Wv  
n8y,{|  
Sj=69>m]5  
序号
保留时间/min
中文名称
英文缩写
定量离子
辅助定量离子
1
8.351
邻苯二甲酸二甲酯
DMP
163
77
2
9.228
邻苯二甲酸二乙酯
DEP
149
177
3
11.018
邻苯二甲酸二异丁酯
DIBP
149
223
4
11.788
邻苯二甲酸二丁酯
DBP
149
223
5
12.135
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯
DMEP
59
149、193
6
12.857
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯
BMPP
149
251
7
13.231
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯
DEEP
45
72
8
13.605
邻苯二甲酸二戊酯
DPP
149
237
9
15.805
邻苯二甲酸二己酯
DHXP
149
104、76
10
15.97
邻苯二甲酸丁基苄基酯
BBP
149
91
11
17.436
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯
DBEP
149
223
12
18.108
邻苯二甲酸二环己酯
DCHP
149
167
13
18.345
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯
DEHP
149
167
14
18.511
邻苯二甲酸二苯酯
—
225
77
15
20.785
邻苯二甲酸二正辛酯
DNOP
149
279
16
23.379
邻苯二甲酸二壬酯
DNP
149
57、71
 el*pYI  
wshp{ y  
8BoT%kVeJv  
&l!{!f4  
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