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[重金属/有害元素]【分享】不同基质食品中邻苯二甲酸酯检测的系统解决方案 [复制链接]

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只看楼主 倒序阅读 使用道具 楼主  发表于: 2012-10-07
— 本帖被 admin 从 食品农产 移动到本区(2012-12-10) —
关键词： 食品邻苯二甲酸酯检测
此帖售价 3 世科币,已有 0 人购买 [记录] [购买]
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只看该作者 沙发  发表于: 2012-10-07
附件一： (Lh!7g/0N  
]xb2W~  
高效液相色谱法检测15种邻苯二甲酸酯的含量
G eB-4img  
ER&\2,fZ  
色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L） *Ev8f11i&  
l$HBYA\Qh  
流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50 >OjK0jiPf  
Time/min
A/%
B/%
0
40
60
2
50
50
10
60
40
12
70
30
20
70
30
31
100
0
40
100
0
40.01
40
60
vGJw/ij'X  
流  速：1.0 mL/min U F89gG4  
]*)l_mut7  
波  长：242 nm e!C,<W&B\  
4@ny%_/  
进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm） DmB?.l-  
Ib/e\+H\  
样  品：15种邻苯二甲酸酯 ?g *.7Wc  
=gd~rk9  
浓  度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A） a`C2:Z23(#  
(ze9-!%  
溶  剂：正己烷 /40%流动相A 4a.8n!sys  
sbhUW>%.  
柱  温：30℃  [cfXcl  
 N=!k2+  
图1 邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度：10ppm)
|B\76Nk  
I]91{dq  
（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP） %w3tzE1Hq  
3#`Sk`z<  
结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 .;:dG  
StLbX?d6  
附件二 +3R/g@n  
气质联用法检测15种邻苯二甲酸酯
)u=a+T  
m{ rsj dnA  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS ,Q+.kAh !G  
:CXm@yF~4=  
色谱条件： Cuom_+wV&  
mf gUf  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm wG&rkg";#  
O|&SL03Z8  
进样口：250℃，不分流进样 EzXi*/  
o? wEX%  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） =5 $BR<'  
d PF*G$  
进样量：1μL nM H:7[x3  
Lz`_&&6  
流速：1 mL/min 9&OhCrxW-  
Z" dU$ ,n  
质谱条件： / *m6-DC  
'2ACZcjDSv  
接口温度：280℃ NnO%D^P]  
fWl #CI\]  
电离方式：EI V_jGL<X|  
(kSb74*g  
电离能量：70eV 71,GrUV:  
G3.\x_;k  
溶剂延迟：7min (%*~5%l\  
]t_ Wl1*|  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 a!;CY1>  
~!'T!g%C  
0MN)Z(Sa  
序号 \d QRQL{LL  
 Y$FhV~m  
保留时间/min 4&H&zST//m  
 {hx=6"@  
中文名称 B'D~ Q  
 *ub"!}$st  
英文缩写 -Vj112 fI  
 S,RC;D7  
SIM离子 |/!RN[<   
8lF:70wia  
1 ^fvx 2<  
 $H1igYc  
8.265 y_{v&AGmgm  
 uar[D|DcD"  
邻苯二甲酸二甲酯 }1P v6L(o)  
 Ve t<,;Te  
DMP ]}nX$xy  
 NucLf6  
163、77 +<f!#4T  
wKAxUPzm  
2 I9kBe}g3  
 _H$Z }2g<z  
9.135 jN2Xoh9  
 s:Z1 ZAxv  
邻苯二甲酸二乙酯 <W88;d33r=  
 pOIfKd  
DEP @RLlkWGc  
 I}1<epd ,  
149、177 ,4kipJ!,yK  
0/?=FM >  
3 ?1lx8+  
 ,ikn%l#cm  
10.888 K2t|d[r  
 C**kJ  
邻苯二甲酸二异丁酯 m4kUA"n5  
 5}_DyoV  
DIBP 3 Ho<4_I ,  
 U0%m*i  
149、223 k84JDPu#  
BFyVq  
4 j=,]b6(  
 Ws(#ThA  
11.637 Nm]\0m0p-  
 #.n%$r  
邻苯二甲酸二丁酯 4?{e?5)  
 ij=}3;L_!  
DBP -dn\*n5  
 R_2JP C  
149、223 s~(iB{-  
%CP:rAd`M.  
5 B^SD5  
 !be6}  
11.979 'MHbXFM  
 ,/;mK_6  
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 0UmKS\P  
 38%xB<Y  
DMEP 3 G?^/nB  
 onM ~*E  
59、149、193 @83h/Wcxd  
eiJO;%fl>l  
6 dF{3 ~0+,  
 Tw{H+B"uVz  
12.72 /LM*nN$%  
 {}?s0U$5  
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 }(AUe5aw`G  
 v.)'b e*u  
BMPP br}.s@~  
 !W/Og 5n  
149、251 Z~ 8Xp  
n<Z;Xh~F  
7 C81+nR  
 m^h"VH,   
13.044 fyx-VXu  
 *%'4.He7V  
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 @g[p>t> *  
 JrseU6N  
DEEP \,[Qg#W$u  
 zUXqTcj  
45、72 b.h~QyI/W  
w48T?  
8 (p68Qe%OuG  
 +uKlg#wqc  
13.41 9Z6] ];8E  
 v(FO8*5DZ  
邻苯二甲酸二戊酯 el.;T*Wn  
 JV/K ouL  
DPP eq "a)QB3m  
 2hw3+ o6  
149、237 ,78 QLh9:  
|M[E^  
9 e~ W35Y>A  
 >VE,/?71@  
15.552 %QVX1\>]  
 >9F s)R]P  
邻苯二甲酸二己酯 hc"+6xc  
 :tedtV ~  
DHXP a/NmM)  
 F8Rd#^9PD  
104、149、76 9FP6Z[4  
^IjKT  
10 y/$WjFj3"  
 [`Ol&R4 k  
15.694 E=Ah_zKU  
 `pn]jpW9  
邻苯二甲酸丁基苄基酯 |+~CdA  
 E b-?wzh  
BBP Tsxl4ZK  
 D?44:'x+-  
149、91 *TfXMN ?w  
>2x[ub%$L  
11 &?" (al?  
 SQDllG84E  
17.153 mDEO$:A  
 jAB~XaT,  
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 Y #E/"x%+  
 Qh<_/ X?  
DBEP 5,cq-`  
 R*VRxQ,h6+  
149、223 KV0M^B|W  
Xb6X'rY  
12 aMKi`EW  
 L}Nc kL  
17.81 @px2/x  
 %ub\+~  
邻苯二甲酸二环己酯 t)o!OEnE  
 w 6FtDl$  
DCHP $p? gai{o  
 ip.aM#  
149、167 <uq#smY  
BO]}E:C9  
13 nz-( 8{ae  
 wP-BaB$_  
18.056 LYM(eK5V  
 \M(#FS  
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 "WPFZw:9  
 tZ4Zj`x|^  
DEHP <Wz+f+HC  
 <OR f{   
149、167 v J `'x  
7"|j.Yq$H{  
14 xW hi>  
 "~-Y 'O  
20.444 4R8W ot  
 ga#Yd}G^~3  
邻苯二甲酸二正辛酯 fxR}a,a  
 [>pqf  
DNOP 02_37!\  
 #"Wh$ x%  
149、279 Q<e`0cu|p  
tFYIKiq2  
15 ilyQ gEjC  
 .QhH!#Y2D  
22.98 ? 77ye  
 MKuy?mri~  
邻苯二甲酸二壬酯 $=97M.E  
 C+WHg-l  
DNP +  njE  
 `;^%t  
57、149、71 4LU'E%vlC  
 
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只看该作者 板凳  发表于: 2012-10-07
结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。 Exr 7vL  
:m\KQ1sq  
附件三 tp<VOUa  
w^gh&E  
+$t%L   
牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 &}O!l'  
l i-YkaP  
]aNnY?qW5  
D OeKW  
按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表 {M/c!  
s~ A8/YoU}  
序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 P-[K*/bPw  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 87.82% .5 ;LL,S-  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 72.31% ,<b|@1\k  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 81.97% + f!,K  
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 77.33% RJwIN,&1.  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 83.87% d~-p;i  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 83.83% S.|kg2  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 109.08% Uy5!H1u  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 86.36% l/zC##1+.  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 84.67% Y{vwOs  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 98.33% "%''k~UD 4  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 101.30% [ []SkLZHg  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 92.47% }BdVD t  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 132.32% x X/s1(P  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 89.73% ]]=fA 4(  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 70.10% ;=+Zw1/g  
N^ s!!Sbpq  
Ft;u\KT  
   mw(c[.*%  
G_M:0YI@  
wY3|#P CDV  
某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率 _2m[(P9d  
UXwB$@8  
c.(Ud`jc  
qE0FgqRB  
按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表序号 保留时间/min 中文名称 英文缩写 回收率 &nqdl+|G*  
1 8.337 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 149.97% 0R @g(  
2 9.214 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 93.49% \E$1lc  
3 10.996 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 125.70% 3@^>#U   
4 11.759 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 136.89% cy)k<?,  
5 12.11 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 90.84% (Sth:{;  
6 12.864 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 BMPP 82.29% pi`;I*f/  
7 13.201 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 106.38% ;/@?6T"  
8 13.576 邻苯二甲酸二戊酯 DPP 88.14% jHAWK9fa  
9 15.757 邻苯二甲酸二己酯 DHXP 75.32% jg[5UTkcs  
10 15.923 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 89.56% i?F[||O"$  
11 17.377 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 105.05% J?C k4dQ  
12 18.041 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 72.94% sN m,Fmuz:  
13 18.28 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 124.27% @l'G[jN5  
14 20.718 邻苯二甲酸二正辛酯 DNOP 78.19% ?*[\UC  
15 23.303 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 75.27% t)9]<pN%  
 
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关于油脂中邻苯二甲酸酯的检测的系统解决方案的补充说明 S,88*F(<^q  
l0|5t)jF-  
fW?vdYF  
Sj3+l7S?  
1、  关于Cleanert MAS-PAE（c）的注意事项 ]_)yIi"  
v&6-a*<Z  
Cleanert MAS-PAE（c）采用多种吸附材料，可以去除蛋白质、色素、油脂（在样品中含量少）以及水等，只剩下邻苯二甲酸酯被以乙腈为主的溶剂提取出来，然后可以经过过滤直接进样检测。方法方便快捷，十分适合于快速检测。 B`EJb71^Xy  
jVEGj5F;N  
随方法可以提供12mL和40mL透明玻璃瓶作为玻璃离心管，分别可配套10mL和50mL离心转子。 49eD1h3'X[  
[ |v][Hwv  
涡旋时一定要盖上玻璃离心管（上述玻璃瓶）的盖子，盖子的内壁是PTFE材料，不含增塑剂。 ::`HQ@^  
TP* hd  
GC-5X`Sq  
Zpt\p7WQ  
2、  关于Cleanert PAE（c）方法原理的说明 =nHUs1rKn  
n9\TO9N  
采用正己烷溶解或提取邻苯二甲酸酯，同时也会溶解油脂及少量其他杂质。一般来说， RH W]Z Pr<  
Z-%\ <zT  
油脂中含有甘油三酯、甘油二酯、甘油一酯、脂肪酸，以及甘油三酯氧化产物（多见于经过热加工的含有产品）。用正己烷提取，不仅利用了其优良的溶解脂类的性质，保证对邻苯二甲酸酯的充分提取，也避免了采用乙腈这样相对极性较强的溶剂进行提取时，引入更多的极性杂质和溶剂转换的繁琐。 AYBns]!  
, >a&"V^k  
笔者认为，邻苯二甲酸酯的化学性质十分类似于油脂，也是酯类化合物，其极性介于甘油三酯和其他成分之间，而尤其是邻苯二甲酸壬酯和甘油三酯的极性较为接近，给分离带来难题。同时，邻苯二甲酸酯的分子量又和甘油一酯、脂肪酸等接近，采用传统GPC处理，不仅所需时间长，同时也不能完全将邻苯二甲酸酯和甘油一酯、脂肪酸等分开。 Pm6p v ;WK  
,Zx0%#6  
Cleanert PAE柱含有极性吸附填料和独特的GPC材料，利用其极性吸附的原理，可以从正己烷及乙酸乙酯：正己烷（1:1，v/v）的溶剂中去除极性杂质，如甘油一酯和脂肪酸等；同时独特的GPC材料可以使得大部分的甘油三酯在淋洗的时候即被正己烷淋洗下来。从而，可以去除大部分油脂成分。最终的洗脱液被吹干后，仅会剩下少量的甘油三酯。 r8?gD&c}  
UW={[h{.|@  
需要说明的是，因为邻苯二甲酸酯的各种性质和油脂的成分过于接近，而且要检测的物质有16种之多，其性质分布范围宽，为了要保证每一种物质的回收率，很难将它们和油脂基质的多种组分彻底分开。 =j_4S<  
)r?}P1J7  
不过，最后可以采用与甘油三酯不互溶的乙腈来反萃取，可以既保证邻苯二甲酸酯的回收率，又能去除剩余的大部分甘油三酯。反萃取的时候，采用超声会提高邻苯二甲酸酯的回收率。 C==hox7b  
!*&V- 4  
    而Cleanert PAEc中增加了吸附色素及其他复杂成分的炭材料，可以保证更加彻底地去除杂质。 2,oKVm+  
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含油脂食品中邻苯二甲酸酯类化合物的检测的样品前处理
!N^@4*  
8oGRLYU N  
QJ;2ZN,  
UiNP3TJ'L  
经过一段时间，笔者检测了多种实际食品样品中的邻苯二甲酸酯类化合物，发现最为困难的是含有油脂的样品的样品前处理。在之前的系统解决方案的基础上，将最近的心得总结如下： 2~V*5~fb  
i6Gu@( 8Q  
8P`"M#fI  
`]aeI'[}R  
1、样品提取方法： zuCSj~  
l ,).p  
1.1纯油脂样品：用万分之一天平称取0.1g样品，置于玻璃离心管中，然后加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000rpm离心2min，将上清液转移至一玻璃管中，在40℃下以氮气吹干，加入1mL正己烷，轻轻振荡摇匀，作为待净化液。 6LhTBV  
6u%&<")4HP  
1.2其他含油脂样品：考虑到方法的普适性，参考GBT21911-2008，称取0.5g混合均匀的含油脂的样品，加5mL正己烷涡旋2min，（若样品中含有水，可在此时加入适量的无水硫酸钠），超声2min，以4000rpm离心2min，取上清液，作为待净化液。 VU#7%ufu&  
1;iUWU1@  
+7a6*;\ y  
SX#&5Ka/  
2、固相萃取方法： =pr7G+_u  
x~sBzTa  
2.1若样品中不含色素等杂质，可采用Cleanert PAE柱。具体方法如下： kf9X$d6   
 5twhm  
（1）活化：将Cleanert PAE固相萃取柱用5mL正己烷活化； Xc.`-J~Il  
WzWX E(  
（2）上样：将待净化液全部加到固相萃取柱中； kcEeFG;DQ  
#E]59_  
（3）淋洗：用10mL 1%乙酸乙酯的正己烷溶液淋洗固相萃取柱； 9 $ X-  
]^]wP]R_  
（4）洗脱：用5mL 50%乙酸乙酯的正己烷溶液洗脱固相萃取柱。 z{>Rc"%\  
%)wjR/o  
收集洗脱液，在40℃下以氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋1min，超声1min，以4000rpm离心2min，取上清液进GC/MS检测。 r*Xuj=  
9FX-1,Jx  
2.2若样品中含有色素等杂质，可采用Cleanert PAE-C柱。具体操作方法同2、1。 7o4\oRGV  
%$mA03[MQ  
-HuA \0J  
(#'>(t(4  
补充说明： He)%S]RLk  
[!z,lY>  
Cleanert MAS-PAE管和Cleanert MAS-PAEc管作为一种快速检测方法，被推荐用于不含油脂或含油脂较少的样品中，如牛奶、酸奶等。 $u.z*b_yy  
7 3m1  
本方案中Cleanert PAE和Cleanert PAE-C柱的固相萃取方法，理论上可适用于所有样品。相比之前的方案，增加了淋洗强度，有助于尽可能去除极性比邻苯二甲酸酯类物质小的甘油三酯（在油脂中的含量大于95%），从而提高了净化效果。 oQ#8nu{k  
PeT'^?>  
d5.4l&\u  
pGZ8F  
_^;Z~/.  
Ngwb Q7)  
'7/)Ot(  
~zgGa:uU  
 <Uur^uB  
ebq4g387X  
dI2 V>vk  
*#2h/Q.  
B1gR5p0  
edD)TpmE,  
KXrjqqXs  
Q/?$x*\>  
gr{ DWCK  
*i,%,O96Nz  
V+\Wb[zDJ  
J4'eI[73  
气质联用法检测16种邻苯二甲酸酯
54,er$$V  
RCrCs  
 }ZI 7J  
`L zPotz  
仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS hp2t"t  
gR**@t=;j  
色谱条件： wY#E?,  
}C:r 9? T  
色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm b 6p|q_e  
eRYK3W  
进样口：250℃，不分流进样 D- c4EV  
UZMd~|  
程序升温：50℃（1min）20℃/min  220℃（1min）5℃/min 280℃（4min） G2D$aSh  
L#J1b!D&<6  
进样量：1μL *VcJ= b 2Y  
u[YGm:}  
流速：1 mL/min \~W'v3:W  
>Ry01G]_/h  
%v|B *  
;TYBx24vD'  
质谱条件： )e{aN+  
lN@o2QX  
接口温度：280℃ 'DR!9De  
9w"*y#_  
电离方式：EI V0@=^Bls  
>Tgv11[  
电离能量：70eV )7F/O3Tq  
dPlV>IM$z  
溶剂延迟：7min Ml_^ `vn  
/v{I  
监测方式：SIM模式，监测离子见下表 B\~ }3!j  
XFl 6M~ c  
d]9z@Pd   
{7[Ox<Ho  
序号
保留时间/min
中文名称
英文缩写
定量离子
辅助定量离子
1
8.351
邻苯二甲酸二甲酯
DMP
163
77
2
9.228
邻苯二甲酸二乙酯
DEP
149
177
3
11.018
邻苯二甲酸二异丁酯
DIBP
149
223
4
11.788
邻苯二甲酸二丁酯
DBP
149
223
5
12.135
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯
DMEP
59
149、193
6
12.857
邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯
BMPP
149
251
7
13.231
邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯
DEEP
45
72
8
13.605
邻苯二甲酸二戊酯
DPP
149
237
9
15.805
邻苯二甲酸二己酯
DHXP
149
104、76
10
15.97
邻苯二甲酸丁基苄基酯
BBP
149
91
11
17.436
邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯
DBEP
149
223
12
18.108
邻苯二甲酸二环己酯
DCHP
149
167
13
18.345
邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯
DEHP
149
167
14
18.511
邻苯二甲酸二苯酯
—
225
77
15
20.785
邻苯二甲酸二正辛酯
DNOP
149
279
16
23.379
邻苯二甲酸二壬酯
DNP
149
57、71
/vt3>d%B;  
w0. u\  
kh<2BOV  
X}]-*T|a  
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